그림 3. 매우 긴 단편의 연결. 결과에 따르면 10923ES의 콜로니 수가 많고 양성률은 100%입니다.A: 재조합 형질 전환 플레이트. 벡터(21kb)와 삽입 단편(4.5kb)의 몰 비율은 1:2입니다.B: 삽입 단편의 PCR 식별 전기영동, M: Yeasen 10505ES. 벡터 양: 20 μL 반응 시스템에서 200 ng, 반응 조건: 50°C, 40분.
설명
Hieff Clone™ Universal II One Step Cloning Kit은 새롭게 업그레이드된 클로닝 키트입니다.
신중하게 최적화된 2세대 2× Hieff Clone™ Universal II Enzyme Premix는 재조합 효소와 재조합 반응에 필요한 완충액에 독특한 재조합 증강제를 추가하여 재조합 클로닝의 효율성을 크게 향상시킵니다.
이 키트는 정제되지 않은 PCR 산물, 직접 회수된 PCR 산물, 저농도의 고무 회수 산물과 호환되는 모든 벡터의 모든 부위에 PCR 산물을 복제하도록 지시할 수 있으며, 이 제품은 조인트 단편의 30%-70%의 상동성 팔 GC 함량을 재조립할 수 있습니다. 벡터는 완전히 선형화되었고, 15-25bp의 선형화된 벡터 말단의 상동 서열이 삽입된 단편의 양성 및 역방향 PCR 프라이머의 5' 말단에 도입되어 삽입된 단편의 PCR 산물의 5' 및 3' 말단이 각각 선형화된 벡터의 두 말단에 해당하는 정확히 동일한 서열을 갖게 되었습니다. 재조합 효소의 작용 하에, PCR 산물과 선형화된 벡터의 재조합 반응은 50℃에서 단 5분 만에 완료될 수 있습니다. 클로닝의 양성률은 95% 이상에 도달할 수 있습니다.
특징
간단합니다: 단일 반응으로 최대 6개의 DNA 조각을 복제합니다.
유연성: 설계 가이드라인에 따라 원하는 벡터에 조립할 수 있습니다.
효율성: 1~7개 조각의 결찰에 효율적입니다.
응용 프로그램
빠른 클로닝: 여러 개의 겹치는 DNA 조각을 한 단계로, 5~50분 동안 등온 반응을 거쳐 완벽하게 연결할 수 있습니다.
지시된 복제; 부위지정 돌연변이 유발.
명세서
결찰 |
최대 7개의 조각 |
제품 유형 |
DNA 조립 |
구성 요소
구성품 번호 |
이름 |
10923ES05 ( 5톤 ) |
10923ES20 ( 20톤 ) |
10923ES50 ( 50톤 ) |
10923 -아 |
2 × 히프 클론 TM 유니버셜 II 효소 프리믹스 |
50 μL |
200 μL |
500 μL |
10923 -비 |
500bp 대조 인서트( 25ng / μL ) |
5 μL |
5 μL |
5 μL |
10923 -씨 |
pUC 19 대조 벡터, 선형화(50 ng/ μL ) |
5 μL |
5 μL |
5 μL |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 1일간 보관하시기 바랍니다. 연령.
그림
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수치 1. 10 ng 저투입 단일 단편은 6μL 소형 시스템의 비소생 수용 상태에서 연결되었습니다. 결과는 10923ES가 경쟁 제품보다 성능이 더 우수했으며, 연결 효율성이 높고, 콜로니가 더 많고, 양성률이 100%였습니다. AB: 클로니 플레이트. 캐리어(10kb)와 삽입 단편(1kb)의 몰 비율은 1:2였습니다. C: 삽입 단편 PCR로 식별한 전기영동 맵, M: YEASEN 10505ES.
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그림 2. 6개의 단편(총 길이 7.6kb)을 11.6kb 플라스미드로 클로닝했습니다. 결과에 따르면 10923ES는 경쟁 제품보다 성능이 더 좋았으며, 콜로니가 더 많았고 양성률이 100%였습니다. AB: 콜로니 플레이트. 캐리어(11.6kb)와 삽입 단편의 몰 비율은 1:2였습니다. C: 삽입 단편의 전기영동 분석, M: YEASEN 10505ES. 플라스미드 투입량 : 200ng/20μL, 50°C, 50분.
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관련 인용 및 참조:
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