Hifair ^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit은 SYBR Green I 염색제를 기반으로 하는 형광 정량화용 키트입니다. 유전자 특이적 프라이머를 사용하여 역전사 및 qPCR 반응을 하나의 튜브에서 완료하여 캡을 반복적으로 열고 피펫팅할 필요가 없어 분석 효율이 크게 향상되고 오염 위험이 줄어듭니다. RNA 샘플의 경우 이 키트는 효율적인 cDNA 합성을 위해 내열성 Hifair ^™ V 역전사효소를 사용하고 정량적 증폭을 위해 UNICON ^™ HotStart Taq DNA Polymerase를 사용합니다. 최적화된 완충액 시스템에서 키트의 감도는 고발현 대상의 경우 최대 0.1 pg, 중간 발현 대상의 경우 최대 1 pg가 될 수 있으며 이 키트는 DNA 샘플의 증폭 및 정량화에도 적합합니다. 이 키트는 DNA 샘플의 증폭 및 정량화에 적합합니다. 다양한 식물 및 동물 샘플, 세포 및 미생물의 핵산을 민감하게 검출하고 정량화할 수 있습니다.

명세서

구성 요소

저장

본 제품은 -25~-15℃에서 보관하시기 바랍니다. 빛으로부터 멀리 1년.

지침

1. 반응 체계 구성*****

* Low Rox 모델과 Rox 보정이 없는 모델은 위의 반응 시스템에 따라 직접 제조됩니다. High Rox 모델을 사용할 때는 Hieff™ SP High Rox를 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer에 1:250 v/v로 첨가하고 잘 섞은 후 원심분리합니다. Hieff™ SP High Rox가 포함된 2× Hifair ^™ Advanced SG Buffer는 Low Rox 및 No Rox 보정 모델 사용에 영향을 미치지 않습니다.

** 최종 프라이머 농도는 0.2 μmol/L이었으며, 필요에 따라 0.1~1 μmol/L 사이에서 조절될 수 있습니다.

*** 이 시약은 매우 민감하여 총 RNA 범위가 1 pg~1 μg이고, 인간 샘플 테스트 결과 최적의 입력은 1 pg~100 ng으로 나타났으며, 적절한 경우 전체 Ct 값을 15~30 범위로 제어했습니다.

**** 타겟 유전자 증폭의 유효성과 재현성을 보장하기 위해 20 μL 또는 50 μL를 사용하는 것이 좋습니다.

***** 초청정 벤치에서 준비하고 뉴클레아제 잔류물이 없는 팁과 반응 튜브를 사용하십시오. 필터 ​​카트리지가 있는 팁을 권장합니다. 교차 오염 및 에어로졸 오염을 피하십시오.

2) 반응 프로그램

*역전사 온도는 실험적 필요에 따라 50-55°C 사이에서 선택할 수 있습니다. DNA 샘플의 경우 역전사 과정을 생략할 수 있습니다.

** 특별한 경우 어닐링/연장 온도는 프라이머 Tm 값에 따라 조절될 수 있으며, 60°C가 권장됩니다.

3）적용 모델

Rox 교정이 필요하지 않은 계측기 모델:

바이오라드: CFX96, CFX384, 아이사이클러 iQ, iQ5, MyiQ, 미니옵티콘, 옵티콘, 옵티콘 2, 크로모4;

에펜도르프: 마스터사이클러 ep 리얼플렉스, 리얼플렉스 2 s;

퀴아젠: 코벳 로터진 Q, 로터진 3000, 로터진 6000;

로슈 응용과학: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Low Rox 적용 모델:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 및 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

스트라타진 MX3000P, MX3005P, MX4000P;

High Rox 적용 모델*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT 패스트, 스텝원, 스텝원 플러스.

* High Rox 모델의 경우 Hieff™ SP High Rox를 2 x Hifair ^™ 에 비례하여 추가해야 합니다. 사용 전 고급 SG 버퍼를 사용하세요.

노트

1. 이 제품은 연구 목적으로만 사용됩니다.
2. 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용해 주시기 바랍니다.

서류:

매뉴얼