설명
CRISPR/Cas9는 RNA 지향 Cas 뉴클레아제가 표적 유전자에 특정 DNA 변형을 가하는 기술로, 박테리아와 고세균이 파지와 이물질 플라스미드의 공격에 대응하여 진화시킨 획득 면역 방어 메커니즘입니다. 이 시스템에서 Cas9 뉴클레아제는 인공적으로 최적화된 단일 가이드 RNA(sgRNA)로 유도되어 표적 부위에서 이중 가닥 DNA(dsDNA)를 절단하여 DNA가 끊어집니다. DNA는 비상동성 말단 접합 또는 상동성 지향 복구 메커니즘으로 생체 내에서 복구되어 프레임시프트 돌연변이, 유전자 교체 또는 삭제가 발생합니다.
HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit은 T7 RNA polymerase 혼합물을 사용하여 spCas9 sgRNA를 효율적으로 전사합니다. 이 키트에는 Cas9 단백질이 인식하고 스캐폴드 역할을 하는 특정 시퀀스가 포함되어 있습니다. 시퀀스의 일부는 사용자가 설계한 타겟 특정 시퀀스와 부분적으로 겹칠 수 있습니다. 상보적 가닥은 DNA polymerase로 채워져 전사를 위한 dsDNA 템플릿을 생성합니다. 제공된 시약과 사용자가 설계한 특정 DNA 시퀀스를 사용하여 이 키트는 단일 튜브 반응에서 4시간 이내에 20-100μg의 기능적 sgRNA를 얻을 수 있습니다.
특징
높은 합성 수율 : 4시간 동안의 단일 튜브 반응에서 sgRNA 수율은 20~100μg에 도달할 수 있습니다.
폭넓은 적용 범위 : 다양한 유형의 sgRNA에서 높은 수율을 얻을 수 있습니다.
높은 순도 : 합성된 sgRNA는 단일 밴드를 갖습니다.
높은 활성 : 합성된 sgRNA는 Cas9가 표적 DNA를 절단하도록 효과적으로 안내할 수 있습니다.
응용 프로그램
CRISPR/Cas 유전자 편집
구성 요소
구성품 번호 |
이름 |
11355ES05 |
11355ES25 |
11355ES50 |
11355ES60 |
11355-A |
10×sgRNA 효소 혼합물 |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
200 μL |
11355-B |
10×sgRNA 반응 버퍼 |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
200 μL |
11355-씨 |
2×카나세 효소 믹스 |
62.5 μL |
312.5 μL |
625 μL |
1.25ml (1.25ml) |
11355-D |
스캐폴드 템플릿 |
6.25 μL |
31.25 μL |
62.5 μL |
125 μL |
11355-E |
NTP(각각 25 mM) |
40 μL |
200 μL |
400 μL |
800 μL |
11355-F |
대조 sgRNA 올리고 ( 10μM ) |
2 μL |
10 μL |
20 μL |
40 μL |
배송 및 보관
본 제품은 -25 ~ -15 o C 에서 2 년간 보관하시기 바랍니다 .
그림
수치 1. sgRNA의 합성량은 시간대별로 다르다
그림 2. 다양한 서열을 갖는 sgRNA 의 합성 수율
그림 3. 합성된 sgRNA 의 순도(Agilent 2100으로 측정)
그림 4. sgRNA의 절단 효율 차트
서류:
안전 데이터 시트
1 1355 _MSDS_ Ver.EN202 50120 .pdf
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