설명
Illumina용 Hieff NGS® RNA Lib Prep 384 CDI Primer는 Illumina 고처리량 시퀀싱 플랫폼의 RNA 라이브러리 구축을 위한 전용 링커 프라이머 키트로, 2세트로 나뉘며, 각 세트에는 2세대 시퀀싱 라이브러리에 사용된 PE 어댑터와 i5 Index Primer 8개, i7 Index Primer 12개가 들어 있습니다. 총 16개의 i5 Index Primer와 24개의 i7 Index Primer가 2세트로 제공되어 384가지의 다양한 조합으로 구성된 이중 말단 인덱스 라벨 라이브러리를 구축할 수 있습니다. 키트에 제공된 모든 시약은 엄격한 품질 관리와 기능 검증을 거쳐 라이브러리 구축 안정성과 반복성을 극대화합니다.
구성 요소
|
아니요. |
이름 |
용량 |
|
12414ES02 |
PE 어댑터 |
320 μL |
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RP 501-508 |
각각 60 μL |
|
|
RP 701-712 |
40 μL 각각 |
|
|
12415ES02 |
PE 어댑터 |
320 μL |
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RP 509-516 |
각각 60 μL |
|
|
RP 713-724 |
40 μL 각각 |
배송 및 보관
모든 구성품은 건조 얼음과 함께 배송되며 -15℃~ -25℃에서 18개월 동안 보관할 수 있습니다.
메모:
2) 이 키트와 함께 제공되는 PE 어댑터는 완전한 라이브러리를 얻기 위해 PCR 증폭이 필요한 범용 짧은 어댑터입니다. Index Primer는 고처리량 시퀀싱 중 샘플을 구별하기 위한 바코드 시퀀스 태그를 제공합니다.
3) 이 키트의 각 세트에는 i5 인덱스 프라이머(RP 5xx) 8개와 i7 인덱스 프라이머(RP 7xx) 12개가 들어 있으며, 이를 서로 결합하여 96가지의 다양한 조합의 양면 인덱스 라벨 라이브러리를 구성할 수 있습니다. 2세트는 총 16개의 i5 인덱스 프라이머와 24개의 i7 인덱스 프라이머를 제공합니다. Cat#12414의 i5 인덱스 프라이머(또는 i7 인덱스 프라이머)와 Cat#12415의 i7 인덱스 프라이머(또는 i5 인덱스 프라이머)를 사용하여 최대 384가지의 다양한 조합의 양면 인덱스 라벨 라이브러리를 구성할 수 있습니다.
4) 어댑터를 가열하지 말고, 실온에서 천천히 녹이도록 두십시오. 실험실 온도는 20-25°C로 설정하는 것이 가장 좋습니다. 어댑터는 반복적인 동결-해동을 피해야 하며, 일정량으로 나누어 4°C에서 단시간 보관하는 것이 좋습니다.
5) Illumina® 키트를 위한 Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer를 사용하여 구축된 시퀀싱 라이브러리 구조는 다음과 같습니다.
6) 여러분의 안전과 건강을 위해 실험실 가운을 착용하고 일회용 장갑을 착용해 주세요.
7) 이 제품은 과학적 연구 목적으로만 사용됩니다!
지침
1. 어댑터 사용 : 사용하는 라이브러리 구축 매뉴얼에 제시된 다양한 투입량에 대한 권장 투여량에 맞춰 적절한 농도로 희석합니다.
2. 인덱스 프라이머 사용: 라이브러리 구축 매뉴얼에 따라 반응 시스템을 준비하고, 라이브러리 증폭 시스템(아래 표 참조)에 따라 반응 절차를 설정하고, 라이브러리 구축 매뉴얼의 절차에 따라 반응 절차를 설정합니다.
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이름 |
용량（μL） |
|
2 × 고충실도 DNA PCR 믹스 |
25 |
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RP 5xx |
2.5 |
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RP 7xx |
2.5 |
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어댑터 연결 DNA |
20 |
|
총 |
50 |
시퀀스 정보
Illumina용 PE 어댑터:
5´-/5포스/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Illumina용 i5 인덱스 프라이머:
5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC [i5 인덱스] ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´
Illumina용 i7 인덱스 프라이머:
5´- CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT [i7 인덱스] GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC -3´
[i5 Index] i5 Index 시퀀스 의 8bp , [i7 Index] i7 Index 시퀀스 의 8bp .
다음 표에는 각 프라이머에 해당하는 인덱스 이름, 프라이머에 포함된 인덱스 시퀀스, 시퀀싱 중 해당 인덱스 시퀀스 정보가 나와 있습니다.
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I5 인덱스 이름 |
I5 I 인덱스 순서 |
시퀀싱 중 인덱스 시퀀스 정보 |
|
|
NovaSeq 6000 v1.0 시약, MiSeq, 하이섹 2000/2500 |
NovaSeq 6000 v1. 5 시약 , 미니시크, 넥스트시크, |
||
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RP501 |
타타그크트 |
타타그크트 |
아그크타타 |
|
RP502 |
아타가그씨 |
아타가그씨 |
GCCTCTAT |
|
RP503 |
CCTATCCT |
CCTATCCT |
아가타그 |
|
RP504 |
GGCTCTGA |
GGCTCTGA |
TCAGAGCC |
|
RP505 |
아그카가아그 |
아그카가아그 |
CTTCGCCT |
|
RP506 |
타트타타 |
타트타타 |
타아가타 |
|
RP507 |
카가크트 |
카가크트 |
ACGTCCTG |
|
RP508 |
GTACTGAC |
GTACTGAC |
GTCAGTAC |
|
RP509 |
가크타 |
가크타 |
타카그TC |
|
RP510 |
애드택트 |
애드택트 |
아그타캣 |
|
RP511 |
그트트카가 |
그트트카가 |
TCTGAAAC |
|
RP512 |
카카갓 |
카카갓 |
ATCCTGTG |
|
RP513 |
태그CTGCC |
태그CTGCC |
GGCAGCTA |
|
RP514 |
아그카아트그 |
아그카아트그 |
고양이 |
|
RP515 |
타트그CTGC |
타트그CTGC |
가카카타 |
|
RP516 |
아가아그액트 |
아가아그액트 |
AGTCTTCT |
|
I7 I 인덱스 이름 |
I7 I 인덱스 시퀀스 |
시퀀싱 중 인덱스 시퀀스 정보 |
|
RP701 |
그라그타트 |
공격CG |
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RP702 |
TCTCCGGA |
TCCGGAGA |
|
RP703 |
AATGAGCG |
CGCTCATT |
|
RP704 |
GGAATCTC |
가가트CC |
|
RP705 |
티티씨티갓 |
아차가아 |
|
RP706 |
ACGAATTC |
가트씨지트 |
|
RP707 |
AGCTTCAG |
CTGAAGCT |
|
RP708 |
GCG카타 |
타트GCGC |
|
RP709 |
카타그CCG |
CGGCTATG |
|
RP710 |
TTCGCGGA |
TCCGCGAA |
|
RP711 |
GCGC가가 |
TCTCGCGC |
|
RP712 |
CTATCGCT |
태그 |
|
RP713 |
CCTACACG |
CGTG태그 |
|
RP714 |
GTAGTGTC |
가칵탁 |
|
RP715 |
TGTATGCA |
티지카타카 |
|
RP716 |
CCAGACTG |
카그티씨티지 |
|
RP717 |
아그티지카 |
TGCCACCT(태그카크트) |
|
RP718 |
TCACCTTG |
카아그트가 |
|
RP719 |
gtattcttt |
아아가탁 |
|
RP720 |
CAGCTCCA |
TGGAGCTG |
|
RP721 |
TCGCCTTA |
타아그카가 |
|
RP722 |
태그타CG |
CGTAC태그 |
|
RP723 |
AGCG태그 |
GCTACGCT |
|
RP724 |
GAGCCTCG |
CGAGGCTC |
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