설명
히프™ Versatility T4 DNA Ligase는 T4 DNA Ligase의 변형입니다. 이 효소는 응집성 또는 평활 말단 분자 간의 연결 반응을 촉매하는 데 적합합니다. 차세대 시퀀싱(NGS)에서 라이브러리 준비 과정에서 DNA 단편과 어댑터를 연결하도록 설계된 단일 효소 제품입니다. Hieff ® 다재다능한 T4 DNA 리가제는 고처리량 시퀀싱을 통해 광범위하게 검증되었으며 뛰어난 품질을 보여줍니다.
특징
- 높은 충실도
- 내열성
다재다능한 T4 DNA 리가제 개발에 대해 자세히 알아보세요
명세서
| 원천 | 재조합 대장균 |
| 저장 버퍼 | 50 mm 트리스-HC1,100 밀리몰 KC1,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,50%글리세롤,pH 7.5士0.2 @25℃ |
| 단위 정의 | 20 μL의 라이게이션 반응 시스템에서 6 μg의 λDNA-Hind III를 16°C에서 30분 동안 반응시켰을 때, DNA 단편의 50% 이상의 라이게이션을 촉매하는 데 필요한 효소 양을 1단위(U)로 정의합니다. |
구성 요소
| 구성 요소 | 이름 |
12996ES60 60KU |
12996ES62 600쿠 |
| 12996-A | 히프® 다재다능한 T4 DNA 리가제(600 U/µL) | 100 μL | 1000 μL |
| 12996-B | 10×T4 DNA 리가제 완충액 | 500 μL | 3×1500 μL |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 2일간 보관하시기 바랍니다. 연령.
수치
이 효소와 다른 최상급 내열성 T4 DNA 리가제 및 기존 T4 DNA 리가제 간의 성능 비교 데이터에 대한 문의는 메시지를 남겨주세요.
노트
1. 안전을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑 을 착용하고 작업해 주시기 바랍니다.
2. 완충액에 소량의 침전이 발생하는 경우 정상적인 현상입니다. 사용하기 전에 완충액을 뒤집어 완전히 섞으십시오.
3. 본 제품은 연구용으로만 사용됩니다.
규약
1. 라이게이션 기반 방법을 사용하는 현재의 주류 DNA 라이브러리 제조 키트는 일반적으로 말단 복구 및 A-테일링 후 정제 단계가 필요하지 않습니다. DNA 단편은 정제 없이 어댑터 라이게이션에 직접 적용됩니다. 이 키트는 주류와 호환됩니다. 원활한 어댑터 결찰을 위한 상업적으로 이용 가능한 끝단 수리 및 A-테일링 시스템.
얼음 위에 있는 마이크로 원심분리관에 다음 반응을 일으키고, 피펫이나 흔들어서 부드럽게 섞은 후, 잠시 원심분리하고 20°C에서 15분 동안 열을 가해 불활성화합니다.
표 1. 어댑터 결찰을 위한 반응 시스템
|
요소 |
용량 （ μL ） |
최종 농도 |
|
dA-꼬리 DNA |
60 |
1× |
|
10×T4 DNA 리가제 완충액 |
10 |
0.1 μM-0.5 μM |
|
50% PEG6000 |
12* |
1 ng -400ng |
|
DNA 어댑터 |
5** |
|
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3~5*** |
|
|
|
핵산 분해 효소가 없는 물 |
위로 100까지 |
- |
【 주의사항 】 *50% PEG6000 용액은 키트에 제공되지 않으므로 직접 준비하셔야 합니다.
**표를 참조하세요 2 를 위해 어댑터의 양
***T4 DNA 리가제의 양은 필요에 따라 3-5 μL 추가할 수 있습니다.
2. 어댑터의 농도는 라이게이션 효율과 라이브러리 수율에 직접적인 영향을 미칩니다. 어댑터를 과도하게 사용하면 다음과 같은 결과가 발생할 수 있습니다. ~에 더 많은 어댑터 다이머, 반면 낮은 사용률은 연결 효율성과 라이브러리 생산에 영향을 미칠 수 있습니다. 표 2 다양한 양의 입력 DNA에 대해 권장되는 어댑터 양을 나열합니다.
표 2. 100 pg-1 μg 입력 DNA에 대한 권장 어댑터 양
|
DNA 입력 |
집중 |
|
0.1 엔지 |
|
|
1 ng |
0.5μM |
|
10 ng |
1μM(마이크로미터) |
|
25 ng |
2μM |
|
100ng~1000ng |
10μM(마이크로미터) |
【 참고 】： 어댑터 수량 위 표의 요구사항에 맞게 조정될 수 있습니다.
결제 및 보안
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문의
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자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
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