설명
우라실-특이적 절제 시약(USER라고 함)은 우라실 DNA 글리코실라제(UDG)와 엔도뉴클레아제 VIII(Endo VIII)으로 구성된 효소 칵테일입니다. 이는 우라실 위치에서 단일 뉴클레오티드 갭을 생성할 수 있습니다. UDG는 우라실 염기의 절단을 용이하게 하여 인산디에스테르 당-인산 백본의 무결성을 유지하면서 AP 부위(아푸린/아피리미딘 부위)를 형성합니다. 엔도 VIII의 엔도뉴클레아제 활동은 아푸린 부위의 3 ' 및 5 ' 말단 모두에서 인산디에스테르 결합을 절단하여 염기가 없는 데옥시리보스 당을 방출합니다.
특징
잔류 핵산 분해 효소 또는 RNase 없음
높은 절제 효율
응용 프로그램
RNA 가닥 특정 라이브러리 구축
우라실 특이적 절제 매개 클로닝(USER-LIC)
TALE 단량체의 조립과 같은 DNA 조립
단일 세포로부터 다중 cDNA 라이브러리의 직렬 구축
명세서
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집중 |
1유로/µL |
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단위 정의 |
1 단위는 37°C에서 15분 동안 10 μL 반응 시스템 에서 단일 우라실 염기를 함유하는 34-머 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드를 절단하는 데 필요한 효소의 양으로 정의되며 , 이는 기질 10 pmol의 절단에 해당합니다. |
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비활성화 조건 |
75 ℃ , 10 분 |
구성 요소
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구성품 번호 |
이름 |
14537ES50 |
14537ES72 |
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14537-A |
우라실 특이적 절제 시약 ( 1 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
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14537-B |
10 ×우라실 특이적 절제 시약 반응 완충액 |
1. 25ml |
1. 25ml |
배송 및 보관
제품은 -2 5℃ ~ -1 5℃에서 1 년간 보관 가능 합니다 .
그림
그림1. 절제 효과 비교
참고사항: dUTP를 함유한 이중가닥 DNA 10 pmol은 Yeasen의 USER 효소와 공급업체 A의 유사 제품을 사용하여 절제되었습니다. 아가로스 젤 전기영동 결과는 Yeasen의 USER 효소의 절제 효과가 공급업체 A의 효과와 일치함을 보여주었습니다.
그림 2. USER-LIC 클로닝을 위한 콜로니 수 비교
참고: 600bp DNA 단편을 Yeasen의 USER 효소와 공급업체 A의 유사한 제품을 사용하여 연결하여 벡터를 구성한 다음 E. coli 로 형질 전환 하여 배양했습니다. 배양 플레이트의 집락 수를 관찰한 결과, Yeasen의 USER 효소를 사용한 USER-LIC 클로닝 효율이 공급업체 A보다 우수함을 나타냈습니다.
서류:
안전 데이터 시트
1 4537 _MSDS_ Ver.EN20241210 .pdf
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