설명
리보뉴클레아제 R(RNase R) 대장균 은 마그네슘 의존성 3'→5' 엑소리보핵산분해효소로서 모든 선형 RNA를 소화할 수 있지만, 라리아트나 원형 RNA 구조는 소화하지 못합니다. tRNA, 5S RNA, 인트론 라리아트를 제외하고 대부분의 세포 RNA는 RNase R에 의해 완전히 소화됩니다. RNase R은 생물학적 샘플에서 circRNA를 풍부하게 하고, 인트론 라리아트 시퀀스를 식별하고, 엑손 circRNA를 식별하고, 대체 스플라이싱을 연구하는 데 사용됩니다.
특징
ISO 13485 인증을 통해 효능과 품질이 보장됩니다.
대량 또는 맞춤형 구성으로 구매 가능합니다.
라리아트 루프와 원형 RNA를 보존하면서 선형 RNA를 효과적으로 분해합니다.
선형 RNA의 선택적 소화는 단백질 생산이나 인트론 cDNA 라이브러리 구축을 위한 원형 RNA의 분리를 강화합니다.
GMP 등급 RNAse R 제공( 14615 )
특정 사항
| 원천 | E. coli의 RNAse R 유전자를 함유하는 재조합 E. coli 균주 |
| 최적의 온도 | 37℃ |
| 저장 버퍼 | 50 mM 트리스-HCl, 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.1% 트리톤® X-100, 1 mM DTT, 50% 글리세롤, 25℃에서 pH7.5 |
| 단위 정의 | 1단위는 37°C, 20 mM Tris-HCl(pH 8.0), 100 mM KCl 및 0.1 mM MgCl 2 에서 10분 안에 1 μg의 폴리-r(A)를 산에 녹는 뉴클레오티드로 전환합니다. |
애플리케이션
RNase R은 원형 RNA 합성(circRNA)에서 기본적인 구성 요소 역할을 합니다. CircRNA는 약제학적 안정성과 생물학적 안정성을 향상시키는 데 유망합니다. 공유 결합으로 닫힌 구조로 인해 circRNA는 RNA 엑소뉴클레아제를 견뎌냅니다. [1,2] RNase R은 대체 스플라이싱, 인트론 cDNA 생산, 스플라이싱 중간체 및 라리아트의 분리를 포함한 다양한 연구에 널리 사용됩니다.
구성 요소
|
구성품 번호 |
이름 |
14606ES72 |
14606ES86 |
14606ES92 |
|
14606-A |
RNase R(20 U/μL) |
12.5 μL |
125 μL |
500 μL |
|
14606-B |
10×RNase R 반응 완충액 |
250 μL |
3 × 1ml (100ml) |
10ml(10ml) |
저장
본 제품은 -25~-15℃에서 2년간 보관하시기 바랍니다.
지침
멸균된 마이크로 원심분리관에서 다음 반응 시스템을 준비하십시오.
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요소 |
용량 |
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10×RNase R 반응 완충액 |
2 μL |
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RNA 샘플 |
1 μg |
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RNase R(20 U/μL) |
2-4유 |
|
RNase가 없는 ddH 2 O |
최대 20개 μL |
37℃에서 10~30분 동안 배양합니다.
그림
그림 1: 선형 RNA 분자는 Yeasen RNAse R로 소화될 수 있습니다.
그림 2: CircRNA는 Yeasen RNAse R로 소화될 수 없습니다.
노트
- RNase R의 활동에는 0.1-1.0 mM Mg 2+ 가 필요합니다.
- RNA의 증가에 따라 반응시간을 연장할 수 있으며, 효소량도 적절히 증가시킬 수 있다.
- RNA 샘플의 EDTA 함량은 RNase R의 활성에 영향을 미칠 수 있습니다.
- 70℃에서 10분간 배양하면 효소가 불활성화될 수 있습니다.
참조
- Qu L, Yi Z, Shen Y, 외. SARS-CoV-2 및 새로운 변종에 대한 원형 RNA 백신. 셀. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- Chen L, Wang C, Sun H, et al. circRNA 발견 및 분석을 위한 생물정보학 툴박스. Brief Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001
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