설명
Tth DNA Polymerase는 호열성 세균에서 발견된 내열성 DNA Polymerase입니다. 테르무스 테르모필루스 HB8. Mg²⁺가 존재할 경우 이 효소는 5'-3' DNA 중합효소 활성과 5'-3' 엑소뉴클레아제 활성을 나타내지만 3'-5' 엑소뉴클레아제 활성이 없어 PCR 증폭 반응에 널리 적용할 수 있습니다. Mn²⁺가 존재할 경우 이 효소는 55-70°C의 온도에서 강력한 역전사효소 활성을 나타내어 1단계 RT-PCR 반응에 적합합니다.
사양
단위 정의: 활동의 한 단위(U)는 74°C에서 30분 안에 산에 녹지 않는 생성물에 총 10 nmol의 뉴클레오티드를 통합하는 효소의 양으로 정의되며, 이때 활성화된 연어 정자 DNA를 템플릿/프라이머로 사용합니다.
요소
| 아니요. | 이름 | 크기 | |
| 14607ES72 (250유로) | 14607ES80 (1250 유) | ||
| 14607-A | Tth DNA 중합효소(5 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
| 14607-B | 5×Tth RT-PCR 완충기 | 1ml(1ml) | 4×1.25 분당 |
| 14607-C | 10×Tth PCR 완충기 (Mg2+와 함께) | 500 μL | 2×1.25 분당 |
| 14607-D | 50mM 마그네슘(아세트산)2 | 250 μL | 1.25 분당 |
| 14607-E | dNTP 혼합물(각각 10 mM) | 150 μL | 750 μL |
해운 및 저장
해운건조 얼음과 함께. 저장 ~에 -20°C, 보관기간은 2년입니다.
지침
1) 해동 시 완충액에 소량의 침전물이 나타나는 것은 정상적인 현상입니다. 사용 전에 뒤집어서 완전히 섞어주세요.
2) 안전과 건강을 위해 작업 중에는 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용하세요.
3) 이 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다!
지침
권장 PCR 반응 절차:
1.반응 시스템의 준비
| 이름 | 용량 (μL) |
| 10×Tth PCR 완충기 (Mg2+와 함께) | 5 |
| Tth DNA 중합효소(5 U/μL) | 0.5 |
| dNTP 혼합물(각각 10 mM) | 1 |
| 상류 뇌관 10μM | 2 |
| 하류 뇌관 10μM | 2 |
| 템플릿 DNA | 50 피지- 1μg |
| 디디에이치2영형 | 에게 50 |
[참고]: Tth DNA Polymerase, 상류 및 하류 프라이머, dNTP 혼합물의 양은 특정 실험 요구 사항에 따라 조정될 수 있습니다.
2. 사이클 설정
| 단계 | 온도(섭씨) | 시간 | 사이클 |
| 사전 변성 | 94 | 30초~5분 | 1 |
| 변성 | 94 | 30초 |
35
|
| 가열 냉각 | 50~70 | 30초 | |
| 확대 | 72 | 60초/kb | |
| 최종 연장 | 72 | 10분 | 1 |
[참고]: 반응 조건은 특정 실험 요구 사항에 따라 조정될 수 있습니다.
권장 RT-PCR 반응 절차:
1. 반응 시스템의 준비
| 이름 | 용량 (μL) |
| 5×Tth RT-PCR 완충기 | 10 |
| Tth DNA 중합효소(5 U/μL) | 1.5 |
| 50mM 마그네슘(아세트산)2 | 2.5 |
| dNTP 혼합물(각각 10 mM) | 1.5 |
| 상류 뇌관 10μM | 2 |
| 하류 뇌관 10μM | 2 |
| 주형 RNA | 50 피지- 1μg |
| ddH2O | 에게 50 |
[참고]: Tth DNA Polymerase, 상류 및 하류 프라이머, dNTP 혼합물의 양은 특정 실험 요구 사항에 따라 조정될 수 있습니다.
2.사이클 설정
| 단계 | 온도(섭씨) | 시간 | 사이클 |
| 역전사 | 55-70 | 30분 | 1 |
| 사전변성 | 94 | 30초~5분 | 1 |
| 변성 | 94 | 30초 |
35
|
| 가열 냉각 | 50~70 | 30초 | |
| 확대 | 72 | 60초/kb | |
| 최종 연장 | 72 | 10분 | 1 |
[참고]: 반응 조건은 특정 실험 요구 사항에 따라 조정될 수 있습니다.
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자주 묻는 질문
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