Hifair™ Super Reverse Transcriptase는 차세대 역전사효소입니다., 어느 이었다 eN기네어드 M-MLV에서 유래. 이 효소는 RNase H 활성이 없고 상당히 향상된 열 안정성을 보이며 최대 70°C의 반응 온도를 견뎌냅니다. 복잡한 2차 구조를 가진 RNA 템플릿의 효율적인 역전사에 매우 적합합니다.

응용 프로그램

이 제품은 RT-PCR, RT-qPCR, RT-LAMP, RNA-seq 및 cDNA 합성 실험에 적합합니다. 역전사 반응 온도는 최대 70°C에 도달할 수 있습니다.

단위 정의

효소 활성의 한 단위(U)는 Poly(A).Oligo(dT)를 템플릿 프라이머로 사용하여 37°C에서 10분 이내에 산에 녹지 않는 물질에 1 nmol의 dTTP를 통합하는 데 필요한 효소의 양으로 정의됩니다.

요소

보관 조건

-25˚C ~ -15˚C에서 최대 18개월 동안 보관 가능.

사용 설명서

첫 번째 가닥 cDNA 합성 절차

1. RNA 변성(선택 단계)

1. RNA 변성은 2차 구조를 개방하여 첫 번째 가닥 cDNA 수율을 크게 향상시키는 데 도움이 됩니다.

· 65°C에서 5분간 가열한 후, 얼음 위에 2분간 빨리 식힙니다.

· 반응 액체를 모으기 위해 잠시 원심분리하고 아래에 표시된 대로 역전사 반응 혼합물을 첨가합니다.

2. 역전사 반응 설정(20 μL 시스템)

3. 역전사 프로그램 설정

*랜덤 프라이머를 사용하는 경우 25°C에서 5분간 배양합니다. Oligo(dT)18 또는 Gene-Specific Primers를 사용하는 경우 이 단계를 생략할 수 있습니다.

85°C에서 5분간 가열하면 역전사효소가 비활성화되며, 필요에 따라 조절할 수 있습니다.

역전사 생성물은 후속 PCR 또는 qPCR 반응에 즉시 사용할 수 있으며, -20°C에서 단기간 보관할 수 있고, 동결-해동 주기를 피하기 위해 분주한 후 -80°C에서 장기간 보관할 수 있습니다.

지침

1. 깨끗한 실험실 환경을 유지하세요. 깨끗한 장갑과 마스크를 착용하세요. 오염을 방지하기 위해 모든 실험 소모품에 RNase가 없는지 확인하세요.

2. RNA 분해를 방지하기 위해 모든 작업은 얼음 위에서 수행하세요.

3. 효율적인 역전사를 보장하기 위해 고품질 RNA 샘플을 사용하십시오.

4. 이 제품은 연구 목적으로만 사용됩니다.

5. 안전과 건강을 위해 제품을 취급하는 동안 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용하세요.

서류: