설명
T4 RNA 리가제 1은 T4 RNA 리가제라고도 하며, 단일 가닥 RNA(ssRNA), 단일 가닥 DNA(ssDNA) 또는 모노뉴클레오타이드 분자의 5'-P 말단과 3'-OH 말단 사이에 인산디에스테르 결합을 형성하는 것을 촉매하는 ATP 의존 효소입니다. T4 RNA 리가제 1은 ssRNA 분자(가장 효율적), ssDNA와 ssRNA(효율성 낮음) 사이의 라이게이션을 수행할 수 있으며, ssDNA 분자(매우 낮은 효율성) 사이의 라이게이션에도 사용할 수 있습니다. ssRNA 분자의 라이게이션과 NGS를 위한 miRNA 라이브러리 구축에서 5' 어댑터의 부착에 적합합니다.
그림 1. T4 RNA 리가제 1의 작용 기전
특징
단일 가닥 RNA(ssRNA), 단일 가닥 DNA(ssDNA) 또는 모노뉴클레오타이드 분자의 5'-P 말단과 3'-OH 말단 사이에 인산이에스테르 결합 형성을 촉매합니다.
응용 프로그램
RNA 클로닝
NGS를 위한 miRNA 라이브러리 구축의 5' 어댑터
원형 RNA 준비
명세서
단위 정의 |
1단위는 37 ℃ 에서 30분 동안 5-[32P]rA16 1나노몰을 인산가수분해효소 저항성 형태로 전환하는 데 필요한 효소의 양으로 정의됩니다. |
원천 |
대장균 에서 발현되는 재조합 단백질은 T4 박테리오파지에서 유래된다. |
반응 조건 |
10 × T4 RL1 반응 완충액: 500 mM Tris-HCl(25 o C 에서 pH 7.5 ), 100 mM MgCl 2 , 20 mM DTT; 37 o C 에서 최적 배양 |
비활성화 조건 |
65 o C 에서 15분간 가열 하거나 2분간 끓이면 T4 RNA Ligase 1이 불활성화될 수 있습니다. 또는 최종 농도 50 mM EDTA pH 8.0을 첨가하면 T4 RNA Ligase 1의 반응이 종료될 수 있습니다. |
구성 요소
구성품 번호 |
이름 |
14651ES80 |
14651ES90 |
14651-A |
T4 RNA 리가제 1 ( 1 0 U/μL) |
50 0 μL |
|
14651-B |
10 × T4 RL1 반응 완충액 |
20 0 μL |
1ml(1ml) |
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서류:
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