Agathobacter rectalis 박테리아의 CRISPR 시스템에서 유래한 ArCas12a는 Cpf1이라고도 하며, 1263개의 아미노산으로 구성된 단량체 단백질입니다. CRISPR/Cas 시스템의 클래스 II(유형 V) 멤버인 ArCas12a는 단일 효과기 단백질을 통해서만 기능하며 T가 풍부한 모티프를 타겟팅하고, 트랜스 활성화 crRNA를 필요로 하지 않으며, DNA 이중 가닥 절단 시 점착성 말단을 생성하고, RNA 처리에 참여하며, DNA 뉴클레아제 활성을 보유하는 등 Cas9와 상당한 차이점을 보입니다.

ArCas12a는 HNH 도메인이 없고, RuvC 도메인을 독립적으로 활용하여 CRISPR RNA(crRNA)의 안내 하에 표적 핵산의 5' 말단에 있는 티민(T)이 풍부한 PAM 영역을 인식하여 표적 DNA의 절단을 시작할 수 있습니다. 이는 많은 포유류와 식물에서 게놈 편집에 성공적으로 사용되었습니다. 또한, ArCas12a는 반응 시스템에서 비표적 단일 가닥 DNA(ssDNA)를 무차별적으로 절단할 수 있는 트랜스 절단 활성을 나타냅니다.

다른 LbCas12a/AsCas12a에 비해 ArCas12a는 더 높은 온도 적응성(25-55 ^o C )을 보여 게놈 편집 및 핵산 검출 응용 분야에 적합합니다.

특징

광범위한 반응 온도 범위 : 25-55 ^o C 의 온도 범위 내에서 절단 활동을 나타냅니다.

낮은 뉴클레아제 잔류물 : 잔류 엑소뉴클레아제, 니카아제 또는 RNase 없음

Cis-cleavage 활성 : 시험관내 이중가닥 DNA의 매우 효과적인 절단

Trans-cleavage 활성 : 높은 trans-cleavage 활성으로 핵산 검출에 적합

응용 프로그램

CRISPR/Cas 유전자 편집

CRISPR/Cas 시스템을 기반으로 한 진단 및 검출

등온 핵산 증폭 기술(RPA 및 LAMP) 등과 결합된 기타 감지 응용 프로그램

명세서

구성 요소

배송 및 보관

본 제품은 -25 ~ -15 ^o C 에서 2년간 보관하시기 바랍니다 .

그림

수치 1. ArCas12a cis-cleavage 활성 테스트: M: 마커, C: 템플릿 이중 가닥 DNA(dsDNA)

참고사항: crRNA의 안내에 따라 dsDNA(600bp)를 효율적으로 절단하여 두 개의 단편(200bp + 400bp)을 생성할 수 있습니다.

그림 2. ArCas12a Trans-cleavage 활성 테스트 결과

참고: dsDNA를 표적으로 사용하여 ArCas12a, crRNA 및 ssDNA 리포터 프로브(형광 리포터 그룹 포함)를 시험관 내 절단을 위해 첨가했습니다. ArCas12a가 crRNA 및 표적 DNA와 복합체를 형성하면, 트랜스-절단 활성을 활성화하여 ssDNA 리포터 프로브를 절단하고 형광을 방출합니다.

서류:      

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매뉴얼

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