설명
하이페어 TM 라이오-레디 I Multiplex One Step RT-qPCR Kit ( UDG plus) 는 RNA를 템플릿으로 사용하는 멀티플렉스 정량 PCR 키트입니다. 실험 과정에서 역전사와 정량 PCR을 동일한 튜브에서 수행하여 실험 작업을 간소화하고 오염 위험을 줄였습니다. 고유 한 완충액 및 효소 설계로 인해 원스텝 RT-qPCR 동결 건조 반응 시스템의 준비 및 제품 설계에 사용할 수 있습니다 .
이 키트에서, 첫 번째 가닥 cDNA는 내열성 Hifair TM 역전사효소에 의해 효율적으로 합성되었고 Unicon TM HotStart Taq DNA Polymerase에 의해 정량적으로 증폭되었습니다. 이 키트는 주로 최적화된 동결건조 완충액, 효소 혼합물 등을 포함합니다 . 또한, 비특이적 PCR 증폭을 효과적으로 억제하고 다중 qPCR 반응의 증폭 효율을 개선할 수 있는 요소가 추가되어 증폭 효율을 보장하고 최대 다중 증폭 반응을 수행할 수 있습니다.
이 키트에는 동결건조에 사용할 수 있는 동결 보호제가 장착되어 있습니다 .
명세서
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구성품 번호 |
16645 ES 6 0 / 16645 ES 8 0 / 16645ES92 |
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크기 |
100 톤 / 1000 톤 / 10000톤 |
구성 요소
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이름 |
16645 ES60 (100톤) |
16645 ES80 (1,000톤) |
16645 ES92 (10,000톤) |
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16645 -아 |
4×Hifair TM 리오 버퍼 |
6 00 μL |
6ml( 6ml) |
60ml ( 60ml) |
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16645 -비 |
하이페어 TM 리요-효소 혼합물 |
1 00 μL |
1ml (1ml) |
1 0ml |
|
16645-씨 |
동결보호제 |
800 μL |
8ml( 8ml) |
80ml (80ml) |
저장
그만큼 제품은 -25℃ ~ -15℃에서 1년간 보관해야 합니다. 반복적인 동결 및 해동은 피해야 합니다.
지침
1. 반응 구성:
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구성 요소 |
용량 ( μL) |
최종 집중 |
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4×Hifair TM 리오 버퍼 |
6 |
1× |
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하이페어 TM 리요-효소 혼합물 |
1 |
- |
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동결보호제 |
8 |
- |
|
프라이머 믹스(10 μM) |
1 |
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프로브 믹스(10 μM) |
0.5 |
0.05~0.5μM |
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템플릿 RNA |
5 |
- |
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DEPC H2O |
25까지 |
- |
주의사항 : 사용 전 반드시 잘 섞어주시고, 격렬한 진동으로 인해 과도한 거품이 생기지 않도록 주의하세요.
2. 최적화된 사이클링 프로토콜
(1) 표준 증폭 절차
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반응 단계 |
온도 |
시간 |
주기 |
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|
1 |
역전사 |
50° C |
1 |
|
|
2 |
초기 변성 |
95도 |
5 분 |
1 |
|
3 |
증폭반응 |
95도 |
|
45 사이클 |
|
60°C (섭씨 60도) |
30 초 c |
(2) 빠른 증폭 프로그램
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반응 단계 |
온도 |
시간 |
주기 |
|
1 |
역전사 |
50° C |
2 분 |
1 |
|
2 |
초기 변성 |
95도 |
2 초 |
1 |
|
3 |
증폭반응 |
95도 |
|
45 사이클 |
|
60°C (섭씨 60도) |
13 초 c |
메모:
a) 역전사: 온도는 10~15분 동안 42°C 또는 50°C를 선택할 수 있습니다 .
b) 증폭반응 : 온도는 설계된 프라이머의 Tm 값에 따라 조절됩니다.
c) 형광 신호 수집: 장비 설명서의 요구 사항에 따라 실험 절차를 설정하세요.
3. 신청 장비
Rox가 포함된 장비 : ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
Low Rox를 갖춘 장비 : ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 및 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
스트라타진 MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Rox가 없는 장비 ：
Bio-Ra d CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
에펜도르프 마스터사이클러® ep 리얼플렉스, 리얼플렉스 2s; 퀴 아젠 코벳 로터진® Q, 로터진® 3000, 로터진® 6000
로슈 응용과학 LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
노트
건강과 안전을 위해 실험실 가운과 장갑 등 필요한 개인 보호 장비를 착용해 주세요!
실험 에는 RNasefree 소모품을 사용하세요 .
본 제품은 연구용 으로 만 사용 가능합니다 !
동결건조 절차
이 키트는 동결건조에 직접 사용할 수 있으며, 이를 기반으로 다양한 프라이머에 대한 부형제를 추가로 탐색할 수 있습니다. 이 시약의 표준 동결건조 절차는 다음과 같습니다.
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프로세스 |
온도 |
시간을 정하다 |
지속 |
진공 mbar |
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동결건조 전 |
영하 45℃ |
10분 |
60분 |
—— |
|
초기 동결 건조 단계 |
-45℃ |
10분 |
60분 |
0.01밀리바 |
|
-40℃ |
10분 |
900분 |
0.01밀리바 |
|
|
-35℃ |
10분 |
60분 |
0.01밀리바 |
|
|
-30℃ |
20분 |
60분 |
0.01밀리바 |
|
|
-20℃ |
20분 |
60분 |
0.01밀리바 |
|
|
0℃(섭씨 0도) |
20분 |
60분 |
0.01밀리바 |
|
|
압력 증가 테스트 |
||||
|
분석 건조 단계 |
5℃(5도) |
10분 |
20분 |
0.01밀리바 |
|
10℃ |
10분 |
20분 |
0.01밀리바 |
|
|
15℃ |
10분 |
20분 |
0.01밀리바 |
|
|
20℃ |
10분 |
20분 |
0.01밀리바 |
|
|
25℃ |
10분 |
240분 |
0.01밀리바 |
|
|
압력 증가 테스트 |
||||
결제 및 보안
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문의
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자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
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