설명
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus)는 RNA를 템플릿으로 사용하는 멀티플렉스 정량 PCR 키트입니다. 실험 과정에서 역전사와 정량 PCR을 동일한 튜브에서 수행하여 실험 작업을 간소화하고 오염 위험을 줄였습니다.
이 키트에서 첫 번째 가닥 cDNA는 내열성 Hifair™ 역전사효소에 의해 효율적으로 합성되었고 UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase에 의해 정량적으로 증폭되었습니다. 이 키트는 주로 최적화된 MP 완충액, 효소 혼합물을 포함합니다. 완충액에는 이미 Mg 2+ 및 dNTP 혼합물이 포함되어 있습니다. 또한 비특이적 PCR 증폭을 효과적으로 억제하고 다중 qPCR 반응의 증폭 효율을 개선할 수 있는 요소가 추가되어 증폭 효율을 보장하고 최대 다중 증폭 반응을 수행할 수 있습니다. dUTP/UDG 시스템이 추가되어 에어로졸 오염 위험을 효과적으로 방지합니다.
특징
특징
1. 뛰어난 다용성 : 병원성 미생물, 인간 유전체, 식물 및 기타 종의 핵산의 qPCR 증폭 및 검출에 적합합니다 .
2. 높은 감도 : 신중하게 최적화된 버퍼 시스템은 최대 250복사본/mL까지 저농도 템플릿의 검출 감도를 향상시킵니다 .
3. dUP/UDG 시스템 : dUTP/열에 불안정한 UDG 오염 방지 시스템을 도입하여 제품의 에어로졸 오염을 효율적으로 분해하고, 거짓 양성 결과를 줄이며, 신뢰성 있는 결과를 보장합니다 .
4. 빠른 프로그램 지원 : 40분 빠른 프로그램과 호환 됩니다 .
5. 뛰어난 안정성: 37℃에서 14일간 안정적이며, 10회 반복 동결 및 해동이 가능합니다 .
명세서
구성품 번호 |
16901 ES 6 0 / 16901 ES 8 0 / 16901ES92 |
크기 |
100 톤 / 1000 톤 / 10000톤 |
구성 요소
이름 |
16901 ES60 (100톤) |
16901 ES80 (1,000톤) |
16901 ES92 (10,000톤) |
|
16901 -A |
500 μL |
5ml(5ml) |
50ml (50ml) |
|
16901 -비 |
하이페어™ 효소 혼합물 |
100 μL |
1ml(1ml) |
10ml(10ml) |
참고 : 1) 5×Hifair™ MP 버퍼는 Hifair™ Superior Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer 의 약자로 , dNTP, dUTP, Mg 2+ , 안정제 등이 포함되어 있습니다.
2) Hifair™ 효소 혼합물은 주로 Hifair™ 역전사효소, UNICON™ HotStart Taq DNA 중합효소 , RNase 억제제, UDGase 등을 함유하고 있습니다.
저장
제품은 -25℃ ~ -15℃에서 1년간 보관해야 합니다. 반복적인 동결 및 해동은 피해야 합니다.
지침
용량 ( μL) |
최종 집중 |
|
5×Hifair™ MP 버퍼 |
5 |
1× |
하이페어™ 효소 믹스 |
1 |
- |
프라이머 믹스(10 μM) |
각각 0.4 |
0.16μM(마이크로미터) |
프로브 믹스(10 μM) |
각각 0.2 |
0.08μM(마이크로미터) |
1-5 |
- |
|
RNase 프리 H 2 O |
25까지 |
- |
1. 반응 구성:
주의사항 : 사용 전 반드시 잘 섞어주시고, 격렬한 진동으로 인해 과도한 거품이 생기지 않도록 주의하세요.
a ) 프라이머 농도 : 프라이머 멀티플렉스 프라이머를 포함한 믹스의 경우, 상황에 따라 최적 프라이머 농도는 0.1~1.0 μM 사이가 될 수 있습니다.
b ) 프로브 농도: 다중 프로브 라벨링 차이 형광 그룹을 포함하는 프로브 혼합물, 상황에 따라 최적 프로브 농도는 0.05~0.5 μM 사이가 될 수 있습니다 .
c ) 템플릿 희석: qPCR은 민감도가 매우 높으므로 템플릿을 희석하는 것이 좋습니다. 제어 Ct 값은 20~35 사이가 적합합니다.
d) 시스템 준비: 필터 요소로 헤드를 분리합니다. 교차 오염 및 에어로졸 오염을 방지합니다.
2. 최적화된 사이클링 프로토콜
(1) 표준 증폭 절차
반응 단계 |
온도 |
시간 |
주기 |
|
1 |
역전사 |
50° C |
1 |
|
2 |
초기 변성 |
95도 |
5 분 |
1 |
3 |
증폭반응 |
95도 |
1 5 초 |
45 사이클 |
60°C (섭씨 60도) |
30 초 c |
메모 :
a) 역전사: 온도는 10~15분 동안 50 ℃ 또는 5.5 ℃ 를 선택할 수 있습니다 .
b) 증폭반응 : 온도는 설계된 프라이머의 Tm 값에 따라 조절됩니다.
c) 형광신호 획득 : 기기 의 요구사항에 맞춰 실험절차를 설정해주세요. 수동 .
(2) 빠른 증폭 프로그램
|
반응 단계 |
온도 |
시간 |
주기 |
1 |
역전사 |
50°C |
5 분 |
1 |
2 |
초기 변성 |
95도 |
30 초 |
1 |
3 |
증폭반응 |
95도 |
5 초 |
45 사이클 |
60도 |
20 초 |
참고사항 : 실제 qPCR 검출기가 빠른 증폭을 지원하는 경우 사전 테스트를 수행하여 확인하세요.
3. 적용장비
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™ , ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 및 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex ;
스트라타진 MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™ ;
바이오라드 CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, 미니옵티콘™, 옵티콘®, 옵티콘® 2, 크로모4™ ;
에펜도르프 마스터사이클러® ep 리얼플렉스, 리얼플렉스 2s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000 ;
로슈 응용과학 LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96 ;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; 세페이드 SmartCycler® ; 일루미나 에코 qPCR; 슬란 96S, 96P.
노트
건강과 안전을 위해 실험실 가운과 장갑 등 필요한 개인 보호 장비를 착용해 주세요 !
실험 에는 RNasefree 소모품을 사용하세요 .
본 제품은 연구용 으로 만 사용 가능합니다 !
결제 및 보안
귀하의 결제 정보는 안전하게 처리됩니다. 당사는 신용카드 정보를 저장하지 않으며 귀하의 신용카드 정보에 접근할 수 없습니다.
문의
당신은 또한 좋아할 수 있습니다
자주 묻는 질문
이 제품은 연구 목적으로만 사용되며 인간이나 동물의 치료 또는 진단용으로 의도되지 않았습니다. 제품과 콘텐츠는
특정 애플리케이션에는 추가적인 제3자 지적 재산권이 필요할 수 있습니다.
예슨은 윤리적 과학에 헌신하며, 우리의 연구가 안전과 윤리적 기준을 보장하는 동시에 중요한 문제를 해결해야 한다고 믿습니다.