Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit은 다양한 생물학적 샘플의 잔류 DNA를 전처리하는 데 적합합니다. 독특한 자기 비드와 신중하게 최적화된 버퍼 시스템을 사용하여 샘플의 미량 숙주 세포 잔류 DNA를 분리하고 정제하는 것을 극대화할 수 있습니다.

Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit는 CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit(Cat#41301ES), HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit(Cat#41302ES), Vero Host Cell DNA Residue Detection Kit(Cat#41303ES), E.coli Host Cell DNA Residue Detection Kit(Cat#41304ES)를 포함한 다양한 숙주 세포 잔류 DNA 검출 키트와 함께 사용할 수 있습니다.

제품 구성 요소

배송 및 보관

1. 1부는 얼음팩과 함께 배송되며, 1년간 4°C, 장기 보관 시 -20°C로 보관됩니다.

2. Part II는 실온으로 운송되며, 실온 보관은 1년간 가능합니다.

3. Part III는 건조 얼음에 담아 배송되며 -20°C에서 1년간 보관됩니다.

4. 상품을 수령하신 후 Part I, Part II, Part III의 3가지 구성품이 모두 완전한지 확인하시고, 즉시 해당 보관 온도에 보관하시기 바랍니다.

주의사항

1. 사용 전에 사용 설명서를 주의 깊게 읽고, 사용 설명서에 따라 엄격히 조작하십시오. 샘플 처리 작업은 깨끗한 작업대 또는 생물학적 안전 캐비닛에서 수행하는 것이 좋습니다.

2. 실온 보관 시 용액에 침전이나 탁함이 있는지 주의해서 관찰하십시오(특히 겨울과 같이 실온이 낮은 경우). 사용 효과에 영향을 미치지 않도록 용액이 맑아질 때까지 37°C의 수조에 담가둘 수 있습니다.

3. 용출 중 잔류 자기 비드가 있을 수 있으므로 샘플을 채취할 때 자기 비드를 흡입하지 않도록 주의하세요.

4. 본 제품을 사용할 때는 교차 오염을 방지하기 위해 팁을 자주 교체해 주세요.

5. 귀하의 안전과 건강을 위해 이 제품을 사용할 때는 실험실 가운, 일회용 장갑 등의 개인 보호 장비(PPE)를 착용해 주십시오.

6. 이 제품은 연구용으로만 사용하세요!

사전 준비

1. 자체 제공 장비: 교반기, 수조 또는 금속조, 원심분리기, 자기 분리 랙, Hangzhou Aosheng Auto-Pure32A 자동 핵산 추출기 또는 기타 브랜드의 전자동 핵산 추출기.

2. 자체 제공 소모품: 10μL-1000μL 저흡착 필터 팁, 1.5 mL 저흡착 원심분리 튜브, PCR 튜브 또는 96웰 플레이트 및 해당 튜브 캡 또는 멤브레인.

3. 자체 준비 시약: 무수 에탄올(분석용), 1×PBS 완충액(pH 7.4, Mg 및 Ca 이온 없음), 초순수.

4. 처음 사용할 때는 라벨이나 설명서에 표시된 용량의 무수 에탄올을 Washing Solution A*와 Washing Solution B* 병에 넣고 사용 전에 완전히 섞은 다음 잘 표시하십시오. 사용 후에는 병의 뚜껑을 단단히 닫아 병의 에탄올 수준을 유지하십시오.

수동 잔류 DNA 추출

1. 샘플 처리

1.1 샘플에 백신과 같이 비교적 높은 DNA 함량이 포함되어 있는 경우, 1×PBS 완충액(pH 7.4, Mg 및 Ca 이온 없음)으로 적절한 비율로 희석한 후 추출합니다(샘플을 희석하는 것은 검출 값이 표준 곡선의 선형 범위 내에 있도록 하여 검출 정확도를 확보하기 위한 것이며, 일반적으로 100배 희석을 고려할 수 있습니다).

1.2 검사할 시료가 건조분말인 경우, 사용 전에 초순수를 사용하여 10 mg/mL 또는 100 mg/mL로 희석합니다.

1.3 샘플에 복잡한 매트릭스가 있는 경우, 적절한 희석률을 결정하기 위해 표준 첨가 및 회수 실험을 수행해야 합니다.

2. 1.5 mL 튜브에 100 μL의 샘플을 넣은 다음, 100 μL의 용해 완충액, 10 μL의 단백질 분해 효소 K를 넣고 진탕한 후 10초간 혼합합니다.

[참고사항]: 단백질 시료 농도가 0~100mg/mL일 경우 10μL의 단백질 분해효소 K를 첨가하고, 단백질 시료 농도가 100~200mg/mL일 경우 20μL의 단백질 분해효소 K를 첨가합니다.

3. 60°C에서 20분간 배양합니다.

4. 그런 다음 결합용액 400 μL, 글리코겐 9 μL, 폴리 A 칼륨염 6 μL를 첨가하고 볼텍싱하여 잘 섞습니다.

5. 20 μL의 자기 비드를 넣고, 볼텍싱하고 잘 섞은 후, 10분간 방치합니다. 3분마다 10초씩 볼텍싱하고 섞어주세요.

[참고]: 자기 비드를 사용하기 전에 흔들어서 자기 비드가 완전히 재부유되도록 해야 합니다. 한 번에 4-5회 샘플을 첨가한 후 다시 혼합하는 것이 좋습니다.

7. 용액을 내리기 위해 잠시 원심분리하고 원심분리 튜브를 자석 랙에 1-2분 동안 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 조심스럽게 액체를 제거합니다.

8. 세척 용액 A 500 μL를 첨가합니다(사용 전에 절대 에탄올이 첨가되었는지 확인하십시오). 흔들거나 소용돌이치며 혼합하여 자기 비드가 분산되고 원심분리관 벽에 자기 비드가 뭉쳐 있지 않은지 확인합니다.

9. 잠시 원심분리하고 원심분리 튜브를 자석 랙에 1-2분 동안 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 조심스럽게 액체를 제거합니다.

10. 세척 용액 B 500 μL를 첨가합니다(사용 전에 절대 에탄올이 첨가되었는지 확인하십시오). 흔들거나 소용돌이치며 혼합하여 자기 비드가 분산되고 원심분리관 벽에 자기 비드가 뭉쳐지지 않았는지 확인합니다.

11. 잠시 원심분리하고 원심분리 튜브를 자석 랙에 1-2분 동안 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡수되면 조심스럽게 액체를 제거합니다.

12. 잔류 액체를 최대한 제거하기 위해 튜브를 10초간 빠르게 원심분리한 후 자석 랙에 올려놓고 10 μL 피펫을 사용하여 잔류 액체를 흡입합니다.

13. 튜브의 뚜껑을 열고 에탄올이 완전히 증발할 때까지 3분 동안 실온에 두십시오. 자기 비드 표면에 반사나 균열이 나타나지 않으면 에탄올이 완전히 증발한 것입니다.

14. 튜브를 자석 스탠드에서 꺼내고, 65°C에서 예열된 용출액 50-100 μL를 넣고 잘 흔들어 섞는다. 그런 다음 간단히 원심분리하고, 65°C에서 5분간 배양하고, 2-3분마다 한 번씩 흔들어 섞는다.

15. 다시 간단히 원심분리하고 원심분리 튜브를 자석 스탠드에 2분간 올려놓습니다. 자석 비드가 완전히 흡착되면 DNA 용액을 조심스럽게 새 원심분리 튜브로 옮겨 -20°C에서 보관하거나 장기 보관을 위해 -80°C에서 보관합니다.