설명
진핵생물에서 mRNA는 전사 후 변형을 거쳐 5' 말단에 캡 구조라고 알려진 특수한 구조를 형성합니다. 이 구조는 mRNA 안정성, 수송 및 번역에 중요한 역할을 합니다. 백신 바이러스 캡핑 효소는 캡 구조의 형성을 촉진하는 효과적인 효소입니다. D1과 D12라는 두 개의 서브유닛으로 구성되어 있으며 RNA 트리포스파타제 활성, 구아닐릴트랜스퍼라제 활성 및 구아닌 N7-메틸트랜스퍼라제 활성이 있습니다. 7-메틸구아노신 캡 구조(m7Gppp)를 RNA의 5' 말단(m7Gppp5'N)에 부착할 수 있습니다.
백신바이러스 캡핑 효소는 캡핑 완충액(Capping buffer), 구아노신 삼인산(GTP), S-아데노실메티오닌(SAM) 및 기타 성분을 적절한 농도로 혼합하여 1시간 이내에 RNA를 캡핑하는 동시에 올바른 방향성을 보장할 수 있습니다.
이 키트는 이중 항체 샌드위치 효소 결합 면역 흡착 검사(ELISA)의 원리를 사용하여 백신 바이러스 캡핑 효소의 잔류량을 검출합니다. 백신 바이러스 캡핑 효소 표준 및 시험 샘플을 항-백신 바이러스 캡핑 효소 항체(36709-A)가 있는 사전 코팅된 효소 플레이트에 첨가한 다음 희석된 바이오틴 표지 캡핑 효소 검출 항체(36709-C)를 첨가하고 마지막으로 스트렙타비딘-HRP(SA-HRP)(36709-D)를 첨가합니다. 이것은 항체+항원+항체-바이오틴+SA-HRP 복합체를 형성합니다. 세척 후 TMB 기질 용액(36709-H)을 첨가하여 색상을 발현합니다.
HRP 효소의 촉매 작용 하에서 TMB는 무색에서 청색으로 변환되고, 정지 용액(36709-I)의 작용 하에서 최종적으로 황색으로 변환됩니다. 황색의 강도는 샘플에서 검출된 백신 바이러스 캡핑 효소의 양과 양의 상관 관계가 있습니다.
구성 요소
|
아니요. |
이름 |
36709ES48 |
36709ES96 |
|
36709-A |
항백신 캡핑 효소 코팅 마이크로타이터 스트립 |
48 티 |
96티 |
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36709-B* |
기준: 바키니아 캡핑 효소 |
1 바이알 |
2 바이알 |
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36709-C |
발각 항체：비오틴- 결합 항체 |
60 μL |
120 μL |
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36709-D |
스트렙타비딘-HRP |
20 μL |
40 μL |
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36709-E |
희석 완충액 1 |
25 분당 |
45 분당 |
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36709-F |
세척 버퍼 농도 비율(20×) |
25 분당 |
50 분당 |
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36709-G |
희석 완충액 2 |
15 분당 |
30 분당 |
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36709-H |
TMB 기판 |
8 분당 |
15 분당 |
|
36709-I |
해결책을 중단하다 |
5 분당 |
10 분당 |
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36709-J |
플레이트 실러 |
각각 3개씩 |
각각 5개씩 |
*표준 36709-B는 동결건조 분말입니다.
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