이중 가닥 RNA(dsRNA)는 mRNA의 시험관 내 전사 중에 부산물로 나타납니다. 이 부산물은 인체 내에서 면역원성 특성을 가지고 있어 면역 반응을 유발하여 결과적으로 mRNA 수치를 감소시킬 수 있습니다. 이로 인해 dsRNA는 잔여 존재에 대한 철저한 제거와 엄격한 통제가 필요한 번거로운 공정 불순물이 됩니다.

이러한 우려를 해결하기 위해, 이중 가닥 RNA(dsRNA) ELISA 검출 키트는 잔류 dsRNA의 정량화를 위해 이중 항체 샌드위치 효소 결합 면역 검정(ELISA)의 실험 원리를 사용합니다. 이 키트는 일반 dsRNA의 검출뿐만 아니라, peudo UTP, N1-Me-peudo UTP 및 5-OMe-UTP 변형 dsRNA의 검출에도 사용할 수 있습니다.

이 절차에는 표준 및 테스트 샘플을 모두 이전에 항-dsRNA 항체로 코팅된 효소 플레이트(36717-A로 지정됨)에 추가하는 것이 포함됩니다. 그런 다음 바이오틴 표지된 dsRNA 검출 항체(36717-F)를 희석된 형태로 추가합니다. 마지막으로 스트렙타비딘-HRP(SA-HRP)(36717-G)를 도입하여 항체, 항원, 바이오틴 및 SA-HRP로 구성된 복합체를 만듭니다.

플레이트 세척 후 TMB 발색 용액(36717-K)을 첨가하면 발색이 시작됩니다. HRP 효소 촉매 작용의 영향으로 TMB는 무색에서 파란색으로 변형되고, 이는 정지 용액(36717-L)을 적용하여 중단됩니다. 궁극적으로 이 변형은 노란색 색조를 띠며, 그 강도는 샘플에서 확인된 dsRNA의 양과 양의 상관관계를 갖습니다.

이 키트는 다재다능한 용도로 사용할 수 있으며, 생물학적 제품 정제 공정의 최적화, 중간 단계의 불순물 제어, 최종 제품 평가를 위한 출시 테스트를 가능하게 합니다.

제품 검증 보고서​​

구성 요소

배송 및 보관

키트는 아이스팩과 함께 제공되며 2°C ~8°C에서 보관할 수 있습니다. 개봉하지 않은 제품은 1년 동안 유효합니다. 시약을 개봉하면 반년 동안 유효합니다. 이 제품을 절대 냉동하지 마십시오.

지침

1. 실험 전 준비

1) 본 키트에 제공되지 않지만 실험에 필요한 실험재료 :

a. RNase가 없는 팁;

b. RNase가 없는 원심분리관;

c. 먼지가 없는 종이;

d. RNase-free 샘플 전처리 플레이트;

e. 탈이온수 또는 이중 증류수.

2) 필수이지만 제공되지 않는 기기 및 장비:

a. 다기능 마이크로플레이트 리더(450nm와 650nm를 포함하는 듀얼 파장 검출 모드 포함; 450nm를 검출 파장으로, 650nm를 기준 파장으로 사용 가능);

b. 전자동 플레이트 세척기, 보텍스 믹서, 일정 온도 믹서, 원심 분리기;

c. 다양한 사양의 정밀 마이크로피펫 및 다중채널 마이크로피펫;

d. 타이머, 4℃ 냉장고;

e. 마이크로플레이트 셰이커.

2. 결과 분석

a. 검사할 샘플의 OD 값이 표준 곡선의 가장 높은 지점에서의 OD 값을 초과하는 경우 샘플을 희석하여 다시 측정해야 합니다.

b. 곡선 개발 절차: x축에 표준 농도를 표시하고 y축에 해당 교정된 표준 흡광도 값을 표시하여 표준 곡선을 만듭니다. 다양한 도면 및 통계 소프트웨어 도구는 표준 곡선 생성과 알려지지 않은 샘플 농도의 결정에 도움이 될 수 있습니다. 이 실험에는 4매개변수 또는 5매개변수 피팅 방법을 사용하는 것이 좋습니다. 궁극적으로 표준 곡선을 참조하고 샘플의 희석 계수를 고려하여 샘플의 dsRNA 잔류량을 계산합니다.

c. 제공된 표준 곡선은 설명적인 예(참조 목적만)입니다. 실제 샘플 함량은 동일한 실험 표준에 대해 특별히 생성된 표준 곡선을 사용하여 결정해야 합니다.

3. 실험 흐름도

그림 5 실험 흐름도

4. 제품 성능

이 키트의 성능은 완전히 평가되었습니다. 자세한 내용은 기술 담당자에게 문의하여 해당 성능 검증 보고서를 받으십시오.

5. 노트

1. 이 키트를 사용하기 전에 이 사용 설명서를 주의 깊게 읽어보세요.
2. 본 제품은 유효기간 내에 사용하시기 바라며, 서로 다른 배치의 관련 시약을 혼합하여 사용하는 것은 금지되어 있습니다.
3. 모든 시약은 사용하기 전에 실온으로 되돌려 놓아야 합니다.
4. 여러분의 안전과 건강을 위해 실험실 가운과 일회용 장갑을 착용해 주세요.
5. 본 제품은 과학적 연구 목적으로만 사용됩니다.
   
   

   서류:

   안전 데이터 시트

   수동