설명
Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent는 포유류 세포에 siRNA를 형질감염시키기 위해 개발된 PEI 양이온성, 양친매성 형질감염 시약입니다. siRNA 및 miRNA 형질감염에 적합합니다. 이 형질감염 시약은 siRNA 또는 miRNA를 캡슐화하여 양이온성 복합체를 형성하고, 이는 세포 표면의 음전하를 띤 프로테오글리칸과 상호 작용하여 세포 표면에 흡착되고, 세포 내포작용을 통해 세포로 들어가 포함체를 형성합니다. 형질감염 시약은 리소좀에서 H +를 흡수할 수 있는 양성자 스펀지 역할을 하며, 양성자의 지속적인 유입으로 복합체가 부풀어 오르고 파열되어 외인성 siRNA 또는 miRNA가 세포질로 방출됩니다.
이 제품은 광범위한 세포주에서 1 nM siRNA의 90% 이상의 발현 효율을 달성하여 오프타겟 효과를 피할 수 있습니다. Hela, MCF-7, HepG2, CHO 및 기타 부착 세포를 포함한 다양한 세포의 형질 전환에 적합하며 K562 또는 THP-1 세포와 같이 형질 전환하기 어려운 현탁 세포주는 80%의 침묵 효율을 달성할 수 있습니다. 일부 일차 세포, 일차 인간 섬유아세포 및 일차 인간 간세포 등을 포함하여 80%의 침묵 효율을 달성할 수 있습니다.
특징
- 독성이 낮음: 형질전환된 세포는 여전히 좋은 활성을 유지합니다.
- 폭넓은 적응성: 형질전환이 어려운 일반 세포와 일차 세포도 완벽하게 포괄합니다.
애플리케이션
- 세포 형질 전환
사양
| 물리적 및 화학적 특성 | 정보 |
| 형태 | 액체 |
| 혈청 호환 | 예 |
| 세포 유형 | 확립된 세포주 |
| 샘플 유형 | siRNA/miRNA |
| 형질감염 기술 | PEI 기반 트랜스펙션 |
구성 요소
| 구성품 번호 | 이름 | 40806ES01 | 40821ES02 | 40821ES03 |
| 40806 | Hieff Trans™ 시험관 내 siRNA/miRNA 형질감염 시약 | 0.1ml (0.1ml) | 0.5ml (100ml) | 1ml(1ml) |
저장
제품은 2-8ºC에서 1년간 보관해야 합니다. 냉동하지 마세요!
그림
- 형질전환 효과의 증명
그림 1. Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent의 형질전환 효율은 위에 표시되어 있습니다.
(1) Q: DNA transfection과 siRNA transfection의 차이점은 무엇인가요?
A: 1. siRNA는 염기쌍이 20개밖에 없으므로 수천 개, 심지어 10,000개 이상의 염기쌍을 지닌 DNA보다 훨씬 작습니다.
2. DNA를 형질감염시키는 데 사용된 형질감염 시약 및 방법은 siRNA의 형질감염에 적합하지 않습니다.
3. siRNA 형질감염은 DNA 형질감염보다 형질감염 시약의 세포독성에 대한 요구 사항이 더 엄격합니다.
(2) Q: 트랜스펙션 후 트랜스펙션 시약을 교체해야 합니까?
A: 매체 변경의 경우 두 가지 상황을 구별할 수 있습니다.
1. 형질감염 전에 배지를 교체하지 않은 경우, 세포 성장에 필요한 영양소를 보장하기 위해 형질감염 후 약 6시간 후에 배지를 교체해야 합니다.
2. 형질전환 전 변화가 있는 경우 배지에 영양분이 부족한 경우 평소와 같이 배지를 교체할 수 있습니다.
(3) Q: siRNA와 플라스미드를 형질전환하기 위한 PEI 형질전환 시약의 효율성은 무엇입니까?
A: 이 PEI 형질감염 시약은 siRNA를 위해 특별히 개발되었으며, 플라스미드 형질감염은 권장되지 않습니다.
(4) Q: 트랜스펙션 시약을 동결할 수 있나요?
A: 동결하지 마십시오. 트랜스펙션 시약은 PEI 양이온 트랜스펙션 시약이기 때문입니다. 낮은 온도에서 동결하면 PEI 트랜스펙션 시약의 활성이 파괴됩니다. 따라서 최상의 트랜스펙션 효율을 유지하려면 4도에서 보관하는 것이 가장 좋습니다.
(5) Q: 형질감염 효율을 향상시키는 방법은 무엇입니까?
A: a: 형질감염 당시 세포 밀도는 30%-50%입니다.
b: siRNA와 리포좀 희석 시에는 트랜스펙션 중 Opti-MEM 무혈청 배지를 사용해야 합니다.
c: 배지는 형질감염 후 4~6시간 후에 교체할 수 있습니다.
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