Hieff Trans™ 범용 트랜스펙션 시약 -40808ES

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제품번호: 40808ES02

크기: 0.5ml (100ml)
가격:
판매 가격$225.00 일반 가격$405.00

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설명

Hieff Trans™ 범용 트랜스펙션 시약은 최신 나노기술을 기반으로 개발된 다목적, 편리하고 효율적인 리포좀 트랜스펙션 시약입니다. DNA, RNA 및 올리고뉴클레오타이드, 일차세포를 포함한 트랜스펙션에 적합합니다. 뉴런을 포함한 트랜스펙션이 어려운 세포는 트랜스펙션 효율이 높습니다. 독특한 공식으로 배지에 직접 첨가할 수 있으며 혈청이 있어도 트랜스펙션 효율에 영향을 미치지 않아 혈청 제거로 인한 세포 손상을 줄입니다. 트랜스펙션 후 핵산-트랜스펙션 시약 복합체를 제거하거나 새로운 배지로 교체할 필요가 없으며 세포의 영양 상태에 따라 4~6시간 후에 새로운 배지를 교체할 수도 있습니다.

제품 구성 요소

구성 요소 번호

구성 요소

고양이 번호/크기

40808ES02

40808ES03

40808ES03

40808-A

유니버설-A

0.5ml (100ml)

1ml(1ml)

5×1ml

40808-B

유니버설-B

0.5ml (100ml)

1ml(1ml)

5×1ml

배송 및 보관

제품은 아이스팩과 함께 배송되며 2-8℃에서 1년 동안 보관할 수 있습니다. 얼리지 마세요!

주의사항

1) 형질전환 작업 중 세포 밀도는 70%-90%에 도달하는 것이 좋으며, 구체적인 도금 밀도는 세포 상황에 따라 결정됩니다.
2) 형질감염 복합체를 제조하려면 혈청이 없는 배지에서 DNA와 형질감염 시약을 희석해야 합니다.
3) 형질감염 중 배지에 항생제를 첨가할 수 없습니다.
4) 고순도 DNA 또는 RNA를 사용하면 더 높은 형질 전환 효율을 얻는 데 도움이 되며, 플라스미드 내의 엔도톡신은 형질 전환의 적입니다.
5) 2~8ºC에서 보관하시고, 장시간 뚜껑을 반복해서 열지 않도록 주의하세요.
6) 최대의 형질감염 효율을 얻으려면 첫 번째 사용 시 핵산 농도와 시약 양을 최적화해야 합니다.
7) 이 제품은 과학적 연구 목적으로만 사용됩니다!

지침

DNA의 형질전환
[주의] 트랜스펙션 시약의 사용량은 세포 종류 및 기타 실험 조건에 영향을 받으므로, 최초 사용 시 적정 사용량을 최적화하기 위해 그래디언트를 설정하는 것이 좋습니다.
1) 세포를 도말하고, 형질감염 시까지 세포 밀도가 70%-90%가 되어야 합니다.
2) 아래 표에 따라 Universal-B 용액을 Opti-MEM 배지로 희석한 후 부드럽게 혼합합니다.
3) Opti-MEM 배지로 DNA를 희석하여 DNA 프리믹스를 만든 다음, Universal-A 용액을 첨가하고 가볍게 혼합하여 희석된 DNA를 얻습니다.
4) 희석된 DNA를 희석된 Universal-B 용액에 첨가합니다(비율 1:1).
5) 실온에서 5분간 배양합니다.
6) DNA-리포좀 복합체를 세포에 한 방울씩 떨어뜨린 후 부드럽게 섞습니다.
7) 유전자 발현 분석이 이루어질 때까지 37°C, 5% CO2 배양기에서 48~96시간 동안 배양합니다.

siRNA의 형질전환
siRNA의 형질감염 절차는 DNA 형질감염 절차와 동일하지만, siRNA를 희석할 때 Universal-A 용액(3단계)을 추가할 필요가 없습니다.

표 1 다양한 세포 배양 용기에서의 형질감염량 (참고용)

세포 배양 용기

96웰

24웰

6웰

부착세포

1-4×104

0.5-2×105

0.25-1×106

아래 표에 따라 Universal-B 용액을 Opti-MEM 배지로 희석하고 부드럽게 혼합합니다.

Opti-MEM 매체

5 μL

25 μL

125 μL

유니버설-B

0.2 μL

1 μL

5 μL

DNA를 Opti-MEM 배지로 희석하여 DNA 프리믹스를 만든 다음, Universal-A 용액을 첨가하고 가볍게 혼합하여 희석된 DNA를 얻습니다.

Opti-MEM 매체

5 μL

25 μL

125 μL

DNA(0.5–5μg/μL)

0.1μg(마이크로그램)

0.5μg(마이크로그램)

2.5μg(마이크로그램)

유니버설-A(2 μL/μg DNA)

0.2 μL

1 μL

5 μL

희석된 DNA를 희석된 Universal-B 용액에 넣습니다(비율 1:1).

희석된 DNA 용액

5 μL

25 μL

125 μL

유니버설-B

5 μL

25 μL

125 μL

실온에서 5분간 배양합니다.

DNA-리포좀 복합체

구성요소(각 웰)

96웰

24웰

6웰

옵티-멤

10 μL

50 μL

250 μL

DNA(0.5–5μg/μL)

0.1μg(마이크로그램)

0.5μg(마이크로그램)

2.5μg(마이크로그램)

유니버설-B

0.2 μL

1 μL

5 μL

유니버설-A

0.2 μL

1 μL

5 μL

DNA-리포좀 복합체를 세포에 한 방울씩 떨어뜨린 후 부드럽게 섞습니다.

DNA-리포좀 복합체

10 μL

50 μL

250 μL

[참고] 표에 사용된 양은 참고용일 뿐입니다. 사용되는 DNA와 Universal-B 용액의 구체적인 양은 세포 유형 및 기타 실험 조건에 따라 최적화해야 합니다. 비율은 1:0.5-1:5 사이로 유지하는 것이 좋습니다.

서류:

안전 데이터 시트

40808-Hieff TransTM Universal Transfection Reagent-MSDS-HB220722.pdf

매뉴얼

40808-Hieff TransTM Universal Transfection Reagent-HB221024.pdf


자주 묻는 질문:

(1) Q: 핵산전사시약 복합체 제조시 혈청이 존재할 수 있나요?
A: 혈청의 존재는 리포좀의 형성에 영향을 미칩니다. 핵산 트랜스펙션 시약 복합체를 제조할 때는 혈청이 없는 배지(일반적으로 MEM 배지)를 사용하는 것이 좋습니다.

(2) Q: 트랜스펙션 시약을 동결할 수 있나요?
A: 이 시약은 2~8°C에서 보관해야 하며, 뚜껑을 오랫동안 반복적으로 여는 것은 피해야 합니다. 뚜껑을 오랫동안 열면 리포좀 산화가 발생하여 형질감염 효율에 영향을 미칩니다.

(3) Q: Hieff Trans™ Universal Transfection Reagent 사용 시 주의해야 할 점은 무엇입니까?
A: 1) 형질전환 작업 중 세포 밀도는 70%-90%에 도달하는 것이 좋으며, 구체적인 도금 밀도는 세포 상황에 따라 결정됩니다.
2) 형질감염 복합체를 제조하려면 혈청이 없는 배지에서 DNA와 형질감염 시약을 희석해야 합니다.

3) 형질감염 중 배지에 항생제를 첨가할 수 없습니다.
4) 고순도 DNA 또는 RNA를 사용하면 더 높은 형질 전환 효율을 얻는 데 도움이 되며, 플라스미드 내의 엔도톡신은 형질 전환의 적입니다.
5) 2~8ºC에서 보관하시고, 장시간 뚜껑을 반복해서 열지 않도록 주의하세요.
6) 최고의 형질감염 효율을 얻으려면 첫 번째 사용 시 핵산 농도와 시약 양을 최적화해야 합니다.

(4) Q: 형질전환 후 종료가 필요한가요?
A: 필요 없습니다. 트랜스펙션 후 핵산-트랜스펙션 시약 복합체를 제거하거나 새로운 배지로 교체할 필요가 없으며, 세포의 영양 상태에 따라 4-6시간 후에 새로운 배지를 교체할 수도 있습니다.

(5) Q: 트랜스펙션 시약을 바이러스 벡터 패키징의 트랜스펙션에 사용할 수 있나요?
A: 네. 바이러스 벡터 패키징의 효율성은 반드시 형질감염의 효율성과 관련이 있는 것은 아니지만, 패키징 플라스미드의 선택과 플라스미드 간의 비율과도 관련이 있습니다.

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자주 묻는 질문

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