Estabelecimento de Modelo de Colite Ulcerativa de Sulfato de Sódio de Dextrano (DSS)

2. Vantagens do modelo DSS UC

👍 1. Os protocolos são fáceis de serem implementados.

👍 2. O modelo DSS UC se assemelha muito aos sintomas de UC humana com alta repetibilidade.

👍 3. Vários sintomas característicos podem ser induzidos pelo controle da dose de DSS administrada, o que foi exclusivo para o modelo DSS UC.

👍 4. O modelo DSS UC pode ser gerado com uma variedade de animais modelo amplamente utilizados, como camundongos, ratos, peixes-zebra, porcos, moscas-das-frutas, etc.

👍 5. O modelo de câncer associado à colite (CAC) induzido por DII pode ser criado com o uso combinado de azoximetano (AOM).

3. Exemplo de construção do modelo DSS UC

3.1 Modelo de rato(Clique para detalhes)

1) Camundongos BALB/c, fêmeas, 6-8 semanas, 25 g;

2) Água potável estéril com 3% de DSS e filtrada com 0.Membrana de 22 μm;

3) O DSS foi administrado por 7 dias;

4) Inflamação, como cólon edema e congestão foram observados após coloração HE.

Fig.2 Resultados da coloração HE de cortes de colite aguda DSS ^[1]

3.2 Modelo de peixe-zebra(Clique para detalhes)

1) Os embriões de peixe-zebra foram obtidos da desova natural e criados até 1 dia após a fertilização (dpf) em uma incubadora a 28,5℃ em água recirculada (60 μg/mL de sais marinhos instantâneos do oceano) e suplementados com azul de metileno até 1 dpf;

2) Após 1 dpf, utilizar meio de cultura de embriões E3 sem azul de metileno para cultivo até 3 dpf;

3) Preparar solução de armazenamento DSS 10% com meio E3;

4) Diluir DSS com meio de cultura até a dose máxima não letal (concentração de referência de DSS: 0,5%);

5) Os peixes-zebra foram tratados com 0,5% de DSS de 3 dpf a 6 dpf, e os índices foram observados.

Fig.3 DSS induz uma resposta inflamatória no fígado do peixe-zebra ^[2]

3.3 Modelo de porco(Clique para detalhes)

1) Leitões Yorkshire com idade de 4-5 dias;

2) Dose de DSS: 1,25g/kg, via oral por 5 dias;

3) Foi observada uma taxa de captação aumentada de D-manitol.

Fig.4 A concentração de D-manitol induzida por DSS em leitões foi maior do que no grupo controle ^[3]

3.4 Modelo de drosófila(Clique para detalhes)

1) Drosophila, fêmea, 5-10 dias;

2) Alimentação médio foi preparado com solução de sacarose a 5% contendo 3% de DSS e 25 μg/mL bleomicina;

3) A Drosophila foi cultivada a 29°C por três dias com troca diária do frasco de cultura;

4) O DSS induziu a proliferação de células precursoras de ISC e teve um efeito letal sobre a drosófila.

Fig.5 DSS induz a proliferação de células precursoras de ISC em Drosophila ^[4].

3.5 Câncer associado à colite(Clique para detalhes)

1) Camundongos BALB/c, machos, 7 semanas de idade;

2)No dia 1, pese e marque os camundongos. Injete os camundongos intraperitonealmente com solução de AOM de 10 mg/kg.

3) Encha o suprimento de água das gaiolas dos camundongos com água. Calcule 7-10 mL de água por camundongo por dia. Alimentação por uma semana.

4) Substituir a água potável por 2,5% DSS por uma semana;

5) Alimente com água potável regular por duas semanas;

6) Repita os passos 3-4 3 vezes.

Fig.6 Diagrama esquemático do CAC induzido por AOM/DSS ^[5] .

4. Modelagem de critérios de avaliação de sucesso

4.1 Índice de atividade da doença (pontuação DAI)

O modelo foi avaliado com múltiplos parâmetros, incluindo peso corporal, viscosidade fecal e sangue oculto, por meio dos quais é gerado o DAI geral.

Tabela 2 Regras de pontuação DAI

4.2 Pontuação de mudança histológica

As pontuações foram dadas para os indicadores acima com base nas alterações histológicas excluindo a formação de linfonodos para o modelo de colite aguda. O reagente de coloração HE usado é Cat#60524ES60.

Tabela 3 Pontuação de alteração histológica

4.3 Cólon comprimento

O comprimento encurtado do cólon foi um fenótipo óbvio para o modelo de colite crônica, enquanto alterações semelhantes podem ser detectadas no dia 8 para o modelo de colite aguda.

4.4 Resumo

Experimentos preliminares são recomendados para usar o modelo animal DSS UC com controle apropriado. 8-10 animais por grupo são requisitos mínimos. DAI é o critério para avaliar os resultados de um estudo preliminar.

5. Links para este recurso

[1]Xiaona Gao, et al. Revista de Bioquímica Nutricional 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma, et al. Aquicultura e Pesca (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Revista de Bioquímica Nutricional 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang, et al.Fronteiras em Farmacologia.2020.11:586885.

6. Caso de sucesso para modelagem com Yeasen DSS

Modelos de colite aguda bem-sucedidos são gerados com Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) em 7 dias com fenótipo proeminente conforme mostrado na tabela a seguir.

Tabela 4 Construção de diferentes tipos de modelos de enterite com DSS

7. Perguntas frequentes

Independentemente do modelo de colite DSS aguda ou crônica, a gravidade e o sucesso da enterite estão relacionados às espécies de camundongos (diferentes origens genéticas), à concentração de DSS e ao ciclo de dosagem.

Tabela 5 Problemas comuns da modelagem de colite DSS

8. Pedido do produto:

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Tabela 6 Ordem do produto

Nome do produto	Gato Nº.	Tamanho
Sal de sódio de sulfato de dextrano para modelagem de colite MW: 36000~50000	60316ES25	25g
	60316ES60	100 g
	60316ES76	500 g
	60316ES80	1 kg

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