Protocolo de Modelagem de Leitões com Colite Ulcerativa usando Dextrano Sulfato de Sódio (DSS)
O aumento da permeabilidade intestinal é um dos fatores etiológicos da DII e, portanto, pode ser usado como um biomarcador para avaliar a gravidade dos danos intestinais delgados e grossos. O D-Manitol, uma pequena molécula de carboidrato inerte que pode ser absorvida ao longo de todo o eixo das vilosidades da cripta, foi usado para avaliar a permeabilidade intestinal in vivo[1].
Figura 1. Leitão
1. Construção de modelos
2. Resultados
3. Links para este recurso
4. Caso de sucesso para modelagem com
5. Ordem do produto
6. Artigos publicados com nossos reagentes
7. Considere a leitura
1. Construção de modelos
1.1 Modelo Animal
Leitões Yorkshire com 4-5 dias de idade
1.2 Materiais
DSS(
1.3 Protocolo
a) Leitões Yorkshire foram alojados individualmente em baias de piso de metal com pisos de borracha em uma sala com ciclo claro/escuro controlado de 12 h. A temperatura ambiente foi mantida em 26℃ e suplementada com a lâmpada de aquecimento;
b) Os leitões foram alimentados com uma dieta de fórmula comercial de substituto do leite três vezes ao dia, semelhante ao seu nível de ingestão ad libitum;
c) Os animais foram cirurgicamente equipados com um cateter intragástrico. O cateter foi ancorado a um remendo de silicone (cerca de 8×12 mm), que foi posteriormente suturado na parede gástrica com aproximadamente 30 mm inseridos dentro do lúmen gástrico. Cada animal foi equipado com um colete feito sob medida com um bolso dorsal para o armazenamento temporário do segmento externo do cateter;
d) Os animais foram divididos em grupo controle positivo (Pos), grupo controle negativo (Neg) e grupo experimental (Trp);
e) Grupo controle positivo (Pos): perfusão DSS(5 dias)+solução salina(5 dias); Grupo controle negativo (Neg): perfusão com solução salina normal(10 dias); Grupo experimental (Trp): infusão DSS(5 dias)+drogas terapêuticas(5 dias);
f) Dose de DSS: 1,25g/kg, via oral por 5 dias;
g) No ponto final, os animais foram sedados por meio de anestésico inalatório, isoflurano, e sacrificados por injeção intracardíaca de etanol (pentobarbital) a 0,3 ml/kg de peso corporal (PC).
h) Os tecidos do cólon foram imediatamente lavados em solução salina fria (154 mM, pH 7,4) contendo 0,1 mM de fluoreto de fenilmetilsulfonila (PMSF) e coletados para histologia ou congelados rapidamente em nitrogênio líquido para análise subsequente.
2. Resultados
2.1 Análise da permeabilidade intestinal
Figura 2. A concentração de D-manitol induzida por DSS em leitões foi maior do que no grupo controle
A concentração de D-manitol induzida por DSS em leitões aumentou e a barreira intestinal foi destruída.
2.2 Seção de coloração patológica H&E
Figura 3. Corte de coloração patológica H&E (A: grupo Neg; B: grupo Pos)
A gravidade da inflamação colônica foi avaliada pela pontuação da inflamação e medidas histológicas.No grupo Pos tratado com DSS, a estrutura do recesso foi distorcida, células inflamatórias infiltraram-se na mucosa e submucosa, abscesso do recesso e inflamação do recesso.
2.3 Detecção de fatores inflamatórios
Figura 4. Detecção de fatores inflamatórios
A concentração de duas citocinas no grupo Pos tratado com DSS aumentou[1].
3. Links para este recurso
[1]Connie J. Kim, et al. Revista de Bioquímica Nutricional 21 (2010) 468–475.
4. Caso de sucesso para modelagem com Yeasen DSS
Tabela 1 Construção de diferentes tipos de modelos de enterite com DSS
| Modelo | Amostras de modelagem | Plano de modelagem | Resultados da modelagem | Avaliação de uso |
| colite aguda | Camundongos BALB/c, fêmeas, 6-8 semanas, 25 g | 3%-5% DSS beba à vontade por 7 dias consecutivos | No dia 5 apareceu o comprimento do cólon foi encurtado, coloração HE e a inflamação era óbvia | a velocidade de moldagem é rápida e o tempo é curto. Consistente com as características do modelo de colite aguda |
| Camundongos C57BL/6, machos, 8 semanas, 20 g | 3%-5% DSS por gavagem, administração contínua | Ocorre o dia 5, encurtamento do cólon, perda de peso, sangue nas fezes, diarreia | Alta taxa de mofo e curta duração. Consistente com as características do modelo de colite aguda | |
| colite crônica | Camundongo C57BL/6, macho, 8 semanas, 22 g | 1-2% DSS por gavagem, administração contínua | Dia 40 aparece, encurtamento do cólon, perda de peso, sangue nas fezes, diarreia | Alta taxa de moldagem. Consistente com as características do modelo de colite crônica |
| câncer de cólon | Camundongo C57BL/6, macho, 8 semanas, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum por 5 dias durante 3 semanas | 14 semanas com cólon encurtado, perda de peso, coloração HE e inflamação óbvia | Alta taxa de moldagem. Consistente com as características do modelo de câncer de cólon |
5. Ordem do produto
O produto mais vendido precisa de apenas 1/3 do preço do M* com a mesma eficiência, e mantemos um grande estoque.
Tabela 2. Ordem do produto
| Nome do produto | Gato Nº. | Tamanho |
| Sal de sódio de sulfato de dextrana para modelagem de colite MW: 36000~50000 | 60316ES25 | 25g |
| 60316ES60 | 100 g | |
| 60316ES76 | 500 g | |
| 60316ES80 | 1 kg |
6. Artigos publicados com nossos reagentes
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Melhorando a plataforma de utilização de medicamentos com hidrogel mucoadesivo injetável para tratar colite ulcerativa[J]. Revista de engenharia química.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Vesículas extracelulares derivadas do leite aliviam a colite ulcerativa regulando a imunidade intestinal e remodelando a microbiota intestinal [J]. Theranostics. 2021; 11 (17): 8570-8586 SE=11,556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. O ácido valérico derivado do comensal intestinal protege contra lesões por radiação. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Partículas de entrega de nucleotídeos administradas oralmente a partir de microfluídica para tratamento de doença inflamatória intestinal[J]. Applied Materials Today.2021 Dez;25:101231 SE=10,041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identificação da assinatura do gene relacionado ao sistema imunológico e previsão da rede CeRNA na colite ulcerativa ativa [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855645. SE=7,561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. A microbiota oral afeta a eficácia e o prognóstico da radioterapia para câncer colorretal em modelos de camundongos[J]. Relatórios de células. 2021, 109886. IF=9,423
[7]Hao H, Zhang X, Língua eu, Liu Q, et al. Lactobacillus plantarum Efeito de vesículas extracelulares derivadas de Q7 sobre microbiota intestinal e colite ulcerativa em camundongos[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Ninho de pássaro comestível melhora a colite ulcerativa induzida por sulfato de dextrana sódico em camundongos C57BL/6J restaurando o equilíbrio das células Th17/Treg[J]. Frontiers in Pharmacology. 2021.632602. IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumina alivia colite em camundongos e câncer colorretal associado à colite [J]. Frontiers in Pharmacology. 2020.586885. SE=7,561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Isoflavonas de soja melhoram a colite experimental ao direcionar as vias do inflamossomo ERα/NLRP3[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. O efeito anti-inflamatório de peptídeos derivados de gelatina óssea bovina na AR induzida por LPSW264.7 Células de macrófagos e camundongos C57BL/6 induzidos por sulfato de sódio dextrano[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. SE=5,717
[12] Wang S, Huang Eu, bronzeado KS, et al.Isosteviol sódico melhora a colite crônica induzida por sulfato de dextrano sódico por meio da regulação do perfil metabólico, polarização de macrófagos e via NF-B[J].Medicina oxidativa e longevidade celular. 2022,4636618. SE=5,076
7.Considere a leitura
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Estabelecimento de modelo de câncer associado à colite induzida por azoximetano (AOM) e dextrano sulfato de sódio (DSS)
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