A angiogênese está intimamente associada à cicatrização de feridas, inflamação, artrite reumatoide, retinopatia diabética, degeneração macular e crescimento tumoral. Durante o crescimento de um organismo, a angiogênese é uma parte importante do crescimento de novos tecidos. Na idade adulta, exceto por eventos periódicos que são estritamente regulados em órgãos especiais, quase todo tecido normal carece de uma grande quantidade de angiogênese fisiológica devido ao equilíbrio entre fatores endógenos pró-angiogênicos e anti-angiogênicos. Quando o equilíbrio é interrompido na direção da promoção da angiogênese, as células endoteliais microvasculares (ECs) mudarão para um fenótipo angiogênico, iniciando assim uma resposta angiogênica, que pode ser eliminada ou acelerada.
No estudo, os métodos experimentais tradicionais de angiogênese in vivo incluem microbolsa corneana, mesentério, implantes de esponja/matriz, análise de disco (DAS), peixe-zebra, etc. No entanto, esses experimentos não são apenas tecnicamente exigentes, caros e demorados, mas também envolvem questões éticas. Comparado com experimentos de angiogênese in vivo, é mais econômico e prático usar uma matriz especial para manter a angiogênese celular in vitro. A matriz de manutenção de crescimento celular mais comumente usada é uma preparação de membrana basal solúvel extraída de tumores de camundongo EHS - gel de matriz.
Os principais componentes do gel de matriz são laminina, colágeno tipo IV, proteoglicano de sulfato de heparano (HSPG) e nestina, e também contém fatores de crescimento como TGF-beta, EGF, IGF, FGF, ativador de plasminogênio tecidual e outros fatores de crescimento contidos em tumores EHS. Ele fornece suporte, resistência à tração e suporte de andaime para tecidos e células, e também pode servir como uma subestrutura tridimensional para adesão e movimento celular, bem como um reservatório para fatores de crescimento, quimiocinas e citocinas. Ele também pode atuar como um sinal para morfogênese e diferenciação celular.
Características do produto
Alta segurança: LDEV (Vírus de Melhoria da Lactato Desidrogenase) livre
Versatilidade de concentração: Faixa de concentração de 8~20 mg/mL
Boa estabilidade do lote: Processo rigoroso de produção e controle de qualidade para garantir desempenho estável entre lotes
Baixa endotoxina: conteúdo de endotoxina ≤4 UE/mL
Detecção de contaminantes: não foram detectados resíduos de micoplasma, bactérias e fungos.
Experiência de angiogênese
- Preparação do gel de matriz
1) Um dia antes do experimento, retire o CeturegelTM retire o gel de matriz do congelador e coloque-o na geladeira a 4°C durante a noite para derreter e pré-resfriar os consumíveis utilizados.
2) Coloque o CeturegelTM Matrix Gel em uma caixa de gelo o tempo todo antes do experimento.
3) Abra a embalagem de esterilização das lâminas angiogênicas e remova as lâminas.
4) Adicionar 10 μl de CeturegelTM Matrix Gel em cada poço, tomando cuidado para que a ponta da pistola fique perpendicular ao topo do poço interno ao adicionar CeturegelTM Gel de matriz para evitar que qualquer gel de matriz flua através do poço superior e deixe gel residual.
- Gel
1) Primeiro, cubra a lâmina com uma tampa e prepare uma placa de Petri de 10 cm, colocando uma toalha de papel umedecida em água para formar uma caixa úmida.
2) Coloque a lâmina na placa de Petri e cubra com a tampa.
3) Coloque toda a placa de Petri em um recipiente de CO2 incubadora e deixe por cerca de 30 min para aguardar a condensação do gel, enquanto prepara a suspensão de células.
- Propagação celular
1) Preparar as células digeridas em uma suspensão celular com densidade de 2×105 células/ml e misture bem.
2) Remova as lâminas de vasos sanguíneos contendo vasos sanguíneos que se solidificaram em gel.
3) Adicione 50 μl de suspensão celular em cada poço, tomando cuidado para manter a ponta da pistola perpendicular ao topo do poço superior e não tocar no gel do poço inferior.
4) Adicione o meio de cultura celular, cubra e deixe repousar; após um período de tempo, todas as células afundarão e cairão na superfície do gel da matriz.
- Aquisição de Imagem
Observe, tire fotos e mantenha imagens regularmente de acordo com a taxa de crescimento das células.
- Apresentação dos resultados
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Observação:Resultados de angiogênese e fluorescência
Recomendação de produto
Ácido pseudolárico | EUnúmero tem | Nãoforma |
40183ES08/10 | 5/10 mL | |
40184ES08/10 | 5/10 mL | |
40185ES08/10 | 5/10 mL | |
40186ES08/10 | 5/10 mL | |
40187ES08/10 | 5/10 mL | |
CeturegelTM Matriz Alta Concentração,Vermelho de fenol sem,LDEV-Livre | 40188ES08/10 | 5/10 mL |
40190ES08/10 | 5/10 mL | |
CeturegelTM Matriz para cultura de organoides,Vermelho de fenol sem,LDEV-Livre | 40191ES08/10 | 5/10 mL |