Os macrófagos são uma célula importante no sistema imunológico e desempenham uma variedade de papéis nos tecidos, incluindo eliminação de patógenos, reparo de tecidos e imunomodulação. A ativação ou disfunção anormal de macrófagos em certas condições patológicas, como inflamação crônica, doenças autoimunes ou desenvolvimento de tumores, pode afetar adversamente o organismo. Os lipossomas de clodronato são uma classe de medicamentos ou compostos que esgotam ou removem especificamente os macrófagos. Os lipossomas de clodronato são a ferramenta de remoção de macrófagos mais madura, conveniente e econômica disponível hoje e podem remover efetivamente os macrófagos de uma variedade de tecidos e locais em animais, incluindo fígado, baço, pulmões e sangue, e são o método mais amplamente usado de remoção de macrófagos hoje.
Abordagens de diferentes organizações (apenas para informação)
| Órgão/Macrófago | Dosagem (20-25g/rato) |
| Macrófagos do esplen/polpa vermelha | Dose única: 200 µl/camundongo (IV ou IP). |
| Células do fígado/Kuffer | Dose única: 200 µl/camundongo (IV ou IP). |
| Macrófagos pulmonares/alveolares | IV (150-200 µl) combinado com intratraqueal ou intranasal (50 µl) dá os melhores resultados. |
| nódulo linfático | Injeção (100-200 µl)/camundongo, regimes de dosagem específicos podem ser encontrados na literatura. |
| Cérebro/microglia | Entrada intracerebroventricular no líquido cefalorraquidiano, 10 µl/camundongo, 50 µl/rato. |
| Sangue/Monócitos | 150-200 µl/camundongo (IV), a taxa máxima de depleção é atingida em 24 horas, mas a taxa máxima de depleção em 1-7 dias depende da cepa. |
Perguntas frequentes
P1: O que devo fazer depois de receber lipossomas de Clodronato?
R: Após receber os lipossomas de Clodronato, se você não puder usá-los imediatamente, você precisa colocá-los na geladeira a 4℃. O congelamento é proibido! Use como solução de estoque, nenhuma diluição é permitida. Os lipossomas são suscetíveis à precipitação, então é recomendado misturá-los suavemente antes do uso. Além disso, os lipossomas de clorofosfato a 4℃ não podem ser usados imediatamente, e precisam ser retornados à temperatura ambiente antes da injeção.
P2: Como transfiro lipossomos do frasco?
R: A melhor maneira de transferir lipossomas do frasco é usar uma seringa de agulha estéril. Dessa forma, a suspensão de lipossomas restante no frasco permanecerá selada e limpa. Você também pode usar uma pipeta com uma ponta estéril para transferência, mas é melhor fazer isso em um ambiente limpo, como em um exaustor BSC.
Q3: Os lipossomas de clodronato podem ser usados para eliminação de macrófagos in vitro?
R: O produto pode ser usado para depuração de macrófagos in vitro, mas esse método é mais adequado para experimentos in vivo. O principal motivo é que durante a cultura in vitro, o clorofosfato liberado de células mortas ou “vazando” de lipossomos permanece no meio de cultura, mas in vivo, o clorofosfato tem uma meia-vida muito curta e é rapidamente eliminado pelos rins. Embora o ácido clorofosfórico livre não entre nas células ou lipossomos, uma vez que se acumula no meio de cultura, ele entra lentamente nas células.
P4: Qual é a razão pela qual os animais morrem logo após a injeção intravenosa de lipossomas de clodronato?
R: Por um lado, é possível que o animal tenha sido injetado com uma suspensão de lipossomas não homogênea. É recomendado agitar suavemente para misturar antes do uso. Os lipossomas se acomodarão após um período de tempo in vitro. Se mais de um animal tiver que ser injetado ao mesmo tempo durante um longo período de tempo, os lipossomas se acomodarão na seringa e formarão uma suspensão não homogênea, de modo que a medição da primeira injeção mudará significativamente da medição da última injeção. Por outro lado, é possível que os lipossomas tenham acabado de ser removidos da geladeira e não tenham retornado à temperatura ambiente.
Q5: Quantos dias após a injeção de lipossomas de Clodronato o animal morreu?
R: Isso pode ser devido à contaminação bacteriana. A remoção de macrófagos do corpo aumenta a chance de infecção por, por exemplo, partículas virais, bactérias ou leveduras.
Q6: Os lipossomas de clodronato não têm o efeito desejado?
R: Os lipossomas de clodronato são produzidos em grandes lotes, e cada lote é testado quanto à concentração de clodronato, bem como a uma série de possíveis contaminantes para garantir que esteja correto antes de ser vendido aos clientes. Além disso, os lipossomas são suscetíveis a temperaturas extremas. A maneira correta de transportá-los e armazená-los é de 4 a 8 °C. As suspensões não devem ser congeladas nem aquecidas acima de 30 °C. Elas precisam ser usadas em até 3 meses a partir do recebimento da remessa, caso contrário, o efeito do uso pode ser afetado.
P7: Ao injetar por via intravenosa, o volume injetado pode ser aumentado?
R: A injeção intravenosa deve ser baseada no peso corporal do animal e não deve exceder 0,1 mL/10 mg, mas para injeção intraperitoneal, o volume de injeção pode ser aumentado apropriadamente. A injeção subcutânea precisa ser decidida de acordo com o volume do local da injeção.
P8: O que devemos prestar atenção ao usar lipossomas?
R: Os lipossomas preparados a partir de lipídios com cadeias de hidrocarbonetos saturadas são realmente muito fortes, mas as seguintes precauções devem ser observadas.
①Não misture com solventes orgânicos, como clorofórmio, metanol, etanol, DMSO, éter, etc.
② Não adicione surfactantes, a menos que seja necessário para clivar os lipossomas.
③ Não aqueça próximo ou acima da temperatura de transição de fase principal dos lipídios, a menos que esteja realizando o carregamento do medicamento, o que requer incubação acima da temperatura de transição de fase.
Recomendação de produto
| Nome do produto | Número do item | Especificação |
| 40337ES08 | 5 mL | |
| 40337ES10 | 10 mL | |
| 40338ES08 | 5 mL | |
| 40338ES10 | 10 mL |