O primeiro caso confirmado de varíola dos macacos foi relatado no Reino Unido no início de maio, e rapidamente eclodiu em países e regiões não endêmicos. Em 21 de setembro de 2022, 106 países/regiões foram confirmados em todo o mundo, com um total de 63.117 casos. Em 16 de setembro, Chongqing confirmou um caso importado de varíola dos macacos, o primeiro caso na China continental, o que despertou preocupação social.

Figura 1. Mapa global do surto de varíola dos macacos em 2022 (do CDC)

1. O que é varíola dos macacos?
2. A história da varíola dos macacos
3. Como se espalha
4. Sinais e sintomas
5. Método de detecção
6. Correspondência de produtos
7. Encomenda de produtos

1. O que é varíola dos macacos?

O vírus da varíola dos macacos é um vírus de DNA de fita dupla com um comprimento total de cerca de 197 kb. Pertence ao gênero Orthopoxvirus da família Poxviridae. Vírus). Existem dois ramos do vírus da varíola dos macacos (ramo da África Ocidental e ramo da Bacia do Congo). Entre eles, a taxa de letalidade do ramo da África Ocidental é de cerca de 3,6%, e a taxa de letalidade do ramo da Bacia do Congo pode chegar a 10,6%. Amostras de casos de varíola dos macacos encontrados em áreas não endêmicas desde maio de 2022, a análise de sequenciamento mostrou o clado da África Ocidental^[1].

Figura 2. Imagem da varíola dos macacos (imagem do CCDC)

2. A história da varíola dos macacos

A varíola dos macacos foi descoberta em 1958, quando dois surtos de uma doença semelhante à varíola ocorreram em colônias de macacos mantidos para pesquisa. Apesar de ser chamada de “varíola dos macacos”, a fonte da doença permanece desconhecida. No entanto, roedores africanos e primatas não humanos (como macacos) podem abrigar o vírus e infectar pessoas^[2].
O primeiro caso humano de varíola dos macacos foi registrado em 1970. Antes do surto de 2022, a varíola dos macacos havia sido relatada em pessoas em vários países da África central e ocidental. Anteriormente, quase todos os casos de varíola dos macacos em pessoas fora da África estavam ligados a viagens internacionais para países onde a doença ocorre comumente ou por meio de animais importados. Esses casos ocorreram em vários continentes^[2].

3. Como se espalha

Ela pode se espalhar de animais para humanos, de humanos para humanos e do ambiente para humanos.
Agora está claro que a varíola dos macacos pode infectar humanos de 3 maneiras: Uma é de animais infectados para pessoas. O vírus pode entrar no corpo através de pele rompida, trato respiratório ou membranas mucosas (olhos, nariz ou boca). A segunda é transmitida através de contato próximo entre pessoas, incluindo relações sexuais, beijos, abraços ou toques nas partes do corpo da varíola dos macacos, e contato com roupas, roupas de cama, toalhas ou utensílios de mesa contaminados com vírus e outros itens que também podem ser infectados. A terceira é a transmissão de gotículas respiratórias^[3].

4. Sinais e sintomas

As principais manifestações clínicas são febre, erupção cutânea e linfadenopatia.
Os sintomas mais comuns no estágio inicial incluem febre, dor de cabeça, dores musculares e linfonodos inchados. A erupção cutânea aparece de 1 a 3 dias após o início da doença. A erupção cutânea típica aparece primeiro no rosto e gradualmente se espalha para os membros e outras partes. A erupção cutânea é principalmente centrífuga., erupções cutâneas no rosto e nos membros são mais comuns do que no tronco, erupções cutâneas podem aparecer nas palmas das mãos e nas solas dos pés, e o número de erupções cutâneas varia de algumas a milhares; também pode envolver a mucosa oral, o trato digestivo, os genitais, a conjuntiva e a córnea.
Os sintomas geralmente duram de 14 a 21 dias, e os pacientes geralmente os resolvem por conta própria. Eritema ou hiperpigmentação ou mesmo cicatrizes podem permanecer após as crostas caírem. Vale a pena notar que a crosta permanece contagiosa até que caia e uma nova camada de pele se forme por baixo^[3].

5. Método de detecção

Para prevenir e controlar efetivamente a epidemia de varíola dos macacos e evitar que o vírus seja importado e espalhado, as empresas globais de IVD responderam ativamente. Como fornecedora de matérias-primas para produção de reagentes de detecção de IVD e soluções de reagentes, a YEASEN fornece uma solução completa para ajudar a detectar eficientemente o vírus da varíola dos macacos. Da extração de ácido nucleico aos componentes de reagentes (reagentes enzimáticos e pseudovírus) e kits semiacabados (sondas primer, reagentes enzimáticos e controles de plasmídeo), a YEASEN pode fornecer a você de forma estável.

Figura 3. Método de detecção de vírus

5.1 Vantagem do método

• Operação eficiente e conveniente - um conjunto de kits, incluindo todos os componentes, sem operações complicadas, adição em uma etapa
• Alta sensibilidade de detecção — Método de anticorpo geneticamente modificado com enzima Taq de partida a quente, 1 cópia/reação também pode ser detectada
• Forte estabilidade do reagente — Armazene a 37℃ por 1 semana, desempenho estável após congelamento e descongelamento repetidos
• Prevenção de poluição UDG — O sistema dUTP/UDG é adicionado ao sistema para prevenir efetivamente o risco de contaminação por aerossol.
• Aplicável a várias plataformas — Adequado para Bio-Rad CFX96, ABI Q5 e Slan

5.2 Correspondência de produtos

• Reagentes de extração de ácido nucleico: MolPure™ Kit de DNA/RNA viral com cotonete magnético (Cat#18300ES)
• Reagente de detecção de varíola dos macacos: Kit qPCR em tempo real para vírus da varíola dos macacos(Cat#13862ES/Cat#13863ES)
• Pseudovírus Monkeypox: Pseudovírus do vírus Monkeypox (Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Produtos Recomendados

6.1 Kit qPCR em tempo real para vírus da varíola dos macacos (Cat#13862ES)

Vantagens do produto:
Operação eficiente e conveniente
Alta sensibilidade e boa especificidade
Super estabilidade
Boa repetibilidade

6.1.1 Apresentação do caso:

• Super estabilidade térmica para 37℃

O MPXV foi amplificado colocando Cat#13862ES a 37℃ por 7 dias. Os resultados mostraram que o valor de Ct e o valor de fluorescência não foram significativamente afetados por 7 dias a 37℃, e a estabilidade térmica foi forte.

Figura 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ verificação de estabilidade acelerada de 7 dias

• Super estabilidade de congelamento e descongelamento

O MPXV foi amplificado pelo congelamento e descongelamento do Cat#13862ES a -20℃ por 10 vezes, 20 vezes e 50 vezes, respectivamente.Os resultados mostraram que o congelamento e o descongelamento 10 vezes, 20 vezes e 50 vezes a -20℃ não tiveram efeito significativo no valor de Ct e no valor de fluorescência, e a estabilidade do congelamento e descongelamento foi forte.

Figura 5. Verificação da estabilidade de congelamento-degelo de Yeasen (Cat#13862ES)-20℃

• Sensibilidade ultra-alta, 1 cópias/μL também podem ser detectadas

Usando o produto Yeasen monkeypox (Cat#13862ESES), 1000 cópias/μL, 100 cópias/μL, 10 cópias/μL, 1 cópia/μL e branco negativo (NTC) foram usados ​​para detectar MPXV. Pode-se ver que uma única cópia também pode ser detectada (o valor Ct é em torno de 38), e o teste NTC de 48 poços foi repetido, com uma linha de base estável, picos NTC negativos e nenhum fenômeno de cauda, ​​com alta sensibilidade e alta especificidade.

Figura 6. Detecção de sensibilidade do MPXV

Figura 7. Detecção de especificidade do MPXV

• Os reagentes são estáveis ​​e reprodutíveis

O kit de detecção de varíola dos macacos Yeasen (Cat#13862ESES) foi selecionado para realizar 10 testes repetidos para concentrações baixas, médias e altas de amostras positivas. Os resultados mostraram que o CV das amostras positivas no canal FAM foi menor ou igual a 2%, e o controle em branco não apresentou pico nem fenômeno de cauda. , boa repetibilidade.

Figura 8. Teste de repetibilidade

6.2 Kit qPCR em tempo real para vírus da varíola dos macacos (UDG Plus)(Cat#13863ES)

Vantagens do produto:

⑴ Operação eficiente e conveniente
⑵ Alta sensibilidade e boa especificidade
⑶ Super estabilidade
⑷ Boa repetibilidade
⑸ Prevenção da poluição da UDG

6.2.1 Apresentação do caso:

• Super estabilidade térmica para 37℃

O MPXV foi amplificado colocando Cat#13863ES a 37℃ por 7 dias e 14 dias, respectivamente. Os resultados mostram que após 7 dias e 14 dias a 37℃, não há efeito significativo no valor de Ct e no valor de fluorescência, e a estabilidade térmica é forte.

Figura 9. Yeasen (Cat#13863ES) 37℃ acelerado 7 dias, 14 dias de verificação de estabilidade

• Super estabilidade de congelamento e descongelamento

Cat#13863ES foi congelado e descongelado a -20℃ por 50 vezes para amplificar o MPXV. Os resultados mostraram que o congelamento e o descongelamento a -20℃ por 50 vezes não tiveram efeito significativo no valor de Ct e no valor de fluorescência, e a estabilidade do congelamento e descongelamento foi forte.

Figura 10. Verificação da estabilidade de congelamento-degelo de Yeasen (Cat#13863ES) -20℃

• Alta Sensibilidade e Especificidade

5 cópias/μL de MPXV e branco negativo (NTC) foram testados usando o produto Yeasen monkeypox (Cat#13863ESES). Os resultados mostraram que a linha de base era estável, a taxa de detecção de FAM era de 100%, o limite mínimo de detecção era de 5 cópias/μL e, durante o teste repetido de 48 poços de NTC, a linha de base dos canais FAM e VIC era estável, o pico negativo de NTC não tinha nenhum fenômeno de cauda e tinha alta sensibilidade e alta especificidade.

Figura 11. Detecção de sensibilidade do MPXV

Figura 12. Detecção de especificidade do MPXV

• Boa linearidade dos reagentes

O modelo positivo foi diluído 10 vezes a partir da concentração de 1×105 cópias/μL, e o kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) foi usado para repetir a detecção duas vezes. O logaritmo do número de cópias inicial é a abscissa, e o valor Ct é a ordenada. A curva padrão foi feita, e os resultados mostraram que o canal FAM do gene monkeypox tinha uma faixa linear de 10～1×105 cópias/μL, e R2>0,99, que tinha uma boa relação linear.

Figura 13. Teste de Linearidade

• Reagentes estáveis ​​e reprodutíveis

O kit Yeasen qPCR monkeypox (Cat#13863ES) foi selecionado para realizar 10 testes repetidos para concentrações baixas, médias e altas de positivo, e 20 testes repetidos para controle negativo (NC) e controle em branco (NTC). Os resultados mostram que: canal FAM O CV de amostras positivas é menor que 3%, e o controle negativo e o controle em branco não têm pico nem fenômeno de cauda; os valores de Ct do canal VIC NC são todos menores que 35, o CV é menor que 0,3%, e o NTC não tem pico nem fenômeno de cauda, ​​e a repetibilidade é boa.

Figura 14. Teste de repetibilidade (FAM)

Figura 15. Teste de repetibilidade (VIC)

7. Encomenda de produtos

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd., fundada em 2014, é uma empresa de alta tecnologia envolvida em P&D e produção de matérias-primas de enzimas de ferramentas e anticorpos de antígenos. Seus produtos incluem enzimas de diagnóstico molecular, proteínas e anticorpos usados ​​em produtos farmacêuticos, testes de segurança alimentar, reprodução, justiça e outras indústrias. Estamos comprometidos em fornecer aos clientes no campo das ciências biológicas produtos e serviços de alta qualidade. As diretrizes de compra de produtos para o vírus Monkeypox são as seguintes:

Tabela 1.Produtos relacionados

Referências

[1] Centro Chinês de Controle e Prevenção de Doenças: Dicas de saúde contra a varíola dos macacos
[2] CDC:Sobre a varíola dos macacos | Varíola dos macacos | Poxvírus | CDC
[3] Yulin Evening News: A fonte do primeiro caso de varíola dos macacos na China continental foi identificada! Lembrete de emergência de controle de doenças de Guangxi