PCR quantitativa fluorescente é um experimento altamente sensível que requer um alto grau de precisão na operação pelo pessoal do laboratório. Portanto, durante o processo de experimento qPCR, inevitavelmente encontramos problemas:
I. Questões relacionadas a fatores não experimentais
- O laboratório tem muitos projetos de experimentos de qPCR, e os instrumentos estão ocupados, deixando as misturas de reação cuidadosamente preparadas sem um método claro de descarte.
- Existem inúmeras amostras quantitativas, a tarefa de adicionar amostras é onerosa e há risco de erros de adição de amostras devido a tonturas, levando a resultados experimentais não confiáveis.
- Longos tempos de execução da máquina, número limitado de execuções experimentais e tarefas experimentais não podem ser concluídas conforme planejado regularmente.
- O equipamento do laboratório está sendo substituído por novos instrumentos, há vários instrumentos quantitativos no laboratório e os reagentes quantitativos não são compatíveis com os instrumentos.
II. Questões limitadas por fatores experimentais
Problemas de quantificação com genes de baixa abundância. Design complexo de primers e processos de triagem, sensibilidade e reprodutibilidade de poços replicados...
Como um fabricante experiente dedicado à pesquisa e desenvolvimento de reagentes qPCR, a YEASEN desenvolveu meticulosamente uma solução de pré-mistura qPCR de alto desempenho – Hieff UNICON™ Universal Blue qPCR SYBR Verde Master Mix, que pode resolver os problemas experimentais acima mencionados de uma só vez. O Universal ROX usado neste produto substitui o ROX tradicional, compensando as diferenças de caminho óptico em várias plataformas de instrumentos, tornando-o adequado para todos os instrumentos qPCR. Além disso, o produto emprega um método de modificação de anticorpos e inclui aditivos que melhoram a amplificação genética, melhorando significativamente o desempenho de amplificação do produto. Ele equilibra perfeitamente as necessidades de alto desempenho dos pesquisadores na comunidade científica com os requisitos de alta eficiência das empresas industriais.
Características do produto
- Largo instrumento compatibilidade: O pré-mistura contém um específico tipo de referência tingir, eliminando o precisar para ajustar o ROX concentração.
- Fácil Rastreamento: O azul pré-mistura permite para direto visualização para distinguir se o amostra tem estive adicionado, simplesmente por observando o cor.
- Alto Estabilidade: O sistema é preparado no sala temperatura, e o misturado sistema pode ser armazenado no 4°C para acima para 24 horas sem qualquer mudar em o teste resultados.
- Rápido Configurar: Compatível com ambos padrão e rápido programas, permitindo o quantitativo experimentar para ser concluído em como rápido como 46 minutos.
- Excelente Amplificação Desempenho: Alto amplificação eficiência, bom especificidade, capaz de detecção genes no o solteiro cópia número.
Informações para pedidos
| Posicionamento do produto | Nome do produto | Gato# |
| Pré-mistura quantitativa universal de alta sensibilidade | 11184ES | |
| Rastreamento de cores Alta Sensibilidade Fluorescência Quantitativo Pré-mistura | 11188ES | |
| 11189ES | ||
| 11190ES |
Desempenho do produto
1. Alta sensibilidade: capaz de detectar até uma única cópia
Figura 1. Hieff UNICON™ O Universal Blue premix pode detectar efetivamente uma faixa de quantidade de modelo em 7 ordens de magnitude, com alta eficiência de amplificação e um bom relacionamento linear dentro de uma ampla faixa linear. O modelo usado foi 2 µL de plasmídeo com uma concentração de 10^6 a 10^0 cópias, amplificando o gene humano IL23R.
2.O detecção avaliar e especificidade são bom: largamente aplicável para amplificadores com 30-70% GC contente
Figura 2. Hieff UNICON™ A pré-mistura Universal Blue é amplamente aplicável a amplímeros com conteúdo de GC de 30-70%, garantindo uma taxa de detecção de especificidade extremamente alta. Usando 2 µL de cDNA 293T como molde, 1000 pares de primers para amplímeros de 200 bp (conteúdo de GC% de 30%-70%) foram projetados com o software Primer5, e 27 desses amplímeros foram amplificados aleatoriamente.
3. Alta resolução: pode distinguir com precisão diferenças na concentração do modelo de 2 vezes
Figura 3. Hieff UNICON™ Pré-mistura Universal Blue pode distinguir com precisão diferenças na concentração do molde de 2 vezes. O molde usado foi uma diluição de gradiente de 2 vezes de 2 µL de solução estoque de cDNA 293T, amplificando o gene GAPDH.
4. Boa reprodutibilidade de poços duplicados: 90 poços duplicados
Figura 4. Hieff UNICON™ A pré-mistura Universal Blue exibe excelente reprodutibilidade, com as curvas de amplificação de 90 poços duplicados mostrando alta coincidência e um desvio padrão de valores de Ct de menos de 0,2. Usando 1 µL de cDNA 293T como molde, o gene GAPDH foi amplificado.
5.Boa estabilidade: a pré-mistura permanece inalterada no desempenho de amplificação mesmo após ser congelada e descongelada 50 vezes
| Ciclos de congelamento e descongelamento | 0 vez | 10 vezes | 30 vezes | 50 vezes |
| Ct médio | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
| ▲Ct | - | 0,06 | 0,07 | 0,14 |
Figura 5. Hieff UNICON™ A pré-mistura Universal Blue não mostra nenhuma alteração no desempenho de amplificação após ser congelada e descongelada 50 vezes. Usando 1 µL de cDNA 293T como molde, o gene C2orf68 foi amplificado com pré-mistura que passou por diferentes números de ciclos de congelamento-descongelamento.
Cliente Fretorno
Fonte da amostra: Linhagem de células de câncer de ovário de camundongo ID8, HM1
Fonte da amostra: RNA adiposo epididimal de camundongo
Fonte da amostra: RNA da folha de Arabidopsis thaliana
Literatura com alto fator de impacto parcialmente publicada usando YEASEN qPCR Mix
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