HiActi™ Citocinas validadas em organoides cultivados

Em 2021, os organoides serão listados como um projeto-chave do plano nacional de pesquisa e desenvolvimento "14th Five-Year Plan". Os organoides estão em alta, e a maneira de obtê-los também se tornou o foco das atenções. Diferentes organoides requerem diferentes citocinas durante a cultura. Ao adicionar citocinas que promovem ou inibem vias de sinalização específicas, as células-tronco podem ser diferenciadas em organoides desejados. O protocolo de cultura de citocina mais clássico na cultura de organoides é o WNER (respectivamente: Wnt-3a, Noggin, EGF e R-Spondins), e a combinação de aumento ou diminuição desses 4 fatores pode ser aplicada a quase todos os experimentos de cultura de organoides.

Citocinas comumente usadas em cultura organoide

R-Espodino 1

Função: R-Spodin 1 pertence à família Rspo de reguladores Wnt, que inclui 4 membros, a saber, Rspo1-4. Esta família é um fator microambiental que mantém células-tronco adultas em múltiplos órgãos. RSPO1 é uma proteína ativadora secretada. Rspo-1 é expressa em certas regiões do sistema nervoso central em desenvolvimento e também é encontrada na glândula adrenal, ovário, testículo, tireoide e traqueia.

Como um ativador da via de sinalização Wnt, Rspo1 desempenha um papel em muitos aspectos ao aumentar a sinalização Wnt. É um meio de crescimento comumente usado para organoides epiteliais gástricos, organoides do intestino delgado e cólon, organoides do fígado, organoides da próstata, organoides pancreáticos e organoides da mama. fator.

Wnt-3a

Função: Wnt-3a pertence à família Wnt de proteínas de sinalização e desempenha um papel importante na manutenção da integridade dos tecidos embrionários e adultos. A família Wnt é altamente conservada e rica em cisteína. Wnts mediam a via de sinalização Wnt ligando-se a receptores de membrana celular e/ou ligando-se a receptores de membrana celular adjacentes. A via de sinalização Wnt pode ser dividida em via canônica e via não canônica, uma está envolvida na via de sinalização canônica mediada por β-catenina, incluindo Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b e Wnt10a; a outra não é Vias de sinalização não canônicas dependentes de β-catenina, incluindo Wnt4, Wnt5a, Wnt6 e Wnt11. Como a proteína de sinalização mais representativa da família Wnt, a Wnt3a é amplamente distribuída e desempenha um papel fundamental na regulação das funções celulares pleiotrópicas, incluindo autorrenovação, proliferação, diferenciação e motilidade.

FEG

Função: O EGF é um potente fator de crescimento que estimula o desenvolvimento epitelial múltiplo, angiogênese, inibição da secreção de ácido gástrico, proliferação de fibroblastos e formação de colônias de células epidérmicas em cultura. O EGF é um membro fundador da família EGF, que também inclui TGF-α, duas proteínas reguladoras (AR), proteína de célula β (BTC), proteína epidérmica (EPR), fator de crescimento semelhante ao EGF de ligação à heparina (HB-EGF), epiproteínas e neuregulinas (NRG1-6). Fisiologicamente, o EGF existe em vários fluidos corporais, incluindo sangue, leite, urina, saliva, sêmen, suco pancreático, líquido cefalorraquidiano e líquido amniótico. O EGF é um ligante de alta afinidade para o receptor EGF (ErbB). O EGF se liga e induz a dimerização do receptor EGF, levando à ativação da via de sinalização da proteína tirosina quinase, transduzindo assim o sinal da família EGF.

Cabeça

Função: Noggin pode inibir ligantes da família TGF-β e impedir que eles se liguem aos receptores correspondentes.Noggin foi originalmente descoberto como um antagonista de BMP-4 e então foi mostrado para modular a atividade de outras BMPs (BMP-2, 7, 13 e 14). Noggin é altamente conservado entre vertebrados. Proteínas Noggin secretadas regulam a atividade de proteínas morfogenéticas ósseas durante o desenvolvimento. Papel do antagonista de sinalização de BMP Noggin no desenvolvimento de metástases ósseas osteolíticas de câncer de próstata.

bFGF/FGF-2

Função: bFGF, um membro da superfamília FGF de proteínas mitogênicas. É um fator quimiotático e mitogênico altamente específico para muitos tipos de células e parece estar envolvido na remodelação de tecidos danificados, como cicatrização de úlceras, reparo vascular, lesão cerebral traumática. bFGF é um componente importante do meio de cultura de células-tronco embrionárias humanas. Além disso, a proteína bFGF é uma proteína catiônica de ligação à heparina envolvida em várias condições patológicas, incluindo angiogênese e o crescimento de tumores sólidos. Portanto, bFGF é considerado um alvo para quimioprevenção do câncer e estratégias terapêuticas. bFGF é frequentemente usado como um componente importante do meio de cultura de células, como meio de cultura de células-tronco embrionárias humanas, sistema de cultura sem soro.

FGF-10

Função: O fator de crescimento de fibroblastos 10 (FGF-10) é um fator de crescimento de ligação à heparina que pertence à família FGF. Proteínas dessa família desempenham papéis centrais no desenvolvimento pré-natal, crescimento pós-natal e regeneração de vários tecidos, promovendo proliferação e diferenciação celular. O FGF-10 é secretado por células mesenquimais e se liga ao FGF-BP extracelular, o FGF-10 se liga e ativa preferencialmente o FGF R2 epitelial (IIIb) e interage fracamente com o FGF R1 (IIIb).

Pqsistema de gestão de qualidade de HiActi™ citocina

Sistema de Gestão da Qualidade

• Certificadas pela ISO 13485:2016, as citocinas são fabricadas por meio de um processo de produção ultralimpo totalmente fechado para garantir a limpeza e a estabilidade das proteínas.
• Cumprir o sistema de “Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos”
• Tenha um Certificado de Aprovação de Qualidade (COA)
• Tecnologia asséptica e filtração de esterilização secundária
• Base de produção de matéria-prima de produtos farmacêuticos

Gestão de Garantia de Qualidade

• Pessoa especial é responsável pelo sistema de treinamento de pessoal de gestão
• Estabelecer procedimentos de manutenção e calibração de equipamentos
• Sistema de gestão de matérias-primas e fornecedores
• Registros completos de produção de lote, registros de inspeção de lote, registros de embalagem, etc.
• Os registros de documentos de qualidade foram auditados e inspecionados pelo QA
• Registros completos de produção e inspeção de lotes
• Validação de métodos analíticos

Sistema de Controle de Qualidade

• Cumprir a terceira regra geral da edição de 2020 da Farmacopeia da República Popular da China: controle de qualidade de matérias-primas e excipientes para a produção de produtos biológicos

Validação de cultura organoide

Yeasen citocinas foram verificadas em organoides tumorais humanos, como câncer de pulmão, câncer cervical, câncer de ovário, câncer de pâncreas e câncer intestinal, e organoides normais, como organoides do intestino delgado humano e de camundongo.

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