Descrição
A RNA polimerase T7 usa DNA fita dupla contendo a sequência promotora T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') como molde e NTPs como substratos para sintetizar RNA complementar à fita reversa de DNA a jusante do promotor. Tanto o DNA fita dupla linear com extremidades rombas ou saliências 5' podem servir como substratos molde para a RNA polimerase T7, o que significa que plasmídeos linearizados ou produtos de PCR podem ser usados como moldes para síntese de RNA in vitro.
Este kit emprega um princípio de ensaio imunoenzimático sanduíche (ELISA) para detectar a RNA polimerase residual de T7. Os padrões de RNA polimerase de T7 e as amostras de teste são adicionados a poços de microplacas pré-revestidos com anticorpos anti-RNA polimerase de T7 (36705-A). Anticorpos de detecção de RNA polimerase de T7 marcados com biotina diluída (36705-C) são então adicionados, seguidos por Estreptavidina-HRP (SA-HRP) (36705-D), formando um complexo anticorpo + antígeno + anticorpo-biotina + SA-HRP. Após a lavagem, o substrato TMB (36705-H) é adicionado para o desenvolvimento da cor. O TMB é catalisado por HRP para fazer a transição de incolor para azul e finalmente para amarelo após a adição da solução de parada (36705-I). A intensidade da cor amarela é positivamente correlacionada com a quantidade de RNA polimerase de T7 detectada na amostra.
Componentes
| Não. | Nome | 36705ES48 | 36705ES96 |
| 36705-A | Tiras de microtitulação revestidas com RNA polimerase anti-T7 | 48 E | 96 T |
| 36705-B* | Padrão: T7 RNA Polimerase | 1 frasco | 2 frasco |
| 36705-C | Detecção Anticorpo：Biotina-conjugado Anticorpos | 60 μL | 120 μL |
| 36705-D | Estreptavidina-HRP | 30 μL | 60 μL |
| 36705-E | Tampão de diluição 1 | 25 mL | 45 mL |
| 36705-F | Tampão de lavagem concentradotaxa (20×) | 25 mL | 50 mL |
| 36705-G | Tampão de diluição 2 | 15 mL | 30 mL |
| 36705-H | Substrato TMB | 8 mL | 15 mL |
| 36705-I | Parar solução | 5 mL | 10 mL |
| 36705-J | Selador de placas | 3 cada | 5 cada |
*O padrão 36705-B é um pó liofilizado.
Compatível com T7 RNA Polimerase: 10625, 10628 e 10629.
Dados de validação
Tabela 1. Faixa de linearidade: 1~32 ng/mL ，R2=0,999 ，CV≤5%。
| Padrão | Conc.（ (ng/mL) | MÉDIA（ (ng/mL) | Recuperação（%） | CV% |
| Padrão 1 | 32 | 31.965 | 99,9% | 2,2% |
| Padrão 2 | 16 | 16.070 | 100,5% | 5,0% |
| Padrão 3 | 8 | 7.812 | 97,7% | 2,1% |
| Padrão 4 | 4 | 4.192 | 104,8% | 0,8% |
| Padrão 5 | 2 | 2.020 | 101,8% | 3,5% |
| Padrão 6 | 1 | 1.173 | 117,3% | 0,0% |
| NC | 0 | / | / | / |
Tabela 2. Alta especificidade
| Nome da proteína | Conc. | Detectado ou não |
| Positivo Ccontrole | 1 ng/mL | Detectado |
| Nãonegativo Ccontrole | 0 ng/mL | e |
| UltraNuclease | 10 μg/mL | e |
| Sal UltraNuclease Ativo | 10 μg/mL | e |
| DNase EU | 10 μg/mL | e |
| Inibidor de RNase murina | 10 μg/mL | e |
| Enzima de encapsulamento de vacínia | 10 μg/mL | e |
| Pirofosfatase Inorgânica | 10 μg/mL | e |
| mRNA Cap 2 ´-O-Metiltransferase | 10 μg/mL | e |
| 1%BSA | 10 eug/ml | e |
Tabela 3. LOQ: O limite de quantificação para este produto é determinado pela diluição do ponto de concentração mais baixo da curva padrão, onde o coeficiente de variação (CV) na concentração mais baixa é menor que 20%. Isto é definido como o limite de quantificação, que é 1 ng/mL.
| Std6 valor teórico (ng/ml) | Valor médio do teste padrão 6 (ng/ml) | Erepetições est | CV% | Recuperação |
| 1 | 0,858 | 24 | 12,6% | 85,8% |
Tabela 4. LOD: O limite de detecção deste produto é definido como a concentração padrão correspondente ao valor médio de detecção do controle negativo (NC) mais duas vezes o desvio padrão. Medindo 24 padrões NC, calculando a média e o desvio padrão, o limite de detecção é determinado como 0,318 ng/mL.
| Valor médio（DO） | DP（DO） | Valor médio +2DP (OD) | Valor médio +2DP (ng/mL) |
| 0,0527 | 0,0038 | 0,0604 | 0,3176 |
Envio e armazenamento
Armazene a 2-8°C. O prazo de validade é de 1 ano quando fechado e 6 meses após aberto.
Ao receber o produto, verifique se todos os componentes estão completos e armazene-os imediatamente na temperatura de armazenamento correspondente.
Pagamento e segurança
Suas informações de pagamento são processadas com segurança. Não armazenamos detalhes do cartão de crédito nem temos acesso às informações do seu cartão de crédito.
Investigação
Você também pode gostar
Perguntas frequentes
O produto é apenas para fins de pesquisa e não se destina ao uso terapêutico ou diagnóstico em humanos ou animais. Os produtos e o conteúdo são protegidos por patentes, marcas registradas e direitos autorais de propriedade da
Certos aplicativos podem exigir direitos adicionais de propriedade intelectual de terceiros.