Инструмент захвата антител: легко обрабатывать IP и Co-IP с агарозой белка A/G и магнитными шариками

Белок A и белок G являются золотым стандартом белков для аффинной очистки антител и иммунопреципитации (IP). Благодаря ковалентному связыванию как белка A, так и белка G с агарозными или магнитными шариками, эти инструменты предлагают более широкий диапазон связывания по сравнению с шариками только с одним типом белка, что повышает их универсальность. Кроме того, белок A и белок G, используемые в этих продуктах, генетически модифицированы для сохранения их высокого сродства к иммуноглобулинам (Ig), устраняя при этом непервичные связывающие домены, тем самым уменьшая неспецифические взаимодействия.

Таблица 1: Сравнение агарозных гранул белка A/G и магнитных гранул

rБелок Агароза A/G Смола

Белок A/G MagBeads

Матрица

Высокосшитые 4% агарозные микросферы

Магнитные шарики на основе кремния

Размер частиц

45-165 мкм

200 нм

Емкость

>20 мг hIgG/мл смола

>0,7 мг hIgG/мл магнитные шарики

Преимущества

Простота использования, не требуется вспомогательного оборудования

Простое управление

Большой размер пор, сильная связывающая сила

Маленький диаметр, хорошая кинетика

Высокий выход целевого белка

Гладкая поверхность, минимальная адсорбция гранул, низкий фоновый уровень, меньший расход антител

Недостатки

Пористый и склонный к адсорбции (требуется предварительная очистка)

Удобно использовать с магнитной стойкой

Применение продукта

1. Очистка антител

Выделение высокочистых антител из сыворотки или асцитической жидкости за один этап.

2. Иммунопреципитация (ИП)

Обогатить специфический белокс изучить его характеристики (например, посттрансляционные модификации).

3. Коиммунопреципитация (Co-IP)

Обогатить цель белок в расследовать другие белки, которые связываются с ним (т. е. белок-белковые взаимодействия, белковые комплексы и т. д.).

Процедура операции

Тестовые данные

1. Очистка антител из сыворотки кролика с использованием гБелок А/Г Агароза Смола.

Figure 1. Electrophoresis result of antibody purification using rProtein A/G Agarose Resin

М: Белковый маркер

Л: Образец сырой нефти перед колонкой

элу: Элюирование

Рисунок 1. Результат электрофореза очистки антител с использованием гБелок А/Г Агароза Смола.

2. Эксперимент по конъюгации антител с Белок А/Г Магбеды

Figure 2. Yeasen Protein A/G Magbeads outperformed Competitor magnetic beads.

1: НК

2: Yeasen Белок A/G Magbeads

3: Yeasen Белок A/G Magbeads

4: Конкурент

Фигура 2. Yeasen Белок А/Г Мagbeads превзошли Конкурент магнитные бусины.

3. Использование протеина A/G Магбэадс для ИС

Figure 3. Yeasen Protein A/G Magbeads outperformed Competitor magnetic beads.

Целевой белок

1: НК

2: Yeasen Белок A/G Magbeads

3: Yeasen Белок A/G Magbeads

4: Конкурент

Фигура 3. Yeasen Белок А/Г Мagbeads превзошли Конкурент магнитные бусины.

4. Использование протеина A/G Магбэадс для Co-IP: специфические антитела против p65 и циклинзависимой киназы 9 (CDK9) используются для иммунопреципитационного анализа извлеченного общего клеточного белка.

Figure 4. Immunoprecipitants were then subjected to western blot analysis using specific antibodies against CDK9 and p65.

Фигура 4. Затем иммунопреципитаты подвергали вестерн-блот-анализу с использованием специфических антител против CDK9 и p65.

Информация о продукте

Название продукта

Номер продукта

Спецификация

Белок A/G Magbeads

36417ES03/05

1 мл/5 мл

rПротеин A/G Агароза Смола

36403ES08/25/60

5 мл/25 мл/100 мл

Сопутствующие товары

Название продукта

Номер продукта

Спецификация

СуРи рПротеин А Агароза Смола

36401ЭС08/25/60

5 мл/25 мл/100 мл

гБелок G Агароза Смола

36405ЭС08/25/60

5 мл/25 мл/100 мл

Расследование