Isotermisk nukleinsyraamplifieringsteknologi kan delas in i många kategorier enligt olika amplifieringsprinciper. För närvarande är den vanligaste och mest använda den loop-medierade isotermiska amplifieringsteknologin (LAMP) utvecklad av den japanska forskaren Notomi et al. år 2000. Bst DNA-polymeras är kärnenzymet i isotermisk amplifieringsteknologi. Vilken funktion och prestanda har Bst DNA-polymeras i LAMP?

1. Hur spelar Bst DNA-polymeras en roll i LAMP?
2. Vad är lyofiliserat Bst Plus DNA-polymeras?
3. Vad är produktens egenskaper Lyofiliserad Bst Plus DNA Polymeras (14405ES)?
4. Vad är produktens prestanda för Lyophilized Bst Plus DNA Polymeras (14405ES)?
5. Relaterade produkter
6. Angående läsning

1. Hur spelar Bst DNA-polymeras en roll i LAMP?

Den tekniska egenskapen hos LAMP är att designa fyra primrar för sex regioner av målgenen och utföra amplifieringsreaktionen med BST DNA-polymeras under konstant temperatur på 60 ~ 65 ℃, vilket uppnår 109-1010 gånger amplifiering inom 15-60 minuter. Bst DNA-polymeras har stark termisk stabilitet, strängförskjutningsaktivitet och polymerasaktivitet. Det kan vara en snabb, effektiv och specifik amplifieringsmall under konstanta temperaturförhållanden utan PCR-termisk denatureringsamplifieringscykel och slutföra hela LAMP-experimentet inom 1 timme.

2. Vad är lyofiliserat Bst Plus DNA-polymeras?

Lyofiliserat Bst Plus DNA-polymeras används för att frysa glycerolfritt Bst Plus DNA-polymeras, vilket löser problemet med glycerolfritt Bst-enzyminstabilitet. Samtidigt har denna produkt stark 5 '- 3' DNA-polymerasaktivitet, strängförskjutningsaktivitet och dUTP-tolerans, vilket är mer lämpligt för den isotermiska amplifieringsreaktionen mot föroreningar. Det är bekvämt för kunder att använda vid produktion av frystorkade produkter.

Figur 1: 14405ES-lyofiliserat Bst Plus DNA-polymeras (60 U/μL, glycerolfri)

3. Vad är produktens egenskap hos Lyophilized Bst Plus DNA Polymeras (14405ES)?

• Det glycerolfria enzymet, lämpligt för lyofilisering
• Transportera vid normal temperatur för att minska kostnaderna
• Stark strängförskjutningsaktivitet, känslig och stabil
• Snabb återupplösning och bekväm drift

4. Vad är produktens prestanda för Lyophilized Bst Plus DNA Polymeras (14405ES)?

4.1 Frystorkat pulverform: jämfört med T0-momentet förblir pulvrets form oförändrad efter 45 ℃ - 15 DAGAR frystorkning.

Figur 2. Frystorkat pulverform

4.2 stabilitet

Prestanda för frystorkat pulver efter termisk acceleration kan fortfarande överensstämma med det för flytande reagens, och frystorkat pulver (14405ES) är
universell och kan användas för fluorescerande färgmetoden och pH-indikatormetoden.

4.2.1 Fluorescerande färgämnesmetod——stabilitet

I RT-LAMP fluorescerande färgämnesförstärkningssystemet överensstämmer prestandan för glycerolfritt Bst frystorkat pulver efter T0, 45 ℃-7 dagar och 45 ℃ -15 dagars värmeacceleration med den för den flytande versionen av glycerolfritt Bst-enzym, och NTC toppar inte.

Experimentella förhållanden:

Obs: Kontrollgruppen är en flytande version utan glycerol Bst-enzym med samma koncentration.

Figur 3. Stabilitetsresultat

4.2.2 Fluorescerande färgämnesmetod——Bst-enzymets prestanda efter frystorkning av RT-LAMP-systemet

I RT-LAMP fluorescerande färgämnesförstärkningssystemet var produktprestandan för glycerolfritt Bst frystorkat pulver frystorkat i RT-LAMP-systemet efter 45 ℃ - 15 dagar i överensstämmelse med den för den flytande versionen av glycerolfritt Bst-enzym. Detektionshastigheten för produkten i kontrollgruppen och RT-LAMP-systemet efter frystorkning var 100 % (16/16) respektive 94 % (15/16).

Experimentella förhållanden:

Obs: Kontrollgruppen är en flytande version utan glycerol Bst-enzym med samma koncentration.

Figur 4. Prestanda för Bst-enzym efter frystorkning av RT-LAMP-systemet

4.2.3 PH-indikatormetod ——Stabilitet

I RT-LAMP pH-indikatorförstärkningssystemet, jämfört med T0-tiden, var detektionshastigheten för Bst frystorkat pulver 88 % (7/8) efter 45 ℃ - 15 dagars värmeacceleration.

Experimentella förhållanden:

Obs: Kontrollgruppen är en flytande version utan glycerol Bst-enzym med samma koncentration.

Figur 5. Stabilitetsresultat

4.2.4 PH-indikatormetod——Återfrysningsstabilitet

I RT-LAMP pH-indikatorförstärkningssystemet är prestandan stabil efter 45 ℃ - 7 dagars återfrysning. Kontrollgruppen är flytande Bst-enzym. Jämfört med kontrollgruppen är detektionshastigheten för 14405ES efter termisk acceleration 94 % (30/32).

Experimentella förhållanden:

Obs: Kontrollgruppen är en flytande version utan glycerol Bst-enzym med samma koncentration.

Figur 6. Resultat vid återfrysningsstabilitet

4.3 Specificitet

I RT-LAMP fluorescerande färgämnesförstärkningssystemet toppade inte 48-brunnars NTC och specificiteten för 14405ES var 100 %.

Experimentella förhållanden:

Obs: Kontrollgruppen är en flytande version utan glycerol Bst-enzym med samma koncentration.

Figur 7. Specifika resultat

5. Relaterade produkter

De relaterade produkterna som Yeasen kan tillhandahålla visas i tabell 1.

Tabell 1.Relaterade produkter

6. Angående läsning

Att välja rätt nyckelenzymråmaterial för att göra LAMPA /RT-LAMP känsligare och snabbare!

Riktlinjen för val av omvänt transkriptas

YEASEN UDG: "antifouling-experten" i PCR-reaktioner