Under de senaste åren, med den snabba utvecklingen av bioläkemedel och framväxten av cell- och genterapier samt mRNA-vacciner under pandemin, har säkerställandet av säkerheten och tillförlitligheten för biologiska produkter blivit ett centralt fokus och regulatorisk prioritet för regeringar och tillsynsorgan över hela världen. Mykoplasma är en vanlig men ofta svår eliminerad typ av kontaminering. För bioprocesser som involverar cellodling kräver bestämmelser att "det inte får finnas någon mykoplasmakontamination.
Poäng för Mycoplasma-testning som krävs av tillsynsorgan
2.1 Korsreaktivitet:
DNA från 14 stammar av icke-flexibakteriella phyla och 6 teknikceller som vanligtvis används inom biomedicin valdes ut, och ingen av målkanalerna nådde sin topp och den interna referensen amplifierades normalt.
| Test Sarter | |
| Staphylococcus epidermidis | Pseudohyfer |
| Clostridium perfringens | Salmonella enterica Enteritidis subsp. enterica |
| Clostridium acetobutylicum | Bacillus subtilis (bacillus subtilis) |
| Acinetobacter baumannii (orörliga bakterier) | Bacillus cereus |
| Lactobacillus acidophilus | HEK293 |
| Enterobacter aerogenes (taxonomisk klass av bakterier) | Vero |
| Micrococcus garciniae | CHO |
| streptokocker mutans | E.coli |
| Pseudomonas aeruginosa | HEK293T |
| Streptococcus pneumoniae | Sf9 |
2.2 Några av uppgifterna är följande:
- Detektion Limitera
Nukleinsyraextraktion och detektion av 10CFU/ml Mycoplasma-standardstammar utfördes enligt instruktionerna för standardstammarna och extraktions- och detektionssatserna.
NCS- och NTC-proverna testades samtidigt i varje experiment, och resultaten av 24 replikatbrunnar med 10CFU/ml prover av varje stam uppfyllde kravet att ≥23 av de 24 testerna var positiva när NCS- och NTC-resultaten var tillfredsställande.
Tabell 1 Information om validerade stammar
| Serienr. | Mycoplasma namn | Koncentration av bakteriell vätska |
| 1 | Mycoplasma arginini | 10 CFU/ml |
| 2 | Mycoplasma orale | 10 CFU/ml |
| 3 | Mycoplasma gallisepticum | 10 CFU/ml |
| 4 | Mycoplasma pneumoniae | 10 CFU/ml |
| 5 | Mycoplasma synoviae | 10 CFU/ml |
| 6 | Mycoplasma fermentans | 10 CFU/ml |
| 7 | Mycoplasma hyorhinis | 10 CFU/ml |
| 8 | Akoleplasma laidlawii | 10 CFU/ml |
| 9 | Spiroplasma citri | 10 CFU/ml |
| 10 | Mycoplasma salivarium | 10 CFU/ml |
Tabell 2 Detektionsgränsresultat
| 10 CFU/ml | Experiment 1 | Experiment 2 | Experiment 3 |
| Detektionshastighet | 8/8 | 8/8 | 8/8 |
| Total | 24/24 | ||
Produktinformation
| Produkt | Katalognummer | Produktnamn | produktspecifikation |
| Prov förbehandlingssats | 18461ES | 25T/100T | |
| 18467ES | MolPure® Mag48 provberedningssats FN | 3×16T/ 6×16T | |
| Nukleic syraextraktionsinstrument | 80511ES | 48-kanals automatisk nukleinsyraextraktor | 48 Kanal |
| Mycoplasma Detection Kit | 40619ES | 25T/100T |