Moloney Murine Leukemia Virus (M-MLV) omvänt transkriptas är ett av de vanligaste omvända transkriptaserna i molekylärbiologiska laboratorieprocedurer. För att uppnå högre omvänd transkriptionseffektivitet, bättre termisk stabilitet och en ökad hastighet av cDNA-syntes, är det ursprungliga omvända transkriptaset ofta genetiskt modifierat. För närvarande kräver de omvänd transkriptionsreagens som finns på marknaden typiskt reaktionstider som sträcker sig från 15 till 30 minuter, vilket är relativt långa. När antalet reaktionsprov är stort kan den totala tidsåtgången öka dramatiskt. YESSEN befintliga 5-minuters omvänd transkriptionsserieprodukter kan slutföra omvänd transkriptionsprocessen på bara 5 minuter, vilket sparar tid och är mycket effektivt.

Pprodukt Ppositionering	Produktnamn	Katt#
Snabb, effektiv och högavkastande omvänd transkriptionspremix	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR	11156ES
Snabb, effektiv och högavkastande omvänd transkriptionspremix (med gDNA-borttagning)	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (DNA digester plus)	11155ES
Snabbt ettstegsavslut av gDNA-borttagning och omvänd transkriptionspremix	Hifair™ AdvanceFast One-steps RT-gDNA Digestion SuperMix för qPCR	11151ES
Flexibelt Primer Selection Rapid Reverse Transcription Kit (med gDNA-borttagning)	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (ingen färgämne)	11150ES
Flexibelt Primer Selection Rapid Reverse Transcription Kit (med gDNA-borttagning och spårningsfärg)	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit	11149ES

Boutiquerekommendation ett

Snabb, effektiv och högavkastande omvänd transkriptionspremix (med gDNA-borttagning) (Katt #11155ES)

Högt utbyte av omvänd transkription från olika mallar

Prov	293T Cell	Arabidopsis thaliana	Mus	Fisklever
11155ES	23,4↓	19,6↓	24,9↓	21.1↓
Märke A	24.9	21.3	27.5	21.3
Märke B	26.1	20.5	27.1	23.1
Märke C	25.7	19.8	27.3	21.9
Märke D	24.3	21.3	28.1	24.5

Figur. Omvänd transkription utfördes med användning av RNA-mallar från humana 293T-celler, Arabidopsis thaliana, muslever och fisklever. Varumärkena A, B, C och D är alla tvåstegs digestion omvänd transkriptionsreagens med varierande omvänd transkriptionstid från 15 till 20 minuter. Testresultaten visar att Hifair 11155ES 5-minuters omvänd transkriptionskit utmärker sig med högre avkastning jämfört med andra märken, och Ct-värdena är lägre.

Boutiquerekommendation två

5-minuters enstegssmältning och omvänd transkriptionspremix (Katt #11151ES)

Högt utbyte av omvänd transkription

Figur. Med användning av humant 293T-cell-RNA som mall testades tre gener respektive. Varumärkena A, B och C är alla ettstegs-gDNA-borttagnings- och omvänd transkriptionsreagens. Testresultaten visar att med en inmatning av 1 μg och 10 ng Total RNA, är utbytet av omvänd transkription med 11151ES-kitet överlägset andra märken, med mindre Ct-värden.

Figur. Genom att använda Arabidopsis thaliana RNA som mall, är varumärkena A, B och C alla ettstegs gDNA-borttagnings- och omvänd transkriptionsreagens. Testresultaten visar att med en inmatning av 1 μg och 10 ng Total RNA, är utbytet av omvänd transkription med 11151ES-kitet överlägset andra märken, med mindre Ct-värden.

Utmärkt känslighet

Figur. Genom att använda humant 293T-cell-RNA som mall amplifierades gener med 30% GC, 50% GC, 60% GC och 70% GC. Totala RNA-inmatningar på 100 pg, 1 ng, 10 ng, 100 ng och 1 μg användes för omvänd transkription följt av fluorescerande kvantitativ detektion. Resultaten visar att 11151ES kan ta emot omvänd transkription för RNA-inmatningar som sträcker sig från 100 pg till 1 μg.

Boutiquerekommendation Ttre

5-minuters snabb omvänd transkriptionskit(Katt #11149/11150ES)

Hög känslighet, med en lägsta detekteringsgräns ner till 10 pg

Figur. Med användning av totalt RNA från 293T-celler som mall utfördes omvänd transkription med 11149ES, och det resulterande cDNA:t utsattes för kvantitativ qPCR-analys. Resultaten visar att 11149ES framgångsrikt kan reversera transkribera RNA-inmatningar från 10 pg till 1 μg, vilket säkerställer korrekta kvantitativa resultat.

Bra amplifieringsprestanda, med den längsta amplifieringen av ett 14 kb fragment

Figur.Med användning av totalt RNA från 293T-celler som mall, utfördes omvänd transkription med 11149ES, och det resulterande cDNA:t utsattes för PCR-detektion. Resultaten indikerar att 11149ES har förmåga att syntetisera cDNA-fragment som sträcker sig från 1 kb till 14 kb i längd, med efterföljande PCR med vissa tillämpliga scenarier. Om direkt omvänd transkription av fragment över 10 kb krävs, rekommenderas att förlänga den omvända transkriptionstiden till 20-30 minuter för att säkerställa förvärvet av de slutliga fragmenten.

Jämförelse av omvänd transkriptionseffektivitet

RNA-inmatningsmängd	Ct-värde
	11149ES	Märke A
1 μg	15.2	15.5
100 ng	18,0	18.5
10 ng	21	21.7
1 ng	24.5	25.1
100 sid	29.1	29,7
10 sid	32,7	34.3

Figur. Med användning av totalt RNA från 293T-celler som mall, utfördes omvänd transkription med 11149ES och Brand A, med 11149ES som inte genomgick gDNA-borttagningssteget. Det resulterande cDNA:t utsattes för kvantitativ qPCR-analys. Resultaten visar att den omvända transkriptionstiden för varumärke A var 13 minuter, medan den för 11149ES var 5 minuter. Den kvantitativa analysen av olika produkter avslöjar att Ct-värdena för 11149ES är mindre eller liknande de för det konkurrerande varumärket, vilket indikerar att 5-minuters omvänd transkriptionseffektivitet för 11149ES är överlägsen eller ungefär likvärdig med den för varumärke A.

RNA-inmatningsmängd	Ct-värde
	11149ES	Märke B
1 μg	16.2	17.4
100 ng	19,0	20.5
10 ng	22	23.8
1 ng	26	27,9
100 sid	31.4	33.2
10 sid	32,9	35,6

Figur.Med användning av totalt RNA från 293T-celler som mall, utfördes omvänd transkription med 11149ES och Brand B, med 11149ES som inte genomgick gDNA-borttagningssteget. Det resulterande cDNA:t utsattes för kvantitativ qPCR-analys. Resultaten visar att den omvända transkriptionstiden för varumärke B var 20 minuter, medan den för 11149ES var 5 minuter. Den kvantitativa analysen av olika substratkvantiteter avslöjar att Ct-värdena för 11149ES är mindre eller liknande de för varumärke B, vilket indikerar att 5-minuters omvänd transkriptionseffektivitet för 11149ES är överlägsen eller ungefär likvärdig med den för varumärke B.

Rekommenderade relaterade produkter

Metod	Pprodukt Ppositionering	Produktnamn	Katt#
Färgämnesbaserad qPCR	Universell kvantitativ förblandning med hög specificitet (färgämnesbaserad)	Hieff UNICON™ avancerad qPCR SYBR Master Mix	11185ES
	Högkänslig universell kvantitativ premix (färgämnesbaserad)	Hieff UNICON™ Universal Blue qPCR SYBR Master Mix	11184ES
Omvänd transkription	5-minuters ettstegssmältning och omvänd transkriptionspremix (för qPCR)	Hifair™ AdvanceFast One-steps RT-gDNA Digestion SuperMix för qPCR	11151ES
	5-minuters snabb omvänd transkription, kapabel till upp till 14 kb cDNA-syntes, med gDNA-borttagning (för PCR/qPCR) - Tracer-version	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit	11149ES
	5-minuters snabb omvänd transkription, kapabel till upp till 14 kb cDNA-syntes, med gDNA-borttagning (för PCR/qPCR)	Hifair™ AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit（Inget färgämne）	11150ES
	Högkvalitativ första-strängs cDNA-syntespremix, med gDNA-borttagning (för qPCR)	Hifair™ III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix för qPCR (gDNA digester plus)	11141ES