ภาพรวม

Coelenterazine เป็นสารเรืองแสงจากธรรมชาติที่มีอยู่มากมายในธรรมชาติและเป็นโมเลกุลกักเก็บพลังงานแสงของสิ่งมีชีวิตเรืองแสงในทะเลส่วนใหญ่ (มากกว่า 75%) Coelenterazine สามารถใช้เป็นสารตั้งต้นสำหรับเอนไซม์ลูซิเฟอเรสหลายชนิด เช่น ลูซิเฟอเรสไตทะเล (Rluc) ลูซิเฟอเรสที่หลั่งจากเกาส์เซีย (Gluc) และโฟโตโปรตีนรวมถึงเอคัวรินและโอเบเลีย ซึ่งแตกต่างจากระบบลูซิเฟอเรส/ลูซิเฟอเรสของหิ่งห้อย ระบบ Coelenterazine/ลูซิเฟอเรสไม่ต้องการอะดีโนซีนไตรฟอสเฟต (ATP) ทำให้ศึกษาการเรืองแสงในสิ่งมีชีวิตได้ง่ายขึ้น ดังนั้น Coelenterazine จึงมักใช้เป็นสารตั้งต้นสำหรับการเรืองแสงสำหรับการทดสอบการเรืองแสงตามยีนรายงานและการทดสอบสัตว์มีชีวิต

Coelenterazine เชิงพาณิชย์หลักที่ใช้ในปัจจุบันคือ Coelenterazine ดั้งเดิม นอกจากนี้ยังมีอนุพันธ์ของ Coelenterin มากมาย เช่น Coelenterazine h, Coelenterazine 400a, Coelenterazine cp, Coelenterazine f, Coelenterazine hcp, Coelenterazine n equals ที่ถูกสังเคราะห์ขึ้น ในทางทฤษฎีแล้ว Coelenterins เหล่านี้สามารถใช้ในการทดลองเดียวกันได้ แต่เนื่องจากความแตกต่างในความยาวคลื่นแสง ความสามารถในการซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ และประสิทธิภาพควอนตัมแสง จึงแสดงผลการทดลองที่แตกต่างกันในแอปพลิเคชันเดียวกัน

สายพันธุ์ของโคเลนเทอราซิน

โคเอเลนเทอราซีน พื้นเมือง

เรียกอีกอย่างว่ากรดฟรีโคเอนเทอราซีน เป็นสารตั้งต้นของเอนไซม์ลูซิเฟอเรสหลายชนิด เช่น เรนิลลาลูซิเฟอเรส (Rluc) และเกาส์เซียลูซิเฟอเรส (Gluc) และยังเป็นโคแฟกเตอร์ของโปรตีนเรืองแสงของแมงกะพรุนอีกด้วย

สถานการณ์การใช้งาน: การตรวจจับความเข้มข้นของไอออนแคลเซียมในเซลล์ที่มีชีวิต การวิเคราะห์รายงานยีน การศึกษา BRET (การถ่ายโอนพลังงานเรโซแนนซ์ชีวภาพ) การตรวจจับระดับ ROS ในเนื้อเยื่อหรือเซลล์ด้วยวิธี ELISA, HTS และการเรืองแสงทางเคมี ฯลฯ

โคเอเลนเทอราซีน เอช

เป็นสารตั้งต้นของเอนไซม์ลูซิเฟอเรสหลายชนิด เช่น เรนิลลาลูซิเฟอเรส (Rluc) และเกาส์เซียลูซิเฟอเรส (Gluc) และยังเป็นโคแฟกเตอร์ของโปรตีนเรืองแสงของแมงกะพรุนอีกด้วย

สถานการณ์การใช้งาน: ความเข้มของการส่องสว่างสูงกว่า Coelenterazine Native มากกว่า 10 เท่า ซึ่งเหมาะสำหรับการวิเคราะห์ยีนรายงานและการตรวจจับความเข้มข้นของไอออนแคลเซียมในเซลล์ที่มีชีวิต

โคเอเลนเทอราซีน เอชซีพี

เป็นอนุพันธ์ตัวหนึ่งของ Coelenterazine Native ความเข้มข้นของฟลูออเรสเซนต์ของคอมเพล็กซ์ Coelenterazine hcp-Aequorin สูงกว่าคอมเพล็กซ์ Coelenterazine Native ถึง 190 เท่า โดยมีผลผลิตควอนตัมสูงและ Ca เร็ว²⁺ อัตราการเกิดปฏิกิริยาซึ่งเหมาะมากสำหรับการตรวจจับระดับไอออนแคลเซียม

สถานการณ์การใช้งาน: เหมาะสำหรับการตรวจจับระดับไอออนแคลเซียม

โคเอเลนเทอราซีน 400เอ

เรียกอีกอย่างว่า DeepBlue CTM เป็นอนุพันธ์ของ Coelenterazine Native เป็นสารตั้งต้นที่ดีสำหรับ Renilla luciferase (Rluc) และมีความยาวคลื่นการปล่อยประมาณ 400 นาโนเมตร ซึ่งรบกวนสัญญาณของโปรตีนตัวรับ GFP เพียงเล็กน้อย และไม่สามารถออกซิไดซ์โดย Gaussia secreted luciferase (Gluc) ได้

สถานการณ์การใช้งาน: เป็นสารตั้งต้น Coelenterazine ที่ต้องการสำหรับการวิจัย BRET (Bioluminescent resonance Energy Transfer)

โคเอนเทอราซีน เอฟ

เป็นสารตั้งต้นที่ต้องการสำหรับเอควอริน และความแตกต่างทางโครงสร้างเพียงอย่างเดียวจาก Coelenterazine Native ก็คือ กลุ่มไฮดรอกซิลบนกลุ่มฟีนอล R-1 ถูกแทนที่ด้วยฟลูออรีน (F)เมื่อเทียบกับจำนวนโฟตอนทั้งหมดที่ผลิตได้โดยคอมเพล็กซ์ Coelenterazine Native-Apoaequorin คอมเพล็กซ์นี้ผลิตพลังงานโฟตอนได้เพียง 80% เท่านั้น ข้อดีคือใช้เวลาน้อยมากในการสร้างสารเชิงซ้อนเอควอริน เมื่อสัมผัสกับ Ca²⁺มันเปล่งแสงอย่างรวดเร็วและให้ผลผลิตสูง โดยมีความเข้มข้นในการผลิตมากกว่า Coelenterazine Native ถึง 20 เท่า นอกจากนี้ยังมีการซึมผ่านเซลล์ได้ดี

สถานการณ์การใช้งาน: เมื่อ Ca สูงมาก²⁺ จำเป็นต้องมีความไวในการตรวจจับเพื่อศึกษาการทดลองการสร้างโปรตีนของแมงกะพรุน จึงแนะนำให้ใช้สารตั้งต้น

โคเอเลนเทอราซีน ซีพี

เป็นอนุพันธ์ของ Coelenterazine Native คอมเพล็กซ์โฟโตโปรตีนที่เกิดขึ้นจากโปรตีน Apoaequorin เรืองแสงได้มากกว่า Coelenterazine Native ถึง 15 เท่า และมี Ca ที่เร็วกว่า²⁺ อัตราการเกิดปฏิกิริยา

สถานการณ์การใช้งาน: สามารถใช้ในการคัดกรองยาที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนจี (GPCR) ในปริมาณสูง

โคเอนเทอราซีน น.

ความเข้มของการเรืองแสงจะอ่อนกว่าในอนุพันธ์ Coelenterazine ทั้งหมด และอัตราการเกิดปฏิกิริยากับ Ca²⁺ มีค่าต่ำกว่าของ Coelenterazine Native อย่างมาก

โคเอนเทอราซีน อี

อนุพันธ์ของ Coelenterazine Native ที่มีโครงสร้างเป็นหมู่เอทิลมากกว่า Coelenterazine Native หนึ่งหมู่ ในฐานะสารตั้งต้นสำหรับ Renilla luciferase ความเข้มข้นของการเรืองแสงจะสูงกว่า Coelenterazine Native 137% Coelenterazine e มีปฏิกิริยาในหลอดทดลองสูงกับโปรตีนเรืองแสงของแมงกะพรุนและมีค่าพีคการเปล่งแสงสองค่า (405 และ 465) ซึ่งทำให้สามารถกำหนด Ca ได้²⁺ ความเข้มข้นในช่วง pCa5-7 ตามอัตราส่วนของความยาวคลื่นคู่ วิธีนี้เป็นอิสระจากความเข้มข้นของ Coelenterazine จึงทำให้มีความแม่นยำในการตรวจจับที่ดีขึ้น เนื่องจากความสามารถในการซึมผ่านของเซลล์ของอนุพันธ์นี้ไม่ดี จึงไม่มีข้อได้เปรียบนี้สำหรับการทดลองที่เกี่ยวข้องกับภายในเซลล์

สถานการณ์การใช้งาน: สารตั้งต้นที่มีประโยชน์มากสำหรับ Ca²⁺ การตรวจจับความไวต่ำ

โคเอเลนเทอราซีน 2-เมทิล

เป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีประสิทธิภาพในเซลล์ สามารถออกฤทธิ์กับออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาภายในเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ เช่น ออกซิเจนซิงเกลต์และแอนไอออนซูเปอร์ออกไซด์ และความเครียดออกซิเดชันเป็นตัวกลางในกระบวนการอะพอพโทซิส นอกจากนี้ สารประกอบนี้ยังมีคุณลักษณะที่ไม่เป็นพิษและซึมผ่านเยื่อหุ้มเซลล์ได้ จึงสามารถใช้ในการศึกษาอะพอพโทซิสได้

การประยุกต์ใช้ผลิตภัณฑ์:

1) เป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาเรื่องอะพอพโทซิส

2) สามารถใช้ในการเรืองแสงเคมีเพื่อตรวจจับระดับแอนไอออนซูเปอร์ออกไซด์และแอนไอออนเปอร์ออกซินิไตรต์ได้

ชื่อสินค้า	น้ำหนักโมเลกุล	สูตรโมเลกุล	เอ็ม (nm)	อาร์แอลซี*	ความเข้มข้นสัมพันธ์	เวลาครึ่งขึ้น (มิลลิวินาที)**
โคเอเลนเทอราซีนพื้นเมือง	423.46		466	1.00	1	6-30
โคเอเลนเทอราซีน เอช	407.48		466	0.75	16	6-30
โคเอเลนเทอราซีน เอชซีพี	399.48		445	0.65	500	2-5
โคเอเลนเทอราซีน ซีพี	415.48		442	0.63	28	2-5
โคเอนเทอราซีน เอฟ	425.46		472	0.80	20	6-30
โคเอนเทอราซีน น.	457.52		468	0.25	0.15	6-30
โคเอนเทอราซีน อี	449.5		405 และ 465	0.5	4	0.15-0.3
2-เมทิลโคเอเลนเทอราซีน	331.37		-	-	-	-
โคเอเลนเทอราซีน 400 เอ	391.48		400	-	-	-

ข้อมูลสินค้า

ชื่อสินค้า	หมายเลขแคตตาล็อก	ข้อมูลจำเพาะ
ดี-ลูซิเฟอริน,เกลือโซเดียม	40901ES01/02/03/08	100มก./500มก./1ก./5ก.
ดี-ลูซิเฟอริน,เกลือโพแทสเซียม	40902ES01/02/03/09	100มก./500มก./1ก./5ก.
ดี-ลูซิเฟอริน หิ่งห้อย กรดฟรี	40903ES01/02/03	100มก./500มก./1ก.
โคเอเลนเทอราซีน พื้นเมือง	40904ES02/03/08	1×500 ไมโครกรัม/2×500 ไมโครกรัม/5 มก.
โคเอเลนเทอราซีน 400เอ	40905ES02/03	1×500 ไมโครกรัม/2×500 ไมโครกรัม
โคเอเลนเทอราซีน เอช	40906ES02/03/08	1×500 ไมโครกรัม/2×500 ไมโครกรัม/5 มก.
โคเอนเทอราซีน เอฟ	40908ES02/03	1×500 ไมโครกรัม/2×500 ไมโครกรัม

วรรณกรรมที่ตีพิมพ์จากผู้ใช้ (สถิติไม่สมบูรณ์)

1. Xie J, Zheng H, Chen S, Shi X, Mao W, Wang F. Rational Design of an Activateable Reporter for Quantitative Imaging of RNA Aberrant Splicing In Vivo. Mol Ther Methods Clin Dev. 2020;17:904-911. เผยแพร่เมื่อวันที่ 18 เมษายน 2020

2. Lin GY, Lin L, Cai XQ และคณะ แคมเปญคัดกรองประสิทธิภาพสูงระบุโมเลกุลขนาดเล็กที่กระตุ้นตัวรับเปปไทด์ในกลุ่มรีแล็กซิน 4 [เผยแพร่ออนไลน์ก่อนพิมพ์ 31 มีนาคม 2020] Acta Pharmacol Sin. 2020;10.1038/s41401-020-0390-x

3. Shao L, Chen Y, Zhang S, Zhang Z, Cao Y, Yang D, Wang MW. ผลของการปรับเปลี่ยน RAMP ต่อโปรไฟล์การส่งสัญญาณของกลุ่มตัวรับกลูคากอน Acta Pharmaceutica Sinica B.

4. Haifeng Zheng, Si Chen, Xinan Wang, Jinrong Xie, Jie Tian และ Fu Wang. Intron Retained Bioluminescence Reporter สำหรับการสร้างภาพแบบเรียลไทม์ของการตัดต่อพรีเอ็มอาร์เอ็นเอในสิ่งมีชีวิต. CAnal. Chem. 2019, 91, 12392−12398

5. Peiyu Xu, Sijie Huang, Chunyou Mao, ..., Xi Cheng, Yan Zhang, H. Eric Xu โครงสร้างของโดปามีน D3 receptor-Gi complexes ของมนุษย์2021, เซลล์โมเลกุล 81, 1147–1159

6. โมซวน จี, ซีหนาน หวาง, ไห่เฟิง เจิ้ง, เหวินเจี๋ย เหมา, เสี่ยวรุ่ยซี, ซือเฉิน, ชูถัง และฟู่ หวังซี ผู้สื่อข่าวลับสำหรับการติดตามเลือดของการตายของเซลล์ที่มีภาวะ pyroptotic ก้น เคมี.

7. F Hu, Y Zhang, Q Liu, Z Wang. PurA ช่วยให้ Edwardsiella piscicida หลบหนีการกระตุ้นการส่งสัญญาณ NF-κB ภูมิคุ้มกันของปลาและหอย 2022 - Elsevier

8. ไห่เฟิง เจิ้ง, ซีหนาน หวาง, ซือเฉิน, เซียวรุ่ยซี, จินหรงซี, เหวินเจี๋ยเหมา, เจียเทียน และฟู่หวาง การสร้างภาพชีวภาพเชิงการทำงานแบบเรียลไทม์ของการเปลี่ยนแปลงของ microRNA เฉพาะของเซลล์ประสาทในระหว่างการสร้างความแตกต่างของเซลล์ประสาทโดยใช้นักข่าวลูซิเฟอร์เรสคู่ เอซีเอส เคม. Neurosci.DOI: 10.1021/acschemneuro.8b00614