การตรวจหา ป้องกัน และกำจัดไมโคพลาสมา - ทั้งหมดในขั้นตอนเดียว!

ไมโคพลาสมา

ไมโคพลาสมาหรือที่เรียกอีกอย่างว่าไมโคพลาสมา เป็นโพรคาริโอตที่เล็กที่สุดและเรียบง่ายที่สุดที่ค้นพบในปัจจุบัน โดยมีเส้นผ่านศูนย์กลาง 0.1 ถึง 0.3 ไมโครเมตร สามารถผ่านตัวกรองได้และแสดงลักษณะหลายรูปร่าง เช่น ทรงกลม ทรงแท่ง ทรงเส้นใย และทรงกิ่ง ในห้องปฏิบัติการและการผลิตยาชีวเภสัช เซลล์เพาะเลี้ยงมีแนวโน้มที่จะปนเปื้อนไมโคพลาสมา ตามเอกสารระบุว่าอุบัติการณ์ของการปนเปื้อนไมโคพลาสมาในสายเซลล์ที่เก็บไว้อยู่ที่ประมาณ 15%-35% และในอุตสาหกรรมยาชีวเภสัช อยู่ในช่วง 0.44%-6.70% ^[1]-

รูปที่ 1: สัณฐานวิทยาของไมโคพลาสมา

ผลกระทบจากการปนเปื้อนของไมโคพลาสมา

การปนเปื้อนของแบคทีเรียและเชื้อราสามารถตรวจจับ ป้องกัน และกำจัดได้ค่อนข้างง่าย แต่การปนเปื้อนของไมโคพลาสมานั้นสังเกตได้ยาก แม้ว่าจะมีความหนาแน่นของการเจริญเติบโตสูงถึง 10^7-10^9 CFU/ml ก็อาจไม่มีอาการปนเปื้อนที่ชัดเจน (เช่น ความขุ่นหรือการเปลี่ยนแปลง pH) การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาสามารถนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงต่างๆ ในเซลล์ได้ (ดูรูปที่ 2)

Figure 2: Changes in Cell States After Mycoplasma Contamination

รูปที่ 2: การเปลี่ยนแปลงในสถานะเซลล์หลังจากการปนเปื้อนไมโคพลาสมา

สถานการณ์การใช้งานสำหรับการตรวจหาไมโคพลาสมา

Application Scenarios for Mycoplasma Detection

แหล่งที่มาทั่วไปของการปนเปื้อนไมโคพลาสมา

การปนเปื้อนข้ามระหว่างเซลล์
การปนเปื้อนของสภาพแวดล้อมการทำงานหรืออุปกรณ์การทดลอง
เทคนิคการฆ่าเชื้อที่ไม่ดีของผู้ทดลอง
การปนเปื้อนของอาหารเลี้ยงเชื้อหรือสารเคมีอื่น ๆ
การปนเปื้อนของเนื้อเยื่อหรืออวัยวะเดิมที่ใช้ในการเตรียมเซลล์

สิ่งที่ต้องทำเมื่อเซลล์เพาะเลี้ยงพบการปนเปื้อนไมโคพลาสมา

Figure 3: Total Solution for Mycoplasma Contamination

รูปที่ 3: สารละลายรวมสำหรับการปนเปื้อนไมโคพลาสมา

โซลูชันสามในหนึ่งสำหรับการปนเปื้อนไมโคพลาสมาในเซลล์

1. การตรวจหาเชื้อไมโคพลาสมา

การตรวจหาไมโคพลาสมาแบบไอโซเทอร์มอลขั้นตอนเดียว:

Yeasenรีเอเจนต์ตรวจจับไมโคพลาสมาแบบอุณหภูมิคงที่ขั้นตอนเดียวของ NGV ใช้เทคโนโลยีการขยายอุณหภูมิคงที่เฉพาะ ทำให้สามารถแยกแยะสีได้ชัดเจนยิ่งขึ้น ตั้งแต่สีน้ำเงินม่วง (ลบ) จนถึงสีฟ้าอ่อน (บวก) ทำให้ระบุสีได้ง่ายขึ้นด้วยสายตา รีเอเจนต์นี้มีส่วนประกอบป้องกันการปนเปื้อนเพื่อขจัดผลบวกปลอม

Figure 4: Operation Process of One-Step Mycoplasma Detection

รูปที่ 4: กระบวนการปฏิบัติการการตรวจหาไมโคพลาสมาแบบขั้นตอนเดียว

การตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้ PCR:

Yeasenวิธีการตรวจหาไมโคพลาสมาด้วย PCR ของ 's แตกต่างจาก PCR ขั้นตอนเดียวแบบเดิมโดยใช้ไพรเมอร์สามคู่แทนที่จะเป็นหนึ่งคู่ โดยกำหนดเป้าหมายที่บริเวณที่ได้รับการอนุรักษ์ 16S และ 23S ของไมโคพลาสมาสำหรับการขยาย PCR แบบซ้อน วิธีนี้ช่วยปรับปรุงความไวได้อย่างมากในขณะที่ลดความไม่จำเพาะ โดยตรวจจับได้น้อยถึงเพียงสำเนาเดียวของไมโคพลาสมา

Figure 5: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

รูปที่ 5: ภาพเจลอิเล็กโทรโฟรีซิสของการขยาย PCR ของตัวอย่างที่มีความเข้มข้นของไมโคพลาสมาต่างกัน

Figure 6: Gel Electrophoresis Image of PCR Amplification of Samples with Different Mycoplasma Concentrations

รูปที่ 6: ภาพเจลอิเล็กโทรโฟรีซิสของการขยาย PCR ของตัวอย่างที่มีความเข้มข้นของไมโคพลาสมาต่างกัน

ตารางที่ 1: ชนิดของไมโคพลาสมาที่ตรวจพบได้โดย Yeasenรีเอเจนต์ตรวจจับไมโคพลาสมาแบบไอโซเทอร์มอลขั้นตอนเดียว

ypes of Mycoplasma Detectable by Yeasen’s One-Step Isothermal Mycoplasma Detection Reagent

หมายเหตุ: ส่วนสีน้ำเงินระบุชนิดของไมโคพลาสมาที่ตรวจพบได้ทั้งด้วยวิธีการตรวจจับแบบไอโซเทอร์มอลขั้นตอนเดียวและวิธี PCR

2. น้ำยาขจัดไมโคพลาสมา MycAway (1000×)

MycAway Mycoplasma Elimination Reagent (1000×) เป็นสูตรผสมที่กำจัดไมโคพลาสมาได้อย่างมีประสิทธิภาพด้วยการยับยั้ง DNA และการสังเคราะห์โปรตีนที่จำเป็นสำหรับการเติบโตของไมโคพลาสมา โดยไม่ทำอันตรายต่อเซลล์ ช่วยกอบกู้เซลล์ของคุณได้สูงสุดและลดการสูญเสียอันเนื่องมาจากการปนเปื้อนของไมโคพลาสมา

Figure 6: Demonstration of Cell Elimination Effect

รูปที่ 7: การสาธิตผลการกำจัดเซลล์

คุณสมบัติของสารกำจัดไมโคพลาสมา:

ความเป็นพิษต่ำ: ความเป็นพิษต่อเซลล์ขั้นต่ำ ไม่ส่งผลต่อการทดลองเซลล์ในภายหลัง เช่น การทดสอบความสามารถในการมีชีวิตของเซลล์และการถ่ายโอนยีน
ความเสถียรสูง: สามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ -20°C ได้นานโดยยังคงประสิทธิภาพเหมือนเดิม
ง่ายต่อการใช้:เพียงเติมผลิตภัณฑ์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ปนเปื้อนไมโคพลาสมาและฟัก
ออกฤทธิ์เร็ว:เห็นผลได้ภายใน 3 วัน
สเปกตรัมกว้าง- มีประสิทธิภาพต่อไมโคพลาสมาชนิดต่างๆ ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่

รูปที่ 8: แผนภาพการทดสอบความเป็นพิษของเซลล์ของสารเคมีกำจัดไมโคพลาสมา

3. การป้องกันไมโคพลาสมา

ผลิตภัณฑ์ ข้อมูล

หมวดหมู่	ชื่อสินค้า	หมายเลขแมว	ข้อมูลจำเพาะ
การตรวจจับ	MycAway™ - ชุดตรวจหาไมโคพลาสมาแบบขั้นตอนเดียวสี	40612ES25/60	25/100 ตัน
	ชุดตรวจหา Mycoplasma แบบเรียลไทม์ qPCR MycAway™	40618ES25/60	25/100 ตัน
	ชุดทดสอบไมโคพลาสมา GMyc-PCR	40601ES10/20	ทดสอบ 10/20
การถอดถอน	สเปรย์ MycAway™ (พร้อมใช้งาน)	40605ES02/03	1/2×500 มล.
การถอดถอน	MycAway™ Treatment (1000×)-น้ำยาขจัดไมโคพลาสมา	40607ES03/08	1/5×1 มล.
การป้องกัน	MycAway™Prophylactic (2000×)-น้ำยาป้องกันไมโคพลาสมา	40608ES03/08	1/5×1 มล.
	MycGuard™ -1 โซลูชั่น (100×)	40609ES60	100 มล.
	โซลูชั่น MycGuard™-2 (500×)	40610ES60	100 มล.

บทความถัดไป

วิธีแก้ปัญหาการปนเปื้อน Mycoplasma