Biyoteknolojinin hızla ilerlemesi, in vitro RNA sentez teknolojisiyle üretilen mRNA aşılarının yaratılması yoluyla COVID-19 gibi bulaşıcı hastalıklarla mücadelede derin bir etki yarattı. Amerika Birleşik Devletleri'ndeki Moderna, Almanya'daki CureVac ve Almanya'daki BioNTech gibi çok sayıda şirket, yalnızca terapötik mRNA aşıları geliştirmekle kalmadı, aynı zamanda tümörler, bulaşıcı hastalıklar ve kronik rahatsızlıklar gibi durumlar için de tedaviler geliştirdi.
mRNA aşılarının araştırılması ve formülasyonu, başarılı bir şekilde geliştirilmelerini sağlamak için çeşitli ham maddeler gerektirir. Moleküler enzim endüstrisinde öncü bir güç olan Yeasen, gelişmiş moleküler enzim biyoteknolojisi ve büyük ölçekli protein fermantasyonu ve saflaştırma teknikleri aracılığıyla çeşitli moleküler enzimler ve reaktifler yaratmada başarıya ulaşmıştır.
Hem ürün kalitesini hem de üretim kapasitesini garantilemek için Yeasen, Wuhan'da yıllık kapasitesi 5 milyar üniteyi aşan endüstriyel ölçekli üretim gereksinimlerini tam olarak karşılayabilen GMP düzeyinde bir üretim tesisi kurdu. Ayrıca Yeasen, moleküler enzimlerin araştırma, geliştirme, üretim ve dağıtımı için ISO 13485 sertifikasını alan ilk Çin şirketidir. Bu sertifika, tüm reaktiflerinin kalitesini, tutarlılığını ve izlenebilirliğini garanti eder.
1. GMP'nin Avantajı
2. Yeasen GMP dereceli Ürünler sağlayabilir
3. Yeasen Birçok Ürün İçin DMF Numaraları Elde Etti
4. Yeasen ürünlerinin uygulama senaryoları
5. Yeasen tarafından sağlanan mRNA aşısı hazırlama hammaddeleri
6. Sipariş Bilgileri
1. GMP'nin Avantajı
"GMP sınıfı", Yeasen'in ISO 13485 sertifikalı tesislerde üretilen reaktifleri tanımlamak için kullandığı bir markalama terimidir. Yeasen'in GMP sınıfı reaktifleri, ISO 13485 kalite yönetim sistemi standartlarına uygun olarak ve daha sıkı proses kontrolleri ve eksiksiz dokümantasyon kayıtlarıyla üretilir. Yeasen yalnızca yüksek kaliteli reaktifler sunmakla kalmaz, aynı zamanda müşterilerimize belgeler, tesis denetimleri ve diğer destekleri de sağlayabilir.
Tablo 1. GMP'nin Avantajı
| Kalite Kontrolleri | Araştırma seviyesi | GMP dereceli |
| Hayvansız | Hayvansal kaynaklı materyal kullanılabilir | Gerektiğinde hayvan içermeyen sertifikalar sağlanabilir |
| Hücre bankası karakterizasyonu | Daha az katı | Sıkı (GMP yönetmeliklerine uygun) |
| Hammadde ve bitmiş ürün için izlenebilirlik bilgileri | Daha az katı | Sıkı (GMP yönetmeliklerine uygun) |
| Endotoksin düzeyi kontrolü | / | Sıkı |
| Steril kontrol | / | Sıkı |
| Üretim ve test için parti kayıtları | Daha az katı | Sıkı (Gerektiğinde toplu kayıtlar sağlanabilir) |
| İşlem doğrulama raporu | / | İstenildiği takdirde rapor sağlanabilir |
| Değişim kontrol sistemi | Öz değerlendirme | Sıkı (GMP yönetmeliklerine uygun) |
| Kalite yönetim sistemi | Öz değerlendirme | ISO 13485 sertifikası |
| DMF numarası | / | Evet (raporlama) |
2. Yeasen GMP dereceli Ürünler sağlayabilir
Enzim geliştirme ve endüstriyel ölçekli üretimde kapsamlı uzmanlık ve teknik mükemmellikten yararlanan Yeasen, "mRNAtools" olarak bilinen son teknoloji bir tesis kurdu. 50.000 fit karelik bu tesis, GMP düzenlemelerine uyuyor ve 2×1500L otomatik fermantasyon üniteleri, büyük ölçekli arıtma ekipmanı ve liyofilizasyon yetenekleri gibi son teknoloji özelliklere sahip. mRNAtools, müşteri üretimi ve düzenleyici gerekliliklerle uyumlu sıkı reaktifler sunmaya kendini adamıştır.
Yeasen'in GMP sınıfı ürünler için özel olarak inşa edilmiş moleküler enzim üretim tesisi, hem donanım hem de yazılım düzeyinde ürün kalitesini güvence altına alır. Her biri kapsamlı GMP üretim deneyimine sahip 70 profesyonelden oluşan son derece yetenekli bir ekipten oluşur. Depolama ve lojistik operasyonları modülerleştirilmiştir ve ürünlerin güvenli bir şekilde depolanmasını ve verimli bir şekilde taşınmasını sağlar. Ülke çapında çok merkezli bir dağıtım ağı, güvenilir bir tedarik döngüsünü daha da garanti eder.
3. Yeasen Birçok Ürün İçin DMF Numaraları Elde Etti
İlaç ana dosyaları (DMF'ler), ABD Gıda ve İlaç Dairesi'ne (FDA) gönüllü olarak sunulan gizli belgelerdir. Bunlar, insan ilaç ürünlerinin üretimi, işlenmesi, paketlenmesi ve depolanmasında kullanılan tesisler, süreçler veya maddeler hakkında ayrıntılı bilgiler içerir.
FDA, bir aktif farmasötik bileşen (API) üreticisinin Araştırma Amaçlı Yeni İlaç Başvurusu (IND), Yeni İlaç Başvurusu (NDA), Kısaltılmış Yeni İlaç Başvurusu (ANDA) veya İhracat Başvurusunu desteklemek için DMF'ye atıfta bulunduğunda, DMF'nin teknik içeriğini inceler. DMF'ler bu başvurularda önemli bir rol oynar.Üreticiler belirli malzemeler için DMF'leri dosyaladığında, FDA onay süreci önemli ölçüde hızlandırılabilir.
Yeasen, proje zaman çizelgelerini hızlandırabilecek DMF dosyalarına sahiptir. İsterseniz, FDA başvurunuzu desteklemek için DMF'lerimize referans yetkisi isteyebilirsiniz. DMF'lerimizin referans yetkisini başlatmak için lütfen Yeasen'e bir Yetki Mektubu talebinde bulunun ve FDA Merkezine özgü bir DMF Yetki Mektubu sağlamamızı talep edin.
4. Yeasen ürünlerinin uygulama senaryoları
4.1 Şablon Oluşturma
Plazmit doğrusallaştırma, plazmit vektörlerinin transkripsiyon şablonları olarak kullanıldığı şablon oluşturma sırasında vazgeçilmez bir adımdır. Transkripsiyon DNA şablonlarının sonuna doğru ilerledikçe, plazmit doğrusallaştırma, tanımlanmış bir uzunluk ve diziye sahip RNA transkriptlerinin oluşturulmasını sağlar. Yeasen, ihtiyaçlarınızı karşılamak için çeşitli restriksiyon enzimleri sunar. Künt uçlar veya 5´-çıkıntılar oluşturan restriksiyon enzimlerini seçmenizi öneririz.
4.2 Vitro'da Transkripsiyon (IVT)
İn vitro transkripsiyon çeşitli faktörlerden etkilenmektedir. Enzimler, tamponlar ve modifiye edilmiş substratların tümü transkripsiyon verimliliği üzerinde büyük etkiye sahiptir.
YEASEN Biotech, ZymeEditor platformuna dayanarak, in vitro transkripsiyon (IVT) süreci sırasında çift sarmallı RNA oluşumunu önemli ölçüde azaltan yeni T7 RNA polimerazları geliştirdi (T7 RNA Polimeraz, düşük ds RNA, 250 U/μL). mRNA'nın immünogenitesini büyük ölçüde düşürür ve bir dereceye kadar mRNA'nın bütünlüğünü artırır. Bu gelişmenin mRNA aşılarının ve kanser ilaçlarının geliştirilmesinde önemli bir rol oynaması bekleniyor.
Tamponu optimize ederek ve nükleotid substratının tuz tipini ayarlayarak transkripsiyon verimliliğini büyük ölçüde artırdık ve çift sarmallı RNA üretimini azalttık.
Şekil 2. Tris NTP, lVT verimliliğini büyük ölçüde artırabilir ve dsRNA üretimini azaltabilir
4.3 mRNA Kapatma
5' başlık yapısı immünogeniteyi azalttığı ve mRNA'ların verimli translasyonu için gerekli olduğu için, transkripsiyonla üretilen mRNA'nın 5' uçlarına başlık yapıları eklemek gereklidir.
Şekil 3. Kap oranı tespit sonuçları (LC-MS tespiti)
4.4 mRNA Saflaştırması
Yüksek saflıkta mRNA elde etmek için saflaştırma vazgeçilmez bir adımdır.
5. Yeasen tarafından sağlanan mRNA aşısı hazırlama hammaddeleri
Şu anda Yeasen, mRNA stok solüsyonunun üretim sürecinde eksiksiz bir ürün seti sağlayabilir. Ürünler, GMP üretimi tarafından sıkı bir şekilde kontrol edilir ve mRNA aşısı üretiminin gereksinimlerini tam olarak karşılar.
Tablo 2.mRNA aşısı hazırlamada kullanılan hammaddeler Yeasen tarafından sağlanıyor
| Şablon hazırlama | In vitro transkripsiyon | ||
| 10164ES | 10623ES | ||
| 10122ES | 10625ES | ||
| 10922ES | 10672ES | ||
| 10300ES | 10621ES | ||
|
| 10611ES | ||
| 10661ES | 10133ES | ||
| RNAz R (20U/uL) | 14615ES | 10650ES | |
| Xba ben | 10662ES | 10651ES | |
| Kapaklama |
| Arınma |
|
| 10614ES | 12602ES | ||
| 10612ES | Manyetik Ayırma Rafı | 80460ES | |
| 10619ES | 36717ES | ||
| 10681ES |
| ||
6. Sipariş Bilgileri
Aşağıda Yeasen tarafından sunulan temsili ürünler yer almaktadır. Ek boyutlar mevcuttur.Ürünlerimiz, üstün performans ve yeniden üretilebilirliği garanti altına almak için uyumlu bir şekilde çalışmak üzere son derece optimize edilmiştir. Ayrıca özelleştirilmiş hizmetler de sağlayabiliriz. Gösterilmeyen bir ürünle ilgileniyorsanız, bizimle iletişime geçin ve ihtiyaçlarınızı karşılamak için sizinle birlikte çalışalım.
Tablo 3. Sipariş Bilgileri
Okuma ile ilgili olarak:
mRNA in vitro sentezi için GMP dereceli reaktifler
DNase I ve Biyomedikal Uygulamaları
Referanslar:
[1] Chaudhary, N., Weissman, D. ve Whitehead, KA (2021). Bulaşıcı hastalıklar için mRNA aşıları: ilkeler, uygulama ve klinik çeviri. Doğa incelemeleri. İlaç keşfi, 20(11), 817–838.
[2] Vogel, AB ve diğerleri. Kendini Güçlendiren RNA Aşıları, İnfluenzaya Karşı mRNA Aşılarına Eşdeğer Koruma Sağlar ancak
Çok Daha Düşük Dozlarda. Moleküler terapi: Amerikan Gen Terapisi Derneği dergisi 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. ve Sprangers, R. 5'in hızlı ve maliyet açısından verimli büyük ölçekli üretimi için genel bir yöntem
başlıklı RNA. RNA (New York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmid, A.Klinik Denemeler için mRNA Aşıları Üretmeye Yönelik Hususlar. Moleküler biyolojideki yöntemler (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. ve diğerleri. COVID-19 Hastalığını ve Bildirilen Alerjik Reaksiyonları Önlemek İçin mRNA Aşıları: Güncel Kanıtlar ve Önerilen Yaklaşım. Alerji ve klinik immünoloji dergisi. Uygulamada 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM ve diğerleri. Değiştirilmiş mRNA Aşıları Zika Virüsü Enfeksiyonuna Karşı Koruma Sağlar. Hücre 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS ve diğerleri. Prototip patojen hazırlığı sayesinde mümkün olan SARS-CoV-2 mRNA aşısı tasarımı. Doğa 586,567-571,
[8] Corbett, KS ve diğerleri, mRNA-1273, insan olmayan primatlarda SARS-CoV-2 beta enfeksiyonuna karşı koruma sağlar. Doğa immünolojisi 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. ve diğerleri. SARS-CoV-2 Rekombinant Spike Protein Nanopartikül Aşısının 1-2. Faz Denemesi. New England tıp dergisi 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. & Elbers, K. RNA Aşılarına Giriş. Moleküler biyolojide yöntemler (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY ve Verrier, B. Doğuştan/Uyarlanabilir Bağışıklık Tepkisini Dengelemek İçin mRNA Aşısının Uyarlanması. Moleküler tıptaki eğilimler 26, 311-323,