Phát triển thuốc đòi hỏi phải có mô hình động vật để thử nghiệm hiệu quả. Với hơn 50 năm phát triển và tối ưu hóa, mô hình viêm loét đại tràng (UC) Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), trong số nhiều mô hình động vật khác nhau, được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu nguyên nhân và cơ chế bệnh sinh của bệnh viêm ruột (IBD).
Hình 1. Sự phát triển của mô hình viêm loét đại tràng DSS
1. Đặc điểm của mô hình UC được xây dựng bởi DSS
2. Ưu điểm của mô hình DSS UC
3. Ví dụ xây dựng mô hình DSS UC
4. Tiêu chí đánh giá thành công của mô hình
5. Liên kết đến tài nguyên này
6. Trường hợp thành công cho mô hình hóa với
7. Câu hỏi thường gặp
8. Đặt hàng sản phẩm
9. Các bài báo đã xuất bản với thuốc thử của chúng tôi
10. Xem xét Đọc
1. Đặc điểm của mô hình UC được xây dựng bởi DSS
Nhiều triệu chứng cấp tính hoặc mãn tính của UC có thể được gây ra, chẳng hạn như tiêu chảy, phân có chất nhầy, máu ẩn trong phân, phân có máu, sụt cân, giảm hoạt động và màu lông xấu, theo các liều DSS khác nhau.
Bảng 1 Đặc điểm mô học của mô hình viêm đại tràng DSS
| Loại mô hình viêm đại tràng DSS | mô hình viêm đại tràng cấp tính | Mô hình viêm đại tràng giai đoạn mãn tính |
|---|---|---|
| Thay đổi mô học | Tăng huyết đại tràng, phù nề, co ngắn, giòn, tăng tỷ lệ trọng lượng trên chiều dài | Ruột kết ngắn lại đáng kể |
| Loét đại tràng ở nhiều mức độ khác nhau | Niêm mạc dày lên, hạch to | |
| Phù niêm mạc, mất tế bào hình chén, sưng và phá hủy hốc | Mất tế bào hình chén, mất hốc | |
| Các mức độ khác nhau của sự thâm nhiễm tế bào viêm ở niêm mạc và dưới niêm mạc, tổn thương tế bào biểu mô | Polyp tuyến và những thay đổi giống khối u ở một số ít động vật |
2. Ưu điểm của mô hình DSS UC
👍 1. Các giao thức dễ dàng thực hiện.
👍 2. Mô hình UC DSS rất giống với các triệu chứng UC ở người với khả năng lặp lại cao.
👍 3. Có thể tạo ra nhiều triệu chứng đặc trưng khác nhau bằng cách kiểm soát liều DSS được sử dụng, điều này là duy nhất đối với mô hình DSS UC.
👍 4. Mô hình DSS UC có thể được tạo ra bằng nhiều loại động vật mô hình được sử dụng rộng rãi, chẳng hạn như chuột nhắt, chuột cống, cá ngựa vằn, lợn, ruồi giấm, v.v.
👍 5. Mô hình ung thư liên quan đến viêm đại tràng do IBD (CAC) có thể được tạo ra bằng cách sử dụng kết hợp azoxymethane (AOM).
3. Ví dụ xây dựng mô hình DSS UC
3.1 Mô hình chuột(Click để biết chi tiết)
1) Chuột BALB/c, cái, 6-8 tuần tuổi, 25 g;
2) Nước uống vô trùng có chứa 3% DSS và bộ lọc có màng lọc 0.màng 22 μm;
3) DSS được thực hiện trong 7 ngày;
4) Viêm, chẳng hạn như viêm đại tràng phù nề và sung huyết được quan sát thấy sau khi nhuộm HE.
Hình 2 Kết quả nhuộm HE của các lát cắt viêm đại tràng cấp tính DSS [1]
3.2 Mô hình cá ngựa vằn(Click để biết chi tiết)
1) Phôi cá ngựa vằn được lấy từ quá trình sinh sản tự nhiên và được nuôi trong lồng ấp ở nhiệt độ 28,5℃ trong nước tuần hoàn (60 μg/mL muối biển hòa tan) và bổ sung xanh methylen đến 1 ngày sau khi thụ tinh (dpf);
2) Sau 1 ngày nuôi cấy, sử dụng môi trường nuôi cấy phôi E3 không có xanh methylen để nuôi cấy đến 3 ngày nuôi cấy;
3) Chuẩn bị dung dịch bảo quản DSS 10% với môi trường E3;
4) Pha loãng DSS với môi trường nuôi cấy đến liều tối đa không gây chết (tham chiếu nồng độ DSS: 0,5%);
5) Cá ngựa vằn được xử lý bằng 0,5% DSS từ 3 ngày nuôi đến 6 ngày nuôi và các chỉ số đã được quan sát.
Hình 3 DSS gây ra phản ứng viêm ở gan cá ngựa vằn [2]
3.3 Mô hình con lợn(Click để biết chi tiết)
1) Lợn con Yorkshire ở độ tuổi 4-5 ngày;
2) Liều DSS: 1,25g/kg, uống trong 5 ngày;
3) Tỷ lệ hấp thu D-mannitol tăng lên được quan sát thấy.
Hình 4 Nồng độ D-mannitol do DSS gây ra ở lợn con cao hơn so với nhóm đối chứng [3]
3.4 Mô hình ruồi giấm(Click để biết chi tiết)
1) Drosophila, cái, 5-10 ngày;
2) Cho ăn trung bình được chuẩn bị với dung dịch sucrose 5% chứa 3% DSS và 25 μg/mL thuốc bleomycin;
3) Drosophila được nuôi cấy ở nhiệt độ 29°C trong ba ngày và thay đổi chai nuôi cấy hàng ngày;
4) DSS thúc đẩy sự phát triển của các tế bào tiền thân ISC và có tác dụng gây chết ruồi giấm.
Hình 5 DSS gây ra sự tăng sinh của các tế bào tiền thân ISC ở ruồi giấm [4].
3,5 Ung thư liên quan đến viêm đại tràng(Click để biết chi tiết)
1) Chuột BALB/c, đực, 7 tuần tuổi;
2) Vào ngày 1, cân và đánh dấu chuột. Tiêm vào màng bụng chuột dung dịch AOM 10 mg/kg.
3) Đổ đầy nước vào máng uống của lồng chuột. Tính toán lượng nước 7-10 mL cho mỗi con chuột mỗi ngày. Cho ăn trong một tuần.
4) Thay nước uống bằng DSS 2,5% trong một tuần;
5) Cho ăn bằng nước uống thông thường trong hai tuần;
6) Lặp lại các bước 3-4 3 lần.
![Fig.6 Schematic diagram of CAC induced by AOM/DSS [5] .](https://seas.ysbuy.com/file/32626/24d9-166605804688444368.jpg?imageView2/2/format/webp/q/100)
Hình 6 Sơ đồ CAC gây ra bởi AOM/DSS [5] .
4. Mô hình hóa tiêu chí đánh giá thành công
4.1 Chỉ số hoạt động bệnh tật (điểm DAI)
Mô hình được đánh giá bằng nhiều thông số bao gồm trọng lượng cơ thể, độ nhớt của phân và máu ẩn, qua đó tạo ra DAI tổng thể.
Bảng 2 Quy tắc chấm điểm DAI
| điểm | phần trăm giảm cân | độ đặc của phân | máu ẩn trong phân |
|---|---|---|---|
| 0 | 0 | Bình thường | Tiêu cực |
| 1 | 1-5% | Phân mềm | Màu xanh nhạt |
| 2 | 5-10% | Phân nhầy | Màu xanh da trời |
| 3 | 10-20% | Phân lỏng | Màu xanh đậm |
| 4 | >20% | \ | Phân có máu |
4.2 Điểm thay đổi mô học
Điểm số được đưa ra cho các chỉ số trên dựa trên những thay đổi về mô học không bao gồm sự hình thành hạch bạch huyết cho mô hình viêm đại tràng cấp tính. Thuốc nhuộm HE được sử dụng là Cat#60524ES60.
Bảng 3 Điểm thay đổi mô học
| Loét đau |
Loét ( s )
| Thay đổi viêm | thâm nhiễm viêm |
Hạch bạch huyết
|
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0 | Bình thường | Không có | không có |
| 1 | 1 | Mất tế bào hình chén | Xâm nhập Pericrypt | 1 |
| 2 | 2 | Mất tế bào hình chén | Sự thâm nhiễm niêm mạc cơ | 2 |
| 3 | 3 | Xóa mật mã | Sự thâm nhiễm toàn bộ lớp cơ niêm mạc, sự dày lên của lớp niêm mạc | 3 |
| 4 | >3 | Mất hốc rộng rãi hoặc tái tạo dạng polyp | Xâm lấn lớp dưới niêm mạc | > |
4.3 dấu hai chấm chiều dài
Chiều dài đại tràng ngắn lại là kiểu hình rõ ràng đối với mô hình viêm đại tràng mãn tính, trong khi những thay đổi tương tự có thể được phát hiện vào ngày thứ 8 đối với mô hình viêm đại tràng cấp tính.
4.4 Tóm tắt
Các thí nghiệm sơ bộ được khuyến nghị để sử dụng mô hình động vật DSS UC với sự kiểm soát phù hợp. 8-10 động vật mỗi nhóm là yêu cầu tối thiểu. DAI là tiêu chí để đánh giá kết quả từ một nghiên cứu sơ bộ.
5. Liên kết đến tài nguyên này
[1]Xiaona Gao và cộng sự. Tạp chí Hóa sinh dinh dưỡng 83 (2020) 108438.
[2]Jing Ma, et al. Nuôi trồng thủy sản và nghề cá (2021) 548–557.
[3]Connie J. Kim, et al. Tạp chí Hóa sinh dinh dưỡng 21 (2010) 468–475.
[4]Fangfang Ren,et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
[5]Jia-Rong Huang, et al.Frontiers in Pharmacology.2020.11:586885.
6. Trường hợp thành công cho mô hình hóa với Yeasen DSS
Các mô hình viêm đại tràng cấp tính thành công được tạo ra với
Bảng 4 Xây dựng các loại mô hình viêm ruột khác nhau với DSS
| Người mẫu | Mẫu mô hình | Kế hoạch mô hình hóa | Kết quả mô hình hóa | Sử dụng đánh giá |
|---|---|---|---|---|
| Viêm đại tràng cấp tính | Chuột BALB/c, cái, 6-8 tuần tuổi, 25 g | 3%-5% DSS uống thoải mái trong 7 ngày liên tục | Ngày thứ 5 xuất hiện, chiều dài của đại tràng bị ngắn lại, nhuộm HE và tình trạng viêm rõ ràng. | Tốc độ đúc nhanh và thời gian ngắn. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng cấp tính |
| Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 20 g | 3%-5% DSS bằng ống thông dạ dày, quản lý liên tục | Ngày thứ 5 xảy ra, ruột kết ngắn lại, sụt cân, có máu trong phân, tiêu chảy | Tỷ lệ nấm mốc cao và thời gian ngắn. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng cấp tính | |
| Viêm đại tràng mãn tính | Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 22 g | 1-2% DSS bằng ống thông dạ dày, dùng liên tục | Ngày thứ 40 xuất hiện, ruột kết ngắn lại, sụt cân, có máu trong phân, tiêu chảy | Tỷ lệ đúc cao. Phù hợp với đặc điểm của mô hình viêm đại tràng mãn tính |
| Ung thư ruột kết | Chuột C57BL/6, đực, 8 tuần tuổi, 21 g | 1%-2% DSS tùy ý trong 5 ngày trong 3 tuần | 14 tuần với chiều dài đại tràng ngắn lại, sụt cân, nhuộm HE và tình trạng viêm rõ ràng | Tỷ lệ đúc cao. Phù hợp với đặc điểm mô hình ung thư ruột kết |
7. Câu hỏi thường gặp
Bất kể mô hình viêm đại tràng DSS cấp tính hay mô hình viêm đại tràng DSS mãn tính, mức độ nghiêm trọng và thành công của viêm ruột đều liên quan đến loài chuột (nền tảng di truyền khác nhau), nồng độ DSS và chu kỳ dùng thuốc.
Bảng 5 Các vấn đề thường gặp của mô hình viêm đại tràng DSS
| Các vấn đề có thể xảy ra | Lý do có thể | Giải pháp đề xuất |
|---|---|---|
| Tỷ lệ tử vong cao ở chuột | Nồng độ DSS quá cao | Giảm nồng độ DSS được sử dụng |
| Chuột không có hoặc có ít triệu chứng viêm ruột | Nồng độ DSS quá thấp | Tăng nồng độ liều DSS; giảm khoảng cách chu kỳ (10-14 ngày) |
| Trong cùng một nhóm chuột, các triệu chứng của bệnh viêm ruột rất khác nhau | Nắp chai bị tắc | Kiểm tra bình nước uống của chuột hàng ngày |
8. Đặt hàng sản phẩm:
Sản phẩm bán chạy chỉ cần 1/3 giá của Ông * với hiệu quả như nhau và chúng tôi luôn có sẵn một lượng hàng lớn.
Bảng 6 Đặt hàng sản phẩm
| Tên sản phẩm | Mèo số | Kích cỡ |
| Chăm sóc sức khỏeTM Muối natri dextran sulfat (DSS), Cấp độ viêm đại tràng MW: 36000~50000 | 60316ES25 | 25g |
| 60316ES60 | 100g | |
| 60316ES76 | 500g | |
| 60316ES80 | 1kg |
9. Các bài báo đã xuất bản với thuốc thử của chúng tôi:
2024
[1]Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Hydrogel dựa trên vi tảo cho bệnh viêm ruột và lo âu và trầm cảm liên quan. Adv Mater. 2024 26 tháng 1:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. NẾU=29,4
[2] Trương Vâng, Bạn S, Ji X, Vũ J, Mạnh J, Cao J, Thiệu X, Shi S, Vương G, Qiu J, Trương Z, Hoa C, Trương Z, Trần S, Trương L, Chu SJ. Dubosiella newyorkensis điều chỉnh miễn dịch sức chịu đựng TRONG viêm đại tràng thông qua cái L-lysine hoạt hóa AhR-IDO1-Kyn con đường. Tự nhiên Cộng đồng. 2024 Tháng Hai 13;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x. NẾU= 16,6
2022
[1]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Xác định chữ ký gen liên quan đến miễn dịch và dự đoán mạng lưới CeRNA trong viêm loét đại tràng hoạt động[J]. Biên giới trong miễn dịch học. 2022; 13: 855645. NẾU=7.561
[2]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. Tác dụng chống viêm của các peptide có nguồn gốc từ gelatin xương bò trong RA do LPS gây raW264.7 Tế bào đại thực bào và chuột C57BL/6 được kích thích bằng natri dextran sulfat[J]. Chất dinh dưỡng 2022, 14, 1479. NẾU=5.717
[3]Vương S, Hoàng J, Tan KS, et al.Isosteviol Sodium cải thiện tình trạng viêm đại tràng mãn tính do Dextran Sodium Sulfate gây ra thông qua việc điều chỉnh hồ sơ chuyển hóa, phân cực đại thực bào và con đường NF-B[J].Y học oxy hóa và tuổi thọ tế bào. 2022,4636618. NẾU=5.076
[4]YuangengLi, PingYu, WenwenFu, et al.Polysaccharides từ Panax ginseng CA Meyer làm giảm IBD do DSS gây ra bằng cách ức chế con đường truyền tín hiệu inflammasome JAK2/STAT1/NLPR3 ở chuột[J].Tạp chí Thực phẩm Chức năng.2022, 105013. NẾU=4,451
[5]Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin, et al. Phản ứng chuyển hóa và phiên mã của tinh hoàn chuột đối với viêm đại tràng do dextran sulfat natri gây ra[J]. Độc chất sinh sản. 2022, Trang 35-42. NẾU=3,143
2021
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Cải thiện nền tảng sử dụng thuốc bằng hydrogel dính niêm mạc tiêm để điều trị viêm loét đại tràng[J]. tạp chí kỹ thuật hóa học.424(2021)130464.NẾU=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al.Các túi ngoại bào có nguồn gốc từ sữa làm giảm viêm loét đại tràng bằng cách điều chỉnh miễn dịch đường ruột và định hình lại hệ vi khuẩn đường ruột[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 NẾU=11,556
[3]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al.Các hạt cung cấp nucleotide được đưa vào cơ thể qua đường uống từ vi chất lỏng để điều trị bệnh viêm ruột[J]. Applied Materials Today.2021 tháng 12;25:101231. NẾU=10.041
[4]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Vi khuẩn đường miệng ảnh hưởng đến hiệu quả và tiên lượng của xạ trị ung thư trực tràng ở mô hình chuột[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[5]Hạo H, Trương X, Tống L, Lưu Q, et al.Lactobacillus plantarumTác dụng của các túi ngoại bào có nguồn gốc từ Câu hỏi 7 về vi khuẩn đường ruột và viêm loét đại tràng ở chuột [J]. Biên giới trong miễn dịch học. 2021.777147. NẾU=7.561
[6]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Tổ yến ăn được làm giảm viêm loét đại tràng do dextran sulfat natri gây ra ở chuột C57BL/6J bằng cách khôi phục sự cân bằng tế bào Th17/Treg[J]. Biên giới trong dược lý học.2021.632602. NẾU=7.561
2020
[1]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Axit valeric có nguồn gốc từ vi khuẩn cộng sinh đường ruột bảo vệ chống lại các tổn thương do bức xạ. Vi khuẩn đường ruột,.2020 .1–18.IF=10.245
[2]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine làm giảm viêm đại tràng ở chuột và ung thư trực tràng liên quan đến viêm đại tràng[J]. Biên giới trong dược lý học. 2020.586885. NẾU=7.561
[3]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Isoflavone đậu nành cải thiện tình trạng viêm đại tràng thực nghiệm bằng cách nhắm mục tiêu vào các con đường ERα/NLRP3 inflammasome[J]. Tạp chí Hóa sinh dinh dưỡng, 2020, 83. NẾU=6.048
Trước năm 2020
[1] Oehlers SH, Flores MV, Hall CJ, Crosier KE, Crosier PS. Axit retinoic ức chế sản xuất chất nhầy ruột và làm trầm trọng thêm tình trạng viêm ruột kết thực nghiệm. Dis Model Mech. 2012 tháng 7;5(4):457-67. NẾU=4,973
[2] Kim CJ, Kovacs-Nolan JA, Yang C, Archbold T, Fan MZ, Mine Y. l-Tryptophan thể hiện chức năng điều trị trong mô hình lợn bị viêm đại tràng do dextran natri sulfat (DSS). J Nutr Biochem. 2010 tháng 6;21(6):468-75. NẾU=6.048
[3] Karpowicz, P., Perez, J. & Perrimon, N.,. Con đường ức chế khối u Hippo điều chỉnh quá trình tái tạo tế bào gốc ruột. Phát triển (Cambridge, Anh), 2010,137(24), tr.4135–4145. NẾU=6.868
[4] Fan H, Chen W, Zhu J, et al. Toosendanin làm giảm viêm đại tràng do dextran sulfate natri gây ra bằng cách ức chế phân cực đại thực bào M1 và điều chỉnh NLRP3 inflflammasome và tín hiệu Nrf2/HO-1[J]. Miễn dịch dược lý quốc tế, 2019, 76: 105909. NẾU=3,943
Xem xét Đọc
Giao thức mô hình hóa bệnh viêm loét đại tràng ở cá ngựa vằn sử dụng natri dextran sulfat (DSS)
Giao thức mô hình hóa bệnh viêm loét đại tràng Drosophila sử dụng natri dextran sulfat (DSS)