Sự khác biệt giữa các ứng dụng phát hiện luciferase đơn và kép

Xét nghiệm gen báo cáo chủ yếu được chia thành xét nghiệm gen báo cáo luciferase đơn và xét nghiệm gen báo cáo luciferase kép. Trong các ứng dụng cụ thể, làm thế nào bạn có thể xác định liệu thí nghiệm sử dụng hệ thống phát hiện luciferase đơn hay luciferase kép? Hãy cùng xem xét sự khác biệt.

Hệ thống thử nghiệm báo cáo Luciferase đơn

Số lượng gen báo cáo: Một gen báo cáo luciferase đom đóm đơn lẻ;

Loại chuyển gen: Plasmid gen báo cáo đơn, sau khi chuyển gen, quá trình chọn lọc thuốc được sử dụng để xây dựng dòng tế bào gen báo cáo ổn định biểu hiện luciferase;

Quy trình phát hiện: Chỉ cần phát hiện tín hiệu luciferase đom đóm, thao tác đơn giản, thời gian phát hiện ngắn, thích hợp cho sàng lọc thuốc năng suất cao;

Phân tích tình huống ứng dụng: Thông thường là thông qua việc xây dựng một dòng tế bào đơn dòng biểu hiện quá mức ổn định, vì mức độ biểu hiện của các dòng tế bào này tương đối ổn định và đồng đều, không bị ảnh hưởng bởi các biến thể thực nghiệm do hiệu quả chuyển gen và khả năng sống của tế bào. Hoạt động này đơn giản và vì chỉ phát hiện được tín hiệu luciferase đom đóm nên việc phân tích dữ liệu thuận tiện hơn. Kết hợp với những ưu điểm về thời gian phát hiện ngắn, phương pháp này đặc biệt phù hợp để sàng lọc thuốc thông lượng cao và đáp ứng nhu cầu phát hiện mẫu quy mô lớn.

Hệ thống phát hiện gen báo cáo Dual-Luciferase

Số lượng gen được báo cáo: Gen báo cáo kép của luciferase đom đóm và luciferase Renilla;

Loại chuyển gen: Đồng chuyển gen của hai plasmid gen báo cáo, chủ yếu thông qua chuyển gen tạm thời;

Quy trình phát hiện: Đầu tiên cần phải phát hiện tín hiệu đom đóm và sau đó là tín hiệu Renilla, và tỷ lệ của hai tín hiệu này (Firefly/Renilla) được sử dụng để tính toán dữ liệu cuối cùng;

Phân tích tình huống ứng dụng: Thông thường là thông qua quá trình chuyển gen tạm thời, với việc đồng chuyển gen plasmid chứa gen Renilla luciferase làm tham chiếu nội bộ, cung cấp chuẩn mực cho thí nghiệm, do đó làm giảm sự can thiệp của các yếu tố bên ngoài như khả năng sống của tế bào và hiệu quả chuyển gen. Thông qua tính toán tỷ lệ, có thể hiệu chỉnh các biến thể về số lượng tế bào, hiệu quả chuyển gen và hoạt động của tế bào, cải thiện độ chính xác của kết quả thí nghiệm. Đây là một công cụ quan trọng trong các lĩnh vực điều hòa biểu hiện gen, con đường truyền tín hiệu và sàng lọc thuốc.

loạt sản phẩm

Yeasen Dòng sản phẩm Luciferase Reporter Gene Detection cung cấp giải pháp phát hiện định lượng tiện lợi và hiệu quả. Thiết kế một thành phần đơn giản hóa quy trình sử dụng và sự kết hợp hoàn hảo giữa độ nhạy cao với thời gian bán hủy tín hiệu siêu dài 5 giờ đáp ứng nhu cầu phát hiện sàng lọc thuốc quy mô lớn. Chúng tôi cung cấp ba sản phẩm: Bio-One Step, Steady-One Step và Bright-One Step, để thích ứng với các yêu cầu về độ nhạy và độ ổn định khác nhau.

tên sản phẩm	Bước Bio-One	Một Bước Ổn Định	Bright-One Bước
Mã sản phẩm	11411ES	11413ES	11412ES
Các tình huống ứng dụng và Đặc điểm	Bộ dụng cụ này tạo ra sự cân bằng tương đối giữa cường độ tín hiệu và độ ổn định. Nó duy trì cường độ tín hiệu tương đối cao trong khi vẫn giữ cường độ tín hiệu tương đối ổn định trong một khoảng thời gian nhất định.	Thời gian bán hủy có thể kéo dài hơn 5 giờ. Đặc biệt là trong vòng 2 giờ đầu tiên, giá trị phát quang thay đổi rất nhỏ. Thích hợp cho các xét nghiệm thông lượng cực cao hoặc xét nghiệm đĩa 384 giếng.	Độ nhạy cao và cường độ tín hiệu cao. Thích hợp cho các thí nghiệm đòi hỏi độ nhạy cao.
Thời gian bán hủy của tín hiệu	60 phút	5 giờ	30 phút
Đặc điểm hoạt động	Một Bước	Một Bước	Một Bước

Ưu điểm của sản phẩm

Thời gian bán hủy tín hiệu dài: Thời gian bán hủy tín hiệu có thể đạt tới 5 giờ, đáp ứng nhu cầu của các thí nghiệm thông lượng cao và tránh sự khác biệt về tín hiệu do chênh lệch thời gian giữa giếng đầu tiên và giếng cuối cùng do số lượng mẫu lớn, đảm bảo kết quả ổn định và đáng tin cậy hơn.

Tín hiệu huỳnh quang mạnh: Giá trị tín hiệu có thể đạt tới 8 cấp độ, cung cấp cửa sổ phát hiện lớn và hỗ trợ dữ liệu mạnh mẽ cho việc sàng lọc thuốc sớm và đánh giá hiệu quả.

Hoạt động dễ dàng: Hoạt động một bước tránh các quy trình thử nghiệm phức tạp. Chỉ cần thêm thuốc thử phát hiện và đợi 5 phút trước khi khởi động máy để phát hiện.

Nhiều lựa chọn: Theo các tình huống ứng dụng khác nhau, có 3 sản phẩm khác nhau có thể được lựa chọn dựa trên các yêu cầu thử nghiệm về giá trị tín hiệu và độ ổn định của tín hiệu.

Dữ liệu sản phẩm

01 So sánh hiệu suất cho Yeasen Gen phóng viên khác nhau Bộ xét nghiệm

Việc xác minh ba loại Bộ xét nghiệm được tiến hành trên các dòng tế bào biểu hiện ổn định luciferase đom đóm và kết quả cho thấy sản phẩm Bright-One Step có giá trị tín hiệu cao hơn; sản phẩm Steady-One Step có thời gian bán hủy tín hiệu dài hơn và tín hiệu ổn định hơn; sản phẩm Bio-One Step không chỉ có giá trị tín hiệu cao mà còn duy trì thời gian bán hủy tín hiệu dài hơn.

Hình 1. So sánh hiệu suất cho các Yeasen Bộ xét nghiệm gen của phóng viên

02  Yeasen So sánh thuốc thử phát hiện gen Luciferase Reporter Bio-One Step với các sản phẩm cạnh tranh

Khi sử dụng Yeasen Bio-One Step, đối thủ cạnh tranh P và đối thủ cạnh tranh V trên dòng tế bào biểu hiện quá mức luciferase đom đóm một cách ổn định, kết quả cho thấy giá trị tín hiệu và thời gian bán hủy tín hiệu của Yeasen Bio-One Step về cơ bản giống với đối thủ cạnh tranh P và thời gian bán hủy tín hiệu vượt trội hơn so với đối thủ cạnh tranh V.

Hình 2. So sánh Yeasen Thuốc thử phát hiện gen Luciferase Reporter Bio-One Step với các đối thủ cạnh tranh

03 Yeasen Thuốc thử phát hiện gen Luciferase Reporter Bio-One Step Thử nghiệm độ ổn định đông lạnh-tan băng

Yeasen Thuốc thử phát hiện gen Luciferase Reporter Bio-One Step đã trải qua nhiều lần thử nghiệm đông lạnh-tan băng và kết quả cho thấy ngay cả sau 5 chu kỳ đông lạnh-tan băng, hiệu suất sản phẩm vẫn ổn định mà không có thay đổi đáng kể.

Hình 3.Thử nghiệm đông lạnh-tan băng lặp lại của Yeasen Thuốc thử phát hiện gen Luciferase Reporter Bio-One Step

Quy trình hoạt động

01 Chuyển gen tế bào

Đổ trực tiếp thuốc thử vào hỗn dịch tế bào, sau đó dùng pipet lên xuống 5 lần để đảm bảo trộn đều, đợi 5 phút để tế bào phân hủy hoàn toàn.

02 Tải mẫu

Dùng pipet lấy 100 μL hỗn hợp (thuốc thử phát hiện + môi trường nuôi cấy tế bào) vào mỗi giếng của đĩa phát hiện.

03 Phát hiện huỳnh quang

Thiết lập các thông số trên máy đọc đĩa. Đặt đĩa phát hiện vào máy đọc đĩa, rung trong vài giây, sau đó tiến hành phát hiện.

Danh sách sản phẩm

Danh mục sản phẩm	Tên sản phẩm	Mã sản phẩm	Thông số kỹ thuật sản phẩm
Bộ xét nghiệm gen Luciferase Reporter	Bộ xét nghiệm Luciferase Bio-One Step	11411ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
	Bộ xét nghiệm Luciferase Steady-One Step	11413ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
	Bộ xét nghiệm Luciferase Bright-One Step	11412ES60/80/81	100T/10×100T/1000T
Bộ xét nghiệm gen báo cáo Dual-Luciferase	Bộ xét nghiệm gen báo cáo Luciferase kép	11402ES60/80	100T/1000T
	Bộ xét nghiệm gen báo cáo Dual Glo Luciferase	11405ES60/80	100T/1000T