Các bạn thân mến, bạn có cảm thấy bối rối khi đối mặt với nhiều Kháng thể kiểm soát tải và kháng thể gắn thẻ Epitope trong quá trình miễn dịch hóa protein không? Kiểm soát tải protein được mã hóa bởi các gen quản lý trong sinh vật và được biểu hiện ổn định trong nhiều mô. Chúng được sử dụng để xác minh xem các thí nghiệm miễn dịch có diễn ra bình thường hay không và như một tiêu chuẩn phát hiện bán định lượng cho biểu hiện protein. Vậy, làm thế nào để bạn chọn đúng kháng thể kiểm soát tải? Bạn có thể tham khảo các điểm sau.

I. Nguồn gốc loài mẫu

1. Đối với các mẫu từ mô hoặc tế bào động vật có vú, thường chọn β-actin, α-tubulin, GAPDH, Lamin-B, Histone H3, Na+/K+-ATPase.
2. Đối với các mẫu có nguồn gốc từ thực vật, thường chọn actin thực vật, Rubisco, v.v.
3. Đối với các mẫu khác có ít nghiên cứu hơn, hãy chọn protein thích hợp làm tài liệu tham khảo nội bộ bằng cách tham khảo tài liệu hoặc cơ sở dữ liệu có liên quan.

Đảm bảo rằng trọng lượng phân tử của protein mục tiêu khác với trọng lượng của protein kiểm soát tải hơn 5KDa để ngăn ngừa nhiễu trong quá trình phát hiện. Ví dụ, nếu protein mục tiêu là 40KDa, thì không phù hợp để chọn β-actin (42KDa) làm đối chứng tải. Hãy cân nhắc sử dụng GAPDH (36KDa) hoặc β-tubulin (55KDa) làm đối chứng tải.

III. Vị trí biểu hiện của protein tham chiếu nội bộ

Nhãn kháng thể hoạt động tốt hơn khi sử dụng cùng nhau

Trong các thí nghiệm nghiên cứu tương tác protein, chẳng hạn như kéo xuống, các thẻ epitope có thể được gắn vào đầu N hoặc C của protein mục tiêu thông qua các phương pháp sinh học phân tử. Các thẻ epitope thường được sử dụng bao gồm His, HA, Myc và GST. Các thẻ epitope này thường không ảnh hưởng đến hoạt động sinh học và vị trí nội bào của protein mục tiêu. Sự xuất hiện của các thẻ epitope đã mang lại sự tiện lợi cho nghiên cứu khoa học và sản xuất công nghiệp.

Thông tin sản phẩm