Kháng thể thứ cấp là gì?
Kháng thể thứ cấp là kháng thể có thể liên kết với kháng thể chính. Kháng thể này chủ yếu được sử dụng để phát hiện sự hiện diện của kháng thể chính. Kháng thể chính liên kết đặc hiệu với kháng nguyên, và kháng thể thứ cấp liên kết đặc hiệu với kháng thể chính. Nói cách khác, vùng Fc hoặc mảnh Fab của kháng thể chính có thể hoạt động như một kháng nguyên để kích thích cơ thể sản xuất kháng thể. Nghĩa là, kháng thể chính chủ yếu là immunoglobulin lớp IgG, vì vậy kháng thể thứ cấp là kháng thể anti-IgG.
Vai trò của kháng thể thứ cấp
Kháng thể chính liên kết đặc hiệu với protein mục tiêu và kháng thể chính cần được gắn nhãn bằng chất phát quang hoặc nhóm tạo màu. Không thể nhìn thấy bằng mắt thường liệu kháng thể chính ràng buộc protein. Tuy nhiên, kháng thể chính tương đối đặc hiệu và mỗi kháng thể được gắn nhãn với chi phí cao. Người ta thường sử dụng kháng thể thứ cấp có gắn nhãn có thể liên kết với kháng thể chính và có nhãn có thể phát hiện được (như nhóm huỳnh quang, phóng xạ, phát quang hóa học hoặc nhóm sinh màu). Vì vậy, thiết kế hiện tại thường có kháng thể thứ cấp có nhãn có thể phát hiện được để phát hiện kháng thể chính, trong khi kháng thể chính nhận ra chất nền. Theo cách này, khi kháng thể chính liên kết với chất nền, nó có thể được phát hiện thông qua kháng thể thứ cấp.
Ví dụ, nguyên lý phát quang ECL: Trong chất nền ECL, có H2Ồ2 và luminol (và các dẫn xuất của nó), phát ra huỳnh quang dưới tác động của HRP (peroxidase cải ngựa).
Những điểm chính khi sử dụng kháng thể thứ cấp
Kháng thể thứ cấp là kháng thể được tạo ra bằng cách tiêm chủng cho động vật có vú (thường là tiêm chủng cho dê, ngựa, lừa, la và chuột lang, v.v.) bằng immunoglobulin IgG của một phân nhóm nhất định của loài kháng thể chính (như thỏ, chuột), do đó kháng thể thứ cấp chỉ liên kết với một loài và phân nhóm cụ thể của kháng thể chính. Ví dụ, kháng thể chống chuột ở cừu (kháng thể thứ cấp) sẽ liên kết cụ thể với kháng thể đơn dòng ở chuột (kháng thể chính) và sẽ không liên kết với kháng thể đa dòng ở thỏ hoặc kháng thể đơn dòng ở chuột.
Dấu hiệu ghép nối của kháng thể thứ cấp
Các phương pháp thử nghiệm khác nhau sẽ tạo ra các nhóm ghép nối khác nhau cho các kháng thể thứ cấp, chủ yếu là các enzyme (peroxidase cải ngựa/HRP và phosphatase kiềm/AP), các nhóm huỳnh quang (FITC, Rhodamine, PE, Dylight, Alexa Fluor, cy3, v.v.), biotin, các hạt vàng, v.v. Nhìn chung, các kháng thể thứ cấp gắn nhãn HRP được khuyến nghị cho các thí nghiệm như WB, ELISA, IHC và các kháng thể thứ cấp gắn nhãn biotin được khuyến nghị cho IHC, trong khi các nhãn huỳnh quang như Alexa Fluor 488, FITC, PE được sử dụng cho IF, FC, v.v.
Làm thế nào để chọn kháng thể thứ cấp phù hợp
a. Miễn dịch blotting (WB)
Chọn một kháng thể thứ cấp được gắn nhãn bằng peroxidase cải ngựa hoặc phosphatase kiềm cho phương pháp Western blotting truyền thống; chọn một kháng thể thứ cấp được gắn nhãn bằng chất huỳnh quang tương ứng cho phương pháp Western blotting huỳnh quang.
b.Miễn dịch mô hóa học (IHC/ICC)
B. Đối với ICC (Miễn dịch tế bào), hãy chọn kháng thể thứ cấp được gắn nhãn bằng Biotin.
C. Miễn dịch huỳnh quang (IHF/ICF)
Kết tủa miễn dịch thường cho phép lựa chọn sử dụng kháng thể thứ cấp đặc hiệu với Fc hoặc Fab. Các kháng thể thứ cấp như vậy có thể tránh được sự can thiệp từ chuỗi nặng (trọng lượng phân tử 55 kDa) hoặc chuỗi nhẹ (trọng lượng phân tử 25 kDa).
Thông tin sản phẩm được đề xuất
| Nhóm nhãn | Số sản phẩm | Tên sản phẩm |
| Không có dấu hiệu | 34850ES | Dê chống thỏ lgG(H+L) |
| 34851ES | Dê chống chuột lgG(H+L) | |
| 34847ES | Lừa kháng IgG người (H+L) | |
| HRP | 33101ES | Peroxidase AffiniPure Dê Kháng Thỏ IgG (H+L) |
| 33201ES | Peroxidase AffiniPure Dê Chống Chuột IgG (H+L) | |
| 33301ES | Peroxidase AffiniPure Dê Chống Chuột IgG (H+L) | |
| 33401ES | Peroxidase AffiniPure Dê Chống Chuột Lang IgG(H+L) | |
| 33501ES | Kháng thể IgG của dê kháng người (H+L) của Horseradish Peroxidase | |
| 33701ES | Peroxidase AffiniPure Thỏ Kháng Dê IgG (H+L) | |
| 33801ES | Peroxidase AffiniPure Thỏ Chống Cừu IgG (H+L) | |
| 34201ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Kháng thỏ IgG (H+L) | |
| 34101ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Kháng IgG Chuột (H+L) | |
| 34301ES | Peroxidase AffiniPure Donkey Kháng IgG Dê (H+L) | |
| 33101ES | Peroxidase AffiniPure Dê Kháng Thỏ IgG (H+L) | |
| Huỳnh quang xanh | 33106ES | YSFluor™ 488 Kháng thể IgG kháng thỏ (H+L) |
| 33126ES | YSFluor™ 488 Kháng thể IgG kháng người của dê (H+L) | |
| 33206ES | YSFluor™488 Dê kháng IgG chuột (H+L) | |
| 33306ES | YSFluor™ 488 Kháng thể IgG của dê chống bò (H+L) | |
| 33406ES | YSFluor™ 488 IgG kháng chuột lang ở dê (H+L) | |
| 33706ES | YSFluor™488 Thỏ kháng IgG dê (H+L) | |
| 33906ES | YSFluor™ 488 Thỏ kháng IgG chuột (H+L) | |
| 34906ES | YSFluor™488 Lừa Kháng Cừu IgG (H+L) | |
| 34106ES | YSFluor™488 Lừa Kháng IgG Chuột (H+L) | |
| 34206ES | YSFluor™488 Lừa Kháng IgG Thỏ (H+L) | |
| 34306ES | YSFluor™ 488 Lừa Kháng IgG Dê (H+L) | |
| 34406ES | YSFluor™ 488 Lừa kháng IgG (H+L) | |
| 34506ES | YSFluor™488 Lừa Kháng thể IgG kháng chuột lang (H+L) | |
| 34606ES | YSFluor™488 Lừa Kháng thể IgG kháng gà (H+L) | |
| 34706ES | YSFluor™488 IgY kháng gà cho thỏ(H+L) | |
| 34806ES | YSFluor™488 Lừa Kháng thể IgG của Người (H+L) | |
| 34856ES | FITC AffiniPure Dê Kháng IgG Người (H+L) | |
| 33107ES | FITC-AffiniPure Dê Kháng Thỏ IgG (H+L) | |
| 33207ES | FITC-AffiniPure Dê Kháng Chuột IgG (H+L) | |
| 33307ES | FITC-AffiniPure Dê kháng IgG (H+L) | |
| 33707ES | FITC-AffiniPure Thỏ Kháng Dê IgG (H+L) | |
| 33807ES | FITC-AffiniPure Thỏ Kháng Cừu IgG (H+L) | |
| Rhodamin | 33109ES | Rhodamine (TRITC) Kháng thể IgG dê kháng thỏ (H+L) |
| 33209ES | Rhodamine (TRITC) Dê kháng IgG chuột (H+L) | |
| 33709ES | Rhodamine (TRITC) AffiniPure Thỏ Kháng Dê IgG (H+L) | |
| 33210ES | Rhodamine Red-X (RRX) Dê kháng IgG chuột (H+L) | |
| Huỳnh quang màu cam | 33112ES | YSFluor™594 AffiniPure Dê Kháng Thỏ IgG (H+L) |
| 33212ES | YSFluor™ 594 Dê kháng IgG chuột (H+L) | |
| 33222ES | YSFluor™ 594 Kháng thể IgG kháng người của dê (H+L) | |
| 33412ES | YSFluor™594 IgG kháng chuột lang ở dê (H+L) | |
| 33312ES | YSFluor™ 594 Kháng thể IgG của dê chống bò (H+L) | |
| 33712ES | YSFluor™594 Thỏ kháng IgG dê (H+L) | |
| 33812ES | YSFluor™ 594 Thỏ kháng IgG cừu (H+L) | |
| 33912ES | YSFluor™594 Thỏ kháng IgG chuột (H+L) | |
| 34712ES | YSFluor™594 IgY kháng gà cho thỏ (H+L) | |
| 34112ES | YSFluor™ 594 Lừa Kháng IgG Chuột (H+L) | |
| 34212ES | YSFluor™594 Lừa Kháng IgG Thỏ (H+L) | |
| 34312ES | YSFluor™ 594 Lừa Kháng IgG Dê (H+L) | |
| 34412ES | YSFluor™ 594 Lừa kháng IgG (H+L) | |
| 34512ES | YSFluor™594 Lừa Kháng thể IgG kháng chuột lang (H+L) | |
| 34612ES | YSFluor™594 Lừa Kháng thể IgG kháng gà (H+L) | |
| 34812ES | YSFluor™594 Lừa Kháng IgG Người (H+L) | |
| 34912ES | YSFluor™594 Lừa Kháng Cừu IgG (H+L) | |
| 33208ES | Cy3-AffiniPure Dê Kháng Chuột IgG (H+L) | |
| 33308ES | Cy3-AffiniPure Dê Kháng Chuột IgG (H+L) | |
| 33708ES | Cy3-AffiniPure Thỏ Kháng Dê IgG (H+L) | |
| 33808ES | Cy3-AffiniPure Thỏ Kháng Cừu IgG (H+L) | |
| 34855ES | Cy3-AffiniPure Lừa Kháng IgG Dê (H+L) | |
| Huỳnh quang đỏ | 33113ES | YSFluor™647 Dê kháng thỏ IgG (H+L) |
| 33213ES | YSFluor™ 647 Dê kháng IgG chuột (H+L) | |
| 33223ES | YSFluor™647 Dê kháng IgG người (H+L) | |
| 33313ES | YSFluor™ 647 Kháng thể IgG của dê chống bò (H+L) | |
| 33413ES | YSFluor™ 647 IgG kháng chuột lang ở dê (H+L) | |
| 33713ES | YSFluor™ 647 Thỏ kháng IgG dê (H+L) | |
| 33813ES | YSFluor™647 Thỏ kháng IgG cừu (H+L) | |
| 33913ES | YSFluor™ 647 Thỏ kháng IgG chuột (H+L) | |
| 34713ES | YSFluor™647 IgY kháng gà cho thỏ (H+L) | |
| 34113ES | YSFluor™ 647 Lừa Kháng IgG Chuột (H+L) | |
| 34213ES | YSFluor™ 647 Lừa Kháng IgG Thỏ (H+L) | |
| 34413ES | YSFluor™ 647 Lừa kháng IgG (H+L) | |
| 34813ES | YSFluor™647 Lừa Kháng IgG Người (H+L) | |
| 34913ES | YSFluor™647 Lừa Kháng Cừu IgG (H+L) |
Tài liệu tham khảo
[1]Zhang B, Wang H, Liao Z, và cộng sự.Các hạt nano liên hợp EGFP–EGF1 để nhắm mục tiêu vào cả tế bào tân mạch và tế bào u thần kinh đệm trong liệu pháp điều trị u thần kinh đệm não[J]. Biomaterials, 2014, 35(13): 4133-4145. IF: 8.387[2]Yu X, Wang J, Liu J, et al. Một tác nhân nano dựa trên peptide Pepstatin A đa phương thức để chụp ảnh phân tử P-glycoprotein trong não của chuột mắc bệnh động kinh[J]. Biomaterials, 2016, 76: 173-186. NẾU:8.402
[3]Liu J, He Y, Zhang J, et al. Nanocarrier chức năng hóa kết hợp vectơ đặc hiệu cơn động kinh với đặc tính điều chế P-glycoprotein để cung cấp thuốc chống động kinh[J]. Biomaterials, 2016, 74: 64-76. IF:8.402
[4]Ma Y, Ji Y, You M, et al. Đánh dấu và theo dõi dài hạn các tế bào gốc trung mô tủy xương trong ống nghiệm bằng cách sử dụng các hạt nano chuyển đổi ngược NaYF 4: Yb 3+, Er 3+[J]. Acta biomaterialia, 2016, 42: 199-208. IF: 6.638
[5]Wang Y, Lin YX, Qiao SL, et al. Các hạt nano polyme cho phép đảo ngược đại thực bào trong môi trường vi mô khối u để điều trị miễn dịch[J]. Biomaterials, 2017, 112(15): 3e163. IF:8.806
[6] Liu C, He X, Liu W, et al. Đột biến lưỡng alen ở TTC29 gây ra tình trạng vô sinh ở nam giới với Asthenoteratospermia ở người và chuột[J]. Tạp chí di truyền học con người Hoa Kỳ, 2019, 105(6): 1168-1181. 34106ES60 NẾU:9.924
[7]Xu T, Ding W, Ao X, et al. ARC điều chỉnh hoại tử theo chương trình và tổn thương do thiếu máu cục bộ/tái tưới máu cơ tim thông qua ức chế mở mPTP[J]. Redox biology, 2019, 20: 414-426.IF（7.126）（Alexa Fluor 488）
[8] Tan T, Wang Y, Wang J, et al. Nhắm mục tiêu vào các lipoprotein sinh học được trang trí bằng peptide cải thiện khả năng thâm nhập sâu và khả năng tiếp cận tế bào ung thư trong khối u rắn. Acta Pharm Sin B. 2020;10(3):529-545. Alexa Fluor 488 gắn nhãn IgG (H+L)IF: 7.097
[9] Hydrogel Photoclick để tăng cường miễn dịch vết đơn lẻ [J]. Vật liệu chức năng tiên tiến, 2020, 30.33112ES60 NẾU: 16.836
[10] Bingchen Yi a,b,1, Lei Yuc,1, Han Tanga,et al. Lớp phủ polydopamine pha tạp lysine tăng cường chống huyết khối và nội mô hóa của một mạch máu xơ liên kết bằng điện kéo sợi ghép.. Vật liệu ứng dụng ngày nay, 2021. 33207ES60 NẾU: 10.041