Khi sử dụng enzyme độ trung thực cao truyền thống cho PCR, không thể tránh khỏi việc gặp phải một số vấn đề gai góc. Ví dụ, độ trung thực có thể không đủ, dẫn đến đột biến hoặc xóa trong các bazơ mục tiêu ngay cả sau khi giải trình tự các đoạn được khuếch đại. Thời gian khuếch đại cũng tương đối dài; đôi khi, việc khuếch đại một đoạn 5kb có thể mất gần 2 giờ. Bây giờ, XiaoYi giới thiệu một PCR độ trung thực cao nhanh chóng để giải quyết các vấn đề của bạn! -- Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Hỗn hợp PCR độ trung thực cao siêu nhanh).
Các 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Có thuốc nhuộm) chứa một chỉ thị điện di được thêm vào trước, cho phép các sản phẩm PCR được sử dụng trực tiếp để điện di. Các sản phẩm khuếch đại có đầu tù. Hỗn hợp enzyme có độ trung thực cao này có những ưu điểm là nhanh, đơn giản, độ nhạy cao, độ đặc hiệu mạnh và ổn định. Trong hệ thống phản ứng, chỉ cần thêm các đoạn mồi và khuôn mẫu. Ngoài ra, sản phẩm còn chứa một chất bảo vệ đặc hiệu, đảm bảo rằng hỗn hợp PCR có độ trung thực cao duy trì hoạt động ổn định ngay cả sau nhiều lần đông lạnh và rã đông.
Tính năng sản phẩm
- Cao Độ trung thực: Thấp không phù hợp tỷ lệ, với Một căn cứ không phù hợp tỉ lệ của 231/300.000 TRONG cao GC dễ bị đột biến trình tự;
- Nhanh khuếch đại Tốc độ: Sự mở rộng tỷ lệ BẰNG nhanh BẰNG 5 giây mỗi kb;
- Rộng Khả năng áp dụng: Có khả năng của che phủ gen với 20-80% GC nội dung, chịu đựng chuột chất phân giải Và 20% máu;
- Tốt Sự ổn định: Có thể là được lưu trữ Tại 37°C vì 7 ngày không có ảnh hưởng sản phẩm hiệu suất;
- Nhanh Và Thuận lợi: Đơn giản thêm vào mồi Và bản mẫu vì khuếch đại, đến với đang tải thuốc nhuộm vì trực tiếp điện di.
Trình diễn hiệu suất sản phẩm
Độ trung thực cao, tỷ lệ không khớp thấp
Sử dụng bộ gen của các loài khác nhau làm khuôn mẫu, sáu đoạn giàu GC dễ bị đột biến/mất base đã được chọn để khuếch đại. Các sản phẩm PCR tương ứng đã được nhân bản vào các vectơ và 100 bản sao đơn lẻ cho mỗi trình tự đã được chọn để giải trình tự nhằm xác nhận sự không khớp base/đột biến. Kết quả cho thấy hỗn hợp PCR độ trung thực cao nhanh (10164ES) có tỷ lệ không khớp base/đột biến cao hơn so với các thuốc thử thương hiệu trong nước và quốc tế.
Thời gian kéo dài có thể lên tới 5 giây/kb
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) và Sản phẩm T, các đoạn có chiều dài khác nhau (0,4-10 kb) được khuếch đại từ 100 ng khuôn mẫu DNA bộ gen người với tốc độ kéo dài là 5 giây/kb, với thời gian kéo dài cần thiết là 5 giây/kb. Kết quả cho thấy hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) có thể khuếch đại các đoạn trong phạm vi 10kb với tốc độ kéo dài là 5 giây/kb.
Có thể khuếch đại các đoạn gen có hàm lượng GC khác nhau
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) để khuếch đại các đoạn gen có hàm lượng GC 23-76% từ khuôn mẫu DNA bộ gen người, với thời gian kéo dài được thiết lập ở mức 5 giây/kb. Kết quả cho thấy sản phẩm có độ đặc hiệu khuếch đại tốt và có khả năng khuếch đại các đoạn có hàm lượng GC khác nhau.
Có khả năng khuếch đại các đoạn gen có hàm lượng GC khác nhau
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) để khuếch đại các đoạn có độ dài khác nhau từ các mẫu khác nhau, với thời gian kéo dài được đặt ở mức 5-10 giây cho mỗi kilobase. Kết quả cho thấy sản phẩm này thể hiện tính đặc hiệu khuếch đại tuyệt vời và tương thích với việc khuếch đại các đoạn khác nhau từ nhiều khuôn mẫu khác nhau.
Lưu ý: 1. DNA bộ gen chuột 1 kb; 2. DNA bộ gen chuột 2 kb; 3. DNA bộ gen chuột 6 kb; 4. DNA bộ gen ngô 1 kb; 5. DNA bộ gen lúa 2 kb-A; 6. DNA bộ gen lúa 2 kb-B; 7. cDNA tế bào 293 người 1 kb; 8. cDNA tế bào 293 người 2 kb; 9. cDNA tế bào 293 người 3 kb; 10. cDNA tế bào 293 người 12 kb; 11. Môi trường nuôi cấy E. coli 8 kb; 12. Môi trường nuôi cấy E. coli 16 kb; 13. DNA bộ gen lúa 10 kb-A; 14. DNA bộ gen lúa 10 kb-B; 15. DNA bộ gen lúa 10 kb-C; 16. DNA bộ gen lúa 20 kb-A; 17. DNA bộ gen lúa 20 kb-B; 18. Khuếch đại trực tiếp máu người 3 kb.
Tỷ lệ phát hiện cao của sự khuếch đại mẫu trên các loài khác nhau
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES), các đoạn có hàm lượng GC khác nhau trong khoảng từ 0,5-10 kb ở Arabidopsis, hạt cải dầu và khoai tây đã được khuếch đại, với thời gian kéo dài là 5 giây/kb. Kết quả cho thấy hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) có thể đảm bảo khuếch đại thành công.
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES), các trình tự ngẫu nhiên (được chọn ngẫu nhiên) từ Arabidopsis, hạt cải dầu, ruồi giấm, Caenorhabditis elegans và cá ngựa vằn, với kích thước đoạn từ 0,5-10 kb và bao phủ 20-80% hàm lượng GC, đã được khuếch đại. Thời gian kéo dài được đặt ở mức 5 giây/kb. Kết quả cho thấy hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) có tỷ lệ phát hiện cao.
Độ ổn định tốt
Sử dụng hỗn hợp enzyme độ trung thực cao nhanh (10164ES) được tăng tốc nhiệt bảo quản ở 37℃ trong 3 ngày và 7 ngày để khuếch đại các đoạn DNA 3 kb và 5 kb từ 100 ng DNA bộ gen người, với thời gian kéo dài được thiết lập ở mức 5 giây/kb. Kết quả cho thấy sản phẩm có độ ổn định tốt.
Phản hồi dùng thử của khách hàng
Động vật gDNA-120bp-50%GC
Đánh giá của khách hàng: Quá trình PCR nhanh, các dải phù hợp và có thể được nạp trực tiếp vào điện di gel agarose. Các dải của nhãn hiệu N bị lệch lên trên, có thể là do ảnh hưởng của đệm riêng của nó và vì không có đệm nạp nào được thêm vào, sản phẩm này có thể thay thế enzyme có độ trung thực cao trong giao thức thử nghiệm hiện tại của tôi.
Thực vật cDNA-729bp-45,13%GC
Đánh giá của khách hàng: So với thương hiệu T, dải nhân bản rõ ràng và đồng đều hơn, toàn bộ quá trình PCR nhanh hơn. Không cần thêm thuốc nhuộm khi chạy gel, rất tiện lợi và tiết kiệm thời gian.
vi khuẩn gDNA-1158、1953bp-58,8%、52,9%GC
Đánh giá của khách hàng: So với thương hiệu V thì hiệu quả tương đương, nhưng cá nhân tôi thấy nó còn tốt hơn.
Thực vật cDNA-2000bp-40%GC
Đánh giá của khách hàng: Hiệu quả rất tốt, đường kẻ rõ nét.
Hướng dẫn lựa chọn PCR độ trung thực cao
| Định vị sản phẩm | Tên sản phẩm | Con mèo# |
| 5s/kb, đảm bảo độ trung thực và tốc độ (Với Thuốc nhuộm) | 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Có thuốc nhuộm) | 10164ES |
| 5s/kb, đảm bảo độ trung thực và tốc độ (Không có thuốc nhuộm) | 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix | 10163ES |
| 83×Taq, tỷ lệ phát hiện cao (Với thuốc nhuộm) | 2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Có Thuốc Nhuộm) | 10154ES |
| 83×Enzym đơn Taq + Đệm riêng biệt | 10153ES |