2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Với thuốc nhuộm) là dung dịch pha sẵn 2x có chứa Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase, dNTPs và hệ thống đệm tối ưu, chứa các chỉ thị điện di được thêm vào trước. Hỗn hợp trước có chứa chỉ thị điện di được thêm vào trước, các sản phẩm PCR có thể được điện di trực tiếp, các sản phẩm khuếch đại là các đầu phẳng. 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Với thuốc nhuộm) có ưu điểm là nhanh chóng và dễ dàng, độ nhạy cao, độ đặc hiệu cao, độ ổn định tốt, v.v., hệ thống phản ứng có thể được thêm vào chỉ với các đoạn mồi và khuôn mẫu. Ngoài ra, sản phẩm còn chứa một tác nhân bảo vệ cụ thể, để premix vẫn có thể duy trì hoạt động ổn định sau nhiều lần đông lạnh và rã đông.

Độ trung thực cực cao: Tỷ lệ không khớp thấp ở những người dễ đột biến gen GC cao;
Tốc độ nhanh: Tốc độ nhanh như 5 giây/kb;
Khả năng ứng dụng rộng rãi: Có thể dùng để khuếch đại gen có hàm lượng GC từ 20-80%, dung nạp 20% máu và dịch phân giải của chuột;
Độ ổn định tốt: Bảo quản ở nhiệt độ 37°C trong 7 ngày mà không ảnh hưởng đến hiệu suất;
Dễ sử dụng: Chỉ cần thêm mồi và khuôn mẫu để khuếch đại, với thuốc nhuộm màu xanh để điện di trực tiếp.

Thông số kỹ thuật

Các con số

Hình: Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase có độ trung thực cao so với các sản phẩm của các thương hiệu khác (A). Thử nghiệm được thực hiện bằng cách kiểm tra tần suất đột biến của các sản phẩm PCR của 6 phân đoạn giàu GC (khoảng 80%) được khuếch đại từ bộ gen của các loài khác nhau. Các sản phẩm PCR được khuếch đại bởi Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase được nhân bản vào các vectơ và 100 bản sao đơn được chọn cho mỗi trình tự đã được tiến hành giải trình tự Sanger.

Hieff Canace™ AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase có tốc độ khuếch đại cao (B), khả năng tương thích khuếch đại GC cao (C) và dung nạp máu (D). Kết quả từ PCR và giải trình tự của khách hàng cho thấy DNA Polymerase độ trung thực cao Hieff Canace™ AdvanceFast có hiệu suất tốt về năng suất PCR và độ đặc hiệu (EH).

Kho

Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong vòng 1 năm.

Hướng dẫn

1. Hệ thống phản ứng PCR được đề xuất.

Bảng 1 Hệ thống phản ứng PCR

*Trong hỗn hợp 1× chứa 2 mM Mg2+ và 200 μM dNTP.

**Phạm vi khuyến nghị 10-200 ng, phạm vi thể tích tải mẫu cDNA không quá 1/10 hệ thống phản ứng, khuyến nghị 1-2,5 μL.

***Nồng độ mồi cuối cùng trong hệ thống phản ứng PCR nằm trong khoảng từ 0,2-1 μM và nồng độ khuyến nghị là 0,4 μM.

1. Chương trình phản ứng.

Bảng 2 Chương trình phản ứng PCR

*Nhiệt độ khuyến nghị: 60°C, có thể thiết lập gradient nhiệt độ để tìm nhiệt độ tối ưu cho quá trình ủ mồi. Thời gian ủ khuyến nghị được đặt thành 5 giây và có thể điều chỉnh từ 5-30 giây. Thời gian ủ quá dài có thể dẫn đến sản phẩm khuếch đại khuếch tán trên gel.

**Thời gian mở rộng: Khuyến nghị là 5 giây/kb, cũng có thể mở rộng lên 10 giây/kb nếu cần.

Ghi chú

1. Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu.
2. Vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần để đảm bảo an toàn.

Tài liệu:

10164ES-Phiên bản 20230720.pdf

Trích dẫn & Tài liệu tham khảo:

[1] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. Một mô-đun SHR-SCR chỉ định số phận tế bào vỏ cây họ đậu để cho phép tạo nốt sần. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z(IF:42.779)

[2] Sun L, Yan Y, Lv H, et al. Rapamycin nhắm mục tiêu STAT3 và tác động đến c-Myc để ngăn chặn sự phát triển của khối u. Cell Chem Biol. 2022;29(3):373-385.e6. doi:10.1016/j.chembiol.2021.10.006(NẾU:8.116)

[3] Ye M, Xiong L, Dong Y, et al. Vai trò tiềm tàng của gen Methionine Aminopeptidase PxMetAP1 trong sâu bệnh toàn cầu đối với khả năng chịu độc tố của Bacillus thuringiensis. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13005. Xuất bản ngày 27 tháng 10 năm 2022. doi:10.3390/ijms232113005(IF:6.208)

[4] He Y, Zhou J, Fu R, et al. Ứng dụng của các đầu dò AuNP chức năng hóa DNA-HRP trong phát hiện màu của gen Alternaria liên quan đến cam quýt. Talanta. 2022;237:122917. doi:10.1016/j.talanta.2021.122917(NẾU:6.057)

[5] Guo L, Yang W, Huang Q, et al. Phổ khối đặc hiệu selenocysteine ​​tiết lộ các selenoproteome riêng biệt với mô và các selenoprotein ứng cử viên. Cell Chem Biol. 2018;25(11):1380-1388.e4. doi:10.1016/j.chembiol.2018.08.006(NẾU: 5.592)

[6] Dou W, Zhu Q, Zhang M, Jia Z, Guan W. Sàng lọc và đánh giá các chất kích thích nội sinh mạnh ở Pichia pastoris. Sự thật về tế bào vi mô. 2021;20(1):156. Xuất bản ngày 9 tháng 8 năm 2021. doi:10.1186/s12934-021-01648-6(NẾU:5.328)

[7] Xiong Y, Yi Y, Wang Y, Yang N, Rudd CE, Liu H. Ubc9 tương tác với và SUMOyl hóa bộ điều hợp TCR SLP-76 để phiên mã NFAT trong tế bào T. J Immunol. 2019;203(11):3023-3036. doi:10.4049/jimmunol.1900556(NẾU: 4.718)

[8] Huang L, Xiang M, Ye P, Zhou W, Chen M. Beta-catenin thúc đẩy phản ứng viêm cấp tính do đại thực bào trung gian sau nhồi máu cơ tim. Immunol Cell Biol. 2018;96(1):100-113. doi:10.1111/imcb.1019(NẾU:4.557)

[9] Wang X, Du A, Yu G, Deng Z, He X. Sự N-methyl hóa của Guanidine bởi BlsL phụ thuộc vào sự axyl hóa của Beta-amine Arginine trong quá trình sinh tổng hợp Blasticidin S. Front Microbiol. 2017;8:1565. Xuất bản ngày 22 tháng 8 năm 2017. doi:10.3389/fmicb.2017.01565(NẾU: 4.076)

[10] Yu P, Zhou L, Yang WT, et al. Phân tích mitogenome so sánh khám phá ra các đặc điểm mitogenome và ý nghĩa phát sinh loài của phân họ Cobitinae. BMC Genomics. 2021;22(1):50. Xuất bản ngày 14 tháng 1 năm 2021. doi:10.1186/s12864-020-07360-w(NẾU: 3,969)

[11] Liu G, Liu Y, Niu B, et al. Đột biến gen của TRPV2 gây ra lo lắng bằng cách giảm biểu hiện GABA-B R2 ở hồi hải mã. Biochem Biophys Res Commun. 2022;620:135-142. doi:10.1016/j.bbrc.2022.06.079(NẾU: 3.575)

[12] Tan KS, Zhang Y, Liu L, et al. Nhân bản phân tử và đặc tính của một protein giống butyrylcholinesterase không điển hình ở cá ngựa vằn. Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 2021;255:110590. doi:10.1016/j.cbpb.2021.110590(NẾU:2.231)