PCR định lượng huỳnh quang là một thí nghiệm có độ nhạy cao, đòi hỏi độ chính xác cao trong thao tác của nhân viên phòng thí nghiệm. Do đó, trong quá trình thí nghiệm qPCR, chúng tôi không tránh khỏi gặp phải các vấn đề sau:

I. Các vấn đề liên quan đến các yếu tố phi thực nghiệm

  • Phòng thí nghiệm có nhiều dự án thí nghiệm qPCR và các thiết bị đều hết chỗ, khiến hỗn hợp phản ứng được chuẩn bị cẩn thận không có phương pháp xử lý rõ ràng.
  • Có rất nhiều mẫu định lượng, nhiệm vụ thêm mẫu rất khó khăn và có nguy cơ xảy ra lỗi khi thêm mẫu do chóng mặt, dẫn đến kết quả thí nghiệm không đáng tin cậy.
  • Thời gian chạy máy dài, số lần chạy thử nghiệm hạn chế và các nhiệm vụ thử nghiệm không thể được hoàn thành theo kế hoạch một cách thường xuyên.
  • Các thiết bị phòng thí nghiệm đang được thay thế bằng các thiết bị mới, có nhiều thiết bị định lượng trong phòng thí nghiệm và các thuốc thử định lượng không tương thích với các thiết bị.

II. Các vấn đề bị giới hạn bởi các yếu tố thực nghiệm

Các vấn đề định lượng với gen có số lượng thấp. Thiết kế mồi phức tạp và quy trình sàng lọc, độ nhạy và khả năng tái tạo của giếng sao chép...

Là một nhà sản xuất dày dạn kinh nghiệm chuyên nghiên cứu và phát triển thuốc thử qPCR, Yeasen đã tỉ mỉ phát triển một giải pháp premix qPCR hiệu suất cao – Hieff UNICON™ Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix, có thể giải quyết những vấn đề thử nghiệm đã đề cập ở trên chỉ trong một lần. Universal ROX được sử dụng trong sản phẩm này thay thế ROX truyền thống, bù đắp cho sự khác biệt về đường dẫn quang học trên nhiều nền tảng thiết bị khác nhau, khiến nó phù hợp với tất cả các thiết bị qPCR. Ngoài ra, sản phẩm sử dụng phương pháp biến đổi kháng thể và bao gồm các chất phụ gia giúp tăng cường khuếch đại gen, cải thiện đáng kể hiệu suất khuếch đại của sản phẩm. Nó cân bằng hoàn hảo nhu cầu hiệu suất cao của các nhà nghiên cứu trong cộng đồng khoa học với các yêu cầu hiệu suất cao của các doanh nghiệp công nghiệp.

Tính năng sản phẩm

  • Rộng dụng cụ khả năng tương thích: Các trộn sẵn chứa Một cụ thể kiểu của thẩm quyền giải quyết thuốc nhuộm, loại bỏ cái nhu cầu ĐẾN điều chỉnh cái ROX sự tập trung.
  • Dễ Theo dõi: Các màu xanh da trời trộn sẵn cho phép vì trực tiếp sự hình dung ĐẾN phân biệt liệu cái vật mẫu có là đã thêm, đơn giản qua quan sát cái màu sắc.
  • Cao Sự ổn định: Các hệ thống là chuẩn bị Tại phòng nhiệt độ, Và cái hỗn hợp hệ thống Có thể là được lưu trữ Tại 4°C vì hướng lên ĐẾN 24 giờ không có bất kì thay đổi TRONG cái Bài kiểm tra kết quả.
  • Nhanh Cài đặt: Tương thích với cả hai tiêu chuẩn Và nhanh chương trình, cho phép cái định lượng cuộc thí nghiệm ĐẾN là hoàn thành TRONG BẰNG nhanh BẰNG 46 phút.
  • Xuất sắc khuếch đại Hiệu suất: Cao sự khuếch đại hiệu quả, Tốt tính đặc thù, có khả năng của phát hiện gen Tại cái đơn sao chép con số.

Thông tin đặt hàng

Định vị sản phẩm

Tên sản phẩm

Con mèo#

Premix định lượng phổ thông độ nhạy cao

Hieff UNICON™ Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix

11184ES

Theo dõi màu sắc Độ nhạy cao Huỳnh quang định lượng Premix

Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Không có Rox)

11188ES

Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Rox thấp)

11189ES

Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (High Rox)

11190ES

Hiệu suất sản phẩm

1. Độ nhạy cao: có khả năng phát hiện tới một bản sao duy nhất

Hình 1. Hieff UNICON™ Premix Universal Blue có thể phát hiện hiệu quả phạm vi lượng mẫu trên 7 cấp độ, với hiệu suất khuếch đại cao và mối quan hệ tuyến tính tốt trong phạm vi tuyến tính rộng. Mẫu được sử dụng là 2 µL plasmid với nồng độ từ 10^6 đến 10^0 bản sao, khuếch đại gen IL23R của người.

2.Các phát hiện tỷ lệ Và tính đặc thù là Tốt: rộng rãi áp dụng ĐẾN bộ khuếch đại với 30-70% GC nội dung

Hình 2. Hieff UNICON™ Premix Universal Blue có thể áp dụng rộng rãi cho các bộ khuếch đại có hàm lượng GC 30-70%, đảm bảo tỷ lệ phát hiện độ đặc hiệu cực cao. Sử dụng 2 µL cDNA 293T làm khuôn mẫu, 1000 cặp mồi cho bộ khuếch đại 200 bp (hàm lượng GC% 30%-70%) được thiết kế bằng phần mềm Primer5 và 27 bộ khuếch đại này được khuếch đại ngẫu nhiên.

3. Độ phân giải cao: Có thể phân biệt chính xác sự khác biệt về nồng độ mẫu gấp 2 lần

Hình 3. Hieff UNICON™ Premix Universal Blue có thể phân biệt chính xác sự khác biệt về nồng độ khuôn mẫu gấp 2 lần. Khuôn mẫu được sử dụng là pha loãng gradient gấp 2 lần 2 µL dung dịch gốc cDNA 293T, khuếch đại gen GAPDH.

4. Khả năng tái tạo tốt của các giếng trùng lặp: 90 giếng trùng lặp

Hình 4. Hieff UNICON™ Premix Universal Blue cho thấy khả năng tái tạo tuyệt vời, với đường cong khuếch đại của 90 giếng trùng lặp cho thấy sự trùng hợp cao và độ lệch chuẩn của giá trị Ct nhỏ hơn 0,2. Sử dụng 1 µL cDNA 293T làm khuôn mẫu, gen GAPDH đã được khuếch đại.

5.Độ ổn định tốt: Hỗn hợp trước vẫn không bị ảnh hưởng đến hiệu suất khuếch đại ngay cả sau khi đông lạnh và rã đông 50 lần

Chu kỳ đóng băng-tan băng

0 thời gian

10 lần

30 lần

50 lần

Ct trung bình

23.11

23.17

23.18

23,25

▲Ct

-

0,06

0,07

0,14

Hình 5. Hieff UNICON™ Premix Universal Blue không cho thấy sự thay đổi nào về hiệu suất khuếch đại sau khi được đông lạnh và rã đông 50 lần. Sử dụng 1 µL cDNA 293T làm khuôn mẫu, gen C2orf68 được khuếch đại bằng premix đã trải qua nhiều chu kỳ đông lạnh-rã đông khác nhau.

Khách hàng Fquay lại

Nguồn mẫu: Dòng tế bào ung thư buồng trứng chuột ID8, HM1

Nguồn mẫu: RNA mô mỡ mào tinh hoàn chuột

Nguồn mẫu: RNA lá Arabidopsis thaliana

Tài liệu có hệ số tác động cao được xuất bản một phần bằng Yeasen qPCR Trộn

[1] Li Y, Wang D, Ping X, et al. Liệu pháp tăng nhiệt tại chỗ gây ra hiện tượng chuyển màu nâu của mỡ trắng và điều trị béo phì. Cell. 2022;185(6):949-966.e19.doi:10.1016/j.cell.2022.02.004.(NẾU=66.850)

[2] Seki T, Yang Y, Sun X, et al. Ức chế khối u do chất béo nâu trung gian bằng quá trình trao đổi chất toàn cầu bị thay đổi lạnh. Nature. 2022;608(7922):421-428. doi:10.1038/s41586-022-05030-3. (NẾU=69.504)

[3] Chen P, Wang W, Liu R, et al. Trải nghiệm cảm giác khứu giác điều chỉnh sự hình thành khối u thần kinh đệm thông qua IGF1 thần kinh. Thiên nhiên. 2022;606(7914):550-556. doi:10.1038/s41586-022-04719-9.(NẾU=69.504)

[4] Dong W, Zhu Y, Chang H, et al. Một mô-đun SHR-SCR chỉ định số phận tế bào vỏ cây họ đậu để cho phép tạo nốt sần. Nature. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z.(NẾU=69.504)

[5] Lu XY, Shi XJ, Hu A, et al. Việc ăn uống gây ra quá trình tổng hợp cholesterol thông qua trục mTORC1-USP20-HMGCR. Nature. 2020;588(7838):479-484. doi:10.1038/s41586-020-2928-y.(NẾU=69.504)

[6] Bi X, Wang K, Yang L, et al. Theo dõi dấu vết di truyền của động vật có xương sống hạ cánh ở cá vây tia không phải xương sống xương dài. Cell. 2021;184(5):1377-1391.e14. doi:10.1016/j.cell.2021.01.046.(NẾU=66.850)

[7] Liu S, Hua Y, Wang J, et al. RNA polymerase III là cần thiết cho việc sửa chữa các đứt gãy mạch đôi DNA bằng tái tổ hợp tương đồng. Cell. 2021;184(5):1314-1329.e10. doi:10.1016/j.cell.2021.01.048.(NẾU=66.850)

[8] Liu CX, Li X, Nan F, et al. Cấu trúc và sự thoái hóa của RNA vòng điều chỉnh sự kích hoạt PKR trong miễn dịch bẩm sinh. Tế bào. 2019;177(4):865-880.e21. doi:10.1016/j.cell.2019.03.046.(NẾU=66.850)

[9] Han X, Wang R, Zhou Y, et al. Lập bản đồ Atlas tế bào chuột bằng Microwell-Seq. Cell. 2018;172(5):1091-1107.e17. doi:10.1016/j.cell.2018.02.001.(NẾU=66.850)

[10] Chai Q, Yu S, Zhong Y, et al. Một phospholipid phosphatase của vi khuẩn ức chế pyroptosis của vật chủ bằng cách chiếm đoạt ubiquitin. Khoa học. 2022;378(6616):eabq0132.doi:10.1126/science.abq0132.(NẾU=63.714)

[11] Yu Q, Liu S, Yu L, et al. Việc khử metyl RNA làm tăng năng suất và sinh khối của cây lúa và cây khoai tây trong các thử nghiệm thực địa. Nat Biotechnol. 2021;39(12):1581-1588. doi:10.1038/s41587-021-00982-9.(NẾU=68.164)

[12] Han F, Liu X, Chen C, et al. Nguy cơ tăng cholesterol máu liên quan đến GPR146 là một thụ thể ghép nối protein G mồ côi điều chỉnh mức cholesterol trong máu ở người và chuột. Cell Res. 2020;30(4):363-365. doi:10.1038/s41422-020-0303-z.(NẾU=46.297)

[13] Wang Z, Lu Z, Lin S, et al. Các tế bào B biểu hiện leucine-tRNA-synthase-2 góp phần vào khả năng trốn tránh miễn dịch của ung thư trực tràng. Miễn dịch. 2022;55(6):1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017.(NẾU=43,474)

[14] Bi Q, Wang C, Cheng G, et al. PDGFB có nguồn gốc từ tế bào vi giao cảm thúc đẩy dòng kali của tế bào thần kinh để ức chế trương lực giao cảm cơ bản và hạn chế tăng huyết áp. Miễn dịch. 2022;55(8):1466-1482.e9. doi:10.1016/j.immuni.2022.06.018.(NẾU=43,474)

[15] Wang X, Ni L, Wan S, et al. Nhiệt độ sốt kiểm soát quan trọng sự biệt hóa và tính gây bệnh của tế bào T Helper 17. Miễn dịch. 2020;52(2):328-341.e5. doi:10.1016/j.immuni.2020.01.006.(NẾU=43,474)

[16] Xiao J, Li W, Zheng X, et al. Nhắm mục tiêu vào 7-Dehydrocholesterol Reductase tích hợp quá trình chuyển hóa cholesterol và kích hoạt IRF3 để loại bỏ nhiễm trùng. Miễn dịch. 2020;52(1):109-122.e6. doi:10.1016/j.immuni.2019.11.015.(NẾU=43,474)

[17] Zhang X, Zhang C, Qiao M, et al. Sự suy giảm BATF trong tế bào CAR-T làm tăng hoạt động chống khối u bằng cách gây ra khả năng chống lại sự suy giảm và hình thành các tế bào nhớ trung tâm. Tế bào ung thư. 2022;40(11):1407-1422.e7. doi:10.1016/j.ccell.2022.09.013.(NẾU=38.585)

[18] Wang XY, Wei Y, Hu B, et al. Đường phân do c-Myc thúc đẩy phân cực các tế bào B điều hòa chức năng kích hoạt phản ứng viêm gây bệnh. Signal Transduct Target Ther. 2022;7(1):105. Xuất bản ngày 18 tháng 4 năm 2022. doi:10.1038/s41392-022-00948-6.(NẾU=38.104)

[19] Fan H, Hong B, Luo Y, et al. Tác dụng của protein whey đối với nhiễm trùng và sao chép virus của SARS-CoV-2 và coronavirus tê tê trong ống nghiệm. Signal Transduct Target Ther. 2020;5(1):275. Xuất bản ngày 24 tháng 11 năm 2020. doi:10.1038/s41392-020-00408-z.(NẾU=38.104)

[20]Ren Y, Wang A, Wu D, et al. Ức chế kép miễn dịch bẩm sinh và apoptosis bởi protein cytomegalovirus ở người UL37x1 cho phép sao chép virus hiệu quả. Nat Microbiol. 2022;7(7):1041-1053. doi:10.1038/s41564-022-01136-6.(NẾU=30,964)

Cuộc điều tra