Wnt3a của con người thể hiện trong các tế bào HEK293 thể hiện hoạt động cao thúc đẩy canh tác organoids

Organoid là mô hình ba chiều được tạo ra trong ống nghiệm rất giống với các mô hoặc cơ quan tự nhiên và chúng có ý nghĩa quan trọng trong lĩnh vực mô hình hóa bệnh, trẻ hóa cơ quan và chăm sóc y tế cá nhân hóa. Việc nuôi cấy các organoid này đòi hỏi phải quản lý cẩn thận một loạt các cytokine khác nhau, trong đó Wnt3a nổi bật là một yếu tố thường được sử dụng, đóng vai trò quan trọng trong việc nuôi dưỡng các organoid có nguồn gốc từ nhiều loại mô.

Wnt-3a là gì?

Wnt-3a thuộc họ Wnt, một nhóm protein tiết ra bao gồm 19 biến thể ở người, bao gồm Wnt1, Wnt2, Wnt2b (Wnt13), Wnt3, Wnt3a, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b, Wnt6, Wnt7a, Wnt7b, Wnt8a, Wnt8b, Wnt9a (còn được gọi là Wnt14), Wnt9b (Wnt14b), Wnt10a, Wnt10b, Wnt11 và Wnt16. Họ này được đặc trưng bởi tính bảo tồn và thành phần giàu cysteine. Protein Wnt tạo điều kiện cho con đường truyền tín hiệu Wnt bằng cách liên kết với các thụ thể màng tế bào hoặc các thụ thể màng tế bào lân cận. Con đường này có thể được phân loại thành con đường chính thống, được trung gian bởi β-catenin, bao gồm Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b và Wnt10a, và con đường không chính thống, độc lập với β-catenin, bao gồm Wnt4, Wnt5a, Wnt6 và Wnt11. Wnt3a, là thành viên cốt lõi của họ Wnt, phân bố khắp nơi và đóng vai trò quan trọng trong việc điều khiển các chức năng khác nhau của tế bào, chẳng hạn như tự đổi mới, tăng sinh, biệt hóa và vận động.

Cơ chế chuyển đổi đường dẫn tín hiệu Wnt-3a

Con đường truyền tín hiệu Wnt là một mạng lưới đa diện của các tương tác protein chủ yếu liên quan đến sự phát triển phôi và ung thư. Tuy nhiên, nó cũng đóng một vai trò trong các quá trình sinh lý bình thường ở các sinh vật trưởng thành. Wnt3a liên kết với thụ thể của nó, protein Frizzled (Fz), cùng với protein đồng thụ thể lipoprotein liên quan đến thụ thể (LRP5/6), sau đó kích hoạt protein khung Disheveled (Dvl). Sự kích hoạt này dẫn đến sự tháo rời của "phức hợp phá hủy", bao gồm Casein kinase 1 (CK1), glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β) và các protein khung adenomatous polyposis coli (APC), Axin1 và Axin2. Việc hòa tan phức hợp này sẽ ổn định protein β-Catenin tự do trong tế bào chất. β-Catenin tích tụ trong tế bào chất sau đó chuyển vào nhân, tại đó nó liên kết với các yếu tố phiên mã của họ TCF/LEF, cuối cùng kích hoạt các gen mục tiêu hạ lưu như c-myc và Cyclin D1. Chuỗi phản ứng này gây ra các phản ứng tế bào tiếp theo. Tóm lại, con đường truyền tín hiệu Wnt có thể được đơn giản hóa như sau: Wnt3a→FZD→DVL→giải thể phức hợp→β-Catenin đi vào nhân→TCF/LEF→phiên mã gen hạ lưu. Nếu không có Wnt3a, β-catenin thường bị phân hủy trong tế bào chất bởi "phức hợp phá hủy", nhắm mục tiêu vào nó để ubiquitin hóa và phân hủy tiếp theo trong proteasome. Do đó, nó không thể đi vào nhân để bắt đầu phiên mã các gen hạ lưu. Con đường truyền tín hiệu Wnt/β-catenin được bảo tồn cao trong suốt quá trình tiến hóa và đóng vai trò cơ bản trong quá trình phát triển phôi, tăng trưởng tế bào, biệt hóa, hình thành phân cực, phát triển thần kinh và gây ung thư.

Wnt3a và Organoids

Wnt3a giữ vị trí trung tâm như một trong những yếu tố nuôi cấy được sử dụng thường xuyên nhất để tạo ra organoid. Hoạt động cao, tính nhất quán giữa các mẻ, không bị nhiễm bẩn và chế phẩm không có huyết thanh là những yếu tố chính góp phần vào sự thành công của các thí nghiệm organoid.Wnt3a đã được sử dụng rộng rãi trong các nền văn hóa organoid của nhiều mô khác nhau, bao gồm ruột, dạ dày, tuyến tụy, gan, tuyến giáp, thực quản và hệ thần kinh. Trong nỗ lực hỗ trợ các nhà nghiên cứu khoa học và các công ty dược phẩm trong các nghiên cứu của họ về ứng dụng lâm sàng của Wnt3a trong quá trình hình thành organoid và nghiên cứu khối u, Yeasen đã giới thiệu sản phẩm protein Wnt3a có hoạt tính cao (Danh mục: 92276ES) được thiết kế để tạo điều kiện thuận lợi cho nuôi cấy cơ quan.

Hình 3. Được đo bằng khả năng kích thích hoạt động của phóng viên Topflash trong tế bào thận phôi người HEK293T. ED50 cho hiệu ứng này là 25 ng/mL.

Xác nhận nuôi cấy cơ quan

Yeasen Các cytokine đã được xác minh trên các cơ quan khối u của con người như ung thư phổi, ung thư cổ tử cung, ung thư buồng trứng, ung thư tuyến tụy và ung thư ruột, cũng như các cơ quan bình thường như các cơ quan ruột non của người và chuột.

Cytokine liên quan thông tin