Sự miêu tả
Mô tả sản phẩm
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (With Dye) là dung dịch pha sẵn 2× có chứa Hieff Canace™ Cộng với DNA Polymerase độ trung thực cao, dNTP và hệ thống đệm được tối ưu hóa. Hỗn hợp này bao gồm hai kháng thể đơn dòng ức chế hoạt động của polymerase và hoạt động của exonuclease 3'→5' ở nhiệt độ phòng, cho phép thực hiện PCR Hot Start có độ đặc hiệu cao. Việc bổ sung các yếu tố kéo dài cho phép khuếch đại đoạn dài, với các đoạn mục tiêu lên đến 13 kb. Enzym này thể hiện hoạt động của DNA polymerase 5'→3' và hoạt động của exonuclease 3'→5', với độ trung thực gấp 83 lần so với Taq DNA polymerase và gấp 9 lần so với Pfu DNA polymerase thông thường. Nó phù hợp để khuếch đại các khuôn mẫu phức tạp, tạo ra các sản phẩm PCR đầu cụt.
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Với thuốc nhuộm) cung cấp các ưu điểm như tính đơn giản, độ nhạy cao, độ đặc hiệu mạnh và độ ổn định tuyệt vời. Hệ thống phản ứng chỉ yêu cầu thêm mồi và khuôn mẫu, và có thể sử dụng giao thức PCR hai bước để đơn giản hóa quy trình và tiết kiệm thời gian. Sản phẩm bao gồm thuốc nhuộm theo dõi điện di, cho phép tải trực tiếp các sản phẩm PCR để phân tích gel. Ngoài ra, nó chứa một tác nhân bảo vệ đặc biệt đảm bảo hoạt động ổn định ngay cả sau nhiều chu kỳ đông lạnh-rã đông.
Thông số kỹ thuật
| Mèo.Nôi. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| Kích cỡ | 100 μL / 1 mL / 5×1 mL / 100×1 mL |
Kho
Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong 1 năm.
Hướng dẫn
1. Hệ thống phản ứng PCR được đề xuất.
| Thành phần | Âm lượng（μL) | Cuối cùng sự tập trung |
| 2× Hieff Canace™ Thêm vào đó PCR Master Mix (Với Thuốc Nhuộm)* | 25 | 1× |
| Bản mẫu*** | x | - |
| Phía trước Primer（10 mol/L)** | 2 | 0.4 mol/L |
| Rngược lại Primer（10 mol/L)** | 2 | 0,4 mol/L |
| ĐD2Ồ | Lên đến 50 | - |
*Nồng độ cuối cùng 1× của hỗn hợp chứa 1 U/50 μL polymerase, 2 mmol/L Mg2+và 200 μmol/L dNTP.
**Nồng độ cuối cùng được khuyến nghị của các chất mồi trong phản ứng PCR là 0,2-1 μmol/L, trong đó nồng độ 0,4 μmol/L được ưa chuộng.
***Lượng mẫu được khuyến nghị cho hệ thống phản ứng 25 μL:
| Kiểu mẫu | Kích thước phân đoạn (1 kb-10 kb) |
| ADN bộ gen | 50 ng-200 ng |
| Plasmid hoặc DNA virus | 10 pg-20 ng |
| cADN | 1-2,5 μL (không vượt quá 1/10 tổng thể tích PCR) |
2. Chương trình phản ứng.
1）Giao thức hai bước (Ưu tiên):
| Xe đạp bước chân | Tnhân viên | Thời gian | Chu kỳ |
| Biến tính ban đầu | 98℃ | 3 phút | 1 |
| Sự biến tính | 98℃ | 10 giây | 30-35 |
| Sự mở rộng | 68℃ | 30 giây/kb | |
| Final vàphần mở rộng | 72℃ | 5 phút | 1 |
2）Giao thức ba bước (thông thường):
| Xe đạp bước chân | Tnhân viên | Thời gian | Chu kỳ |
| Biến tính ban đầu* | 98℃ | 3 phút | 1 |
| Sự biến tính | 98℃ | 10 giây | 30-35 |
| Ủ** | 60℃ | 20 giây | |
| Sự mở rộng*** | 72℃ | 30 giây/kb | |
| Final vàphần mở rộng | 72℃ | 5 phút | 1 |
*Biến tính ban đầu: Khuyến nghị ở 98°C trong 3 phút (5-10 phút đối với mẫu GC cao).
**Ủ: Khuyến nghị ở nhiệt độ 60°C trong 20 giây (có thể điều chỉnh trong khoảng 10-30 giây). Ủ kéo dài có thể gây ra hiện tượng nhòe trên gel.
***Mở rộng: Khuyến nghị ở 72°C trong 30 giây/kb (tối đa 60 giây/kb đối với các mẫu phức tạp).
3）Giao thức ủ gradient (khuyến nghị cho các mục tiêu khó):
| Xe đạp bước chân | Tnhân viên | Thời gian | Chu kỳ |
| Biến tính ban đầu | 98℃ | 3 phút | 1 |
| Sự biến tính | 98℃ | 10 giây | 15 (giảm 1°C mỗi chu kỳ) |
| Ủ Gradient | 70-55°C | 20 giây | |
| Sự mở rộng | 72℃ | 30 giây/kb | |
| Sự biến tính | 98°C | 10 giây | 20 |
| Ủ | 55°C | 20 giây | |
| Sự mở rộng | 72°C | 30 giây/kb | |
| Final vàphần mở rộng | 72℃ | 5 phút | 1 |
4）Đặc điểm của các giao thức PCR khác nhau:
| Loại giao thức | Tốc độ | Tính đặc hiệu | Năng suất PCR | Tỷ lệ phát hiện |
| Hai bước | Nhanh nhất | Cao | Trung bình | Cao |
| Ba bước | Trung bình | Trung bình | Cao nhất | Trung bình |
| Ủ Gradient | Chậm | Cao | Trung bình | Cao |
Ghi chú
1.Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu.
2. Vui lòng sử dụng áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần，vì sự an toàn của bạn.
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.