Sự miêu tả
Bộ dụng cụ này có thể trực tiếp và nhanh chóng tiến hành khuếch đại PCR mô chuột (như đuôi chuột, tai chuột, ngón chân chuột, cơ, v.v.) và có khả năng tương thích mẫu mạnh. Được trang bị đệm ly giải mạnh mẽ, bộ dụng cụ này có thể ly giải mẫu nhanh chóng và giải phóng DNA bộ gen. Chất ly giải có thể được thêm trực tiếp vào hệ thống phản ứng PCR mà không cần tinh chế và thao tác rất thuận tiện. Ngoài ra, bộ dụng cụ này yêu cầu đầu vào mẫu thấp và có thể sử dụng 5 mg mô chuột hoặc 1-5 mm đuôi chuột cho các thí nghiệm.
Bộ sản phẩm này cung cấp dung dịch PCR trực tiếp chuột 2× là dung dịch phản ứng PCR khởi động nóng với nồng độ gấp 2 lần. Dung dịch này chứa tất cả các thành phần được sử dụng để khuếch đại PCR ngoại trừ khuôn mẫu và mồi, giúp đơn giản hóa đáng kể quy trình vận hành và giảm nguy cơ nhiễm bẩn. Bộ sản phẩm có thể được sử dụng để xác định gen chuyển, phân tích kiểu gen chuột, v.v.
Đặc trưng
- Yêu cầu ít mẫu hơn: 5 mg mô chuột hoặc 1-5 mm đuôi chuột
- Chuẩn bị mẫu thuận tiện: không cần nghiền, không cần tinh chế và làm sạch DNA, thông lượng cao hơn, tiết kiệm thời gian và tiền bạc
- Hệ thống PCR được tối ưu hóa: có độ đặc hiệu cao hơn và khả năng dung nạp chất ức chế phản ứng PCR mạnh hơn
Ứng dụng
- Xác định chuột chuyển gen
- Phân tích kiểu gen của chuột
- Phân tích loại bỏ gen chuột
Thông số kỹ thuật
| Thông số kỹ thuật sản phẩm | Bộ dụng cụ |
| Khởi đầu nóng | Khởi động nóng tích hợp |
| Điều kiện vận chuyển | Gói đá |
| Loại sản phẩm | Bộ PCR trực tiếp |
| Áp dụng ĐẾN (ứng dụng) | Đuôi chuột, tai chuột, ngón chân chuột, nội tạng, da, v.v. |
Thành phần
| Số thành phần | Tên | 10185ES50 | 10185ES70 |
| 10185-A | Bộ đệm Máy tính | 5×1 mL | 20×1mL |
| 10185-B | Bộ đệm MT | 0,6ml | 2×1,25ml |
| 10185-C | 2× Hỗn hợp PCR trực tiếp của chuột | 500 μL | 2×1 mL |
- a) Đệm ML là đệm phân hủy có chứa chất biến tính protein mạnh, vui lòng đeo găng tay.
- b) Đệm MT là đệm dừng được sử dụng để dừng chức năng phân hủy của đệm ML.
- c) 2× Hỗn hợp PCR trực tiếp của chuột: Chứa DNA polymerase Taq khởi động nóng, hỗn hợp dNTP, MgCl2, đệm phản ứng, chất tăng cường phản ứng PCR, chất tối ưu hóa, chất ổn định, thuốc nhuộm chỉ thị điện di, v.v.
Kho
- Thành phần A: Sản phẩm phải Bảo quản ở nhiệt độ 2°C~8°C trong một năm. Sử dụng nhiều lần trong thời gian dài, vui lòng tránh lây nhiễm chéo.
- Thành phần B/C: Sản phẩm nên được lưu trữ tại-25℃ ~ -15℃ trong một năm. Vui lòng tránh đông lạnh-tan băng nhiều lần.
Các con số
1. Kết quả khuếch đại gen mục tiêu (trong vòng 1 kb)
Hình 1.Thích hợp cho việc khuếch đại gen mục tiêu trong phạm vi 1 kb.
2. Trình diễn tốc độ mở rộng
Hình 2. Gen 500bp, tốc độ kéo dài có thể nhanh tới 1 giây/kb.
Trích từ "TFPI là thụ thể hốc đại tràng cho TcdB từ nhóm siêu độc lực 2 C. difficile. Cell . 2022 ngày 17 tháng 3;185(6):980-994.e15. doi: 10.1016/j.cell.2022.02.010. "
[1] Luo J, Yang Q, Zhang X, et al. TFPI là thụ thể hốc ruột kết đối với TcdB từ nhóm siêu độc lực 2 C. khó khăn. Tế bào. 2022;185(6):980-994.e15. doi:10.1016/j.cell.2022.02.010(IF:41.584)
[2] Zhao J, Chen J, Li YY, Xia LL, Wu YG. Tyrosine kinase của Bruton điều chỉnh tình trạng viêm do đại thực bào gây ra ở thận tiểu đường thông qua hoạt hóa NLRP3 inflammasome. Int J Mol Med. 2021;48(3):177. doi:10.3892/ijmm.2021.5010(IF:4.101)
| Vấn đề thường gặp | Lý do có thể | Giải pháp |
| Không có dải nào trong mẫu đối chứng dương tính và các mẫu cần thử nghiệm. | Hệ thống phản ứng PCR hoặc điều kiện phản ứng không phù hợp. | Sử dụng PCR gradient để khám phá các điều kiện phản ứng tối ưu cho PCR. |
| Việc bảo quản thuốc thử PCR không đúng cách sẽ làm mất hoạt tính. | Hỗn hợp PCR trực tiếp chuột 2× nên được bảo quản ở nhiệt độ -20°C và tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần trong quá trình sử dụng. Nếu sử dụng thường xuyên, có thể bảo quản ở nhiệt độ 4°C trong thời gian ngắn. | |
| Các vấn đề thiết kế cơ bản. | Hãy thử thiết kế lại các đoạn mồi để kiểm tra. | |
| Mẫu đối chứng dương tính có dải quan tâm, còn mẫu cần thử nghiệm không có dải hoặc có dải yếu. | Bảo quản không đúng cách hoặc bảo quản trong thời gian dài có thể làm mất hoạt tính của thuốc thử. | Sử dụng thuốc thử mới. |
| Thêm lượng dịch phân hủy mô dư. | Tăng cường hệ thống phản ứng hoặc giảm lượng chất phân hủy. | |
| Hỗn hợp mẫu phân hủy đã được lưu trữ không đúng cách hoặc lưu trữ quá lâu, khiến bộ gen DNA bị phân hủy. | Hỗn hợp dịch phân hủy có thể được bảo quản ở nhiệt độ 4°C trong 2-3 ngày.Cố gắng sử dụng hỗn hợp dịch ly giải mới chuẩn bị cho PCR. | |
| Số lượng mẫu được thêm vào không phù hợp. | Lượng mẫu bổ sung được tối ưu hóa trong phạm vi 1-10% của hệ thống phản ứng. | |
| Số chu kỳ PCR không đủ. | Tăng số chu kỳ PCR, tốt nhất là 35-40 chu kỳ. Do khuôn mẫu phức tạp, phản ứng PCR nên được thực hiện với 5-10 chu kỳ nhiều hơn so với khuôn mẫu DNA tinh khiết. | |
| khuếch đại không đặc hiệu | Nhiệt độ gắn PCR quá thấp, số chu kỳ, nồng độ mồi hoặc nồng độ khuôn mẫu quá cao. | Tăng nhiệt độ gắn PCR và giảm số chu kỳ PCR, nồng độ mồi hoặc nồng độ khuôn mẫu. |
| Mồi PCR không khớp. | Thiết kế lại các đoạn mồi PCR. | |
| Nhiệt độ quá cao khi chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR hoặc thời gian quá dài sau khi hoàn tất quá trình chuẩn bị. | Việc chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR được thực hiện ở nhiệt độ thấp và phản ứng khuếch đại PCR được thực hiện càng sớm càng tốt sau khi quá trình chuẩn bị hoàn tất. | |
| Dải mục tiêu xuất hiện trong điều khiển âm tính | Nhiễm bẩn dụng cụ phẫu thuật hoặc thuốc thử. | Tất cả thuốc thử hoặc thiết bị trong thí nghiệm phải được hấp tiệt trùng. Cẩn thận và nhẹ nhàng khi xử lý để tránh trình tự mục tiêu bị hút vào súng mẫu hoặc tràn ra khỏi ống ly tâm. |
| Nhiễm chéo giữa các mẫu. | Mỗi dụng cụ lấy mẫu chỉ được sử dụng cho một mẫu; hoặc sau khi lấy một mẫu, nhúng mép dụng cụ lấy mẫu vào dung dịch natri hypoclorit 2%, rửa sạch nhiều lần, sau đó lau khô phần còn lại bằng khăn giấy sạch. |
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.