Sự miêu tả
Bộ PCR mô thực vật trực tiếp là bộ có thể khuếch đại trực tiếp các loại lá cây khác nhau bằng PCR, có khả năng thích ứng rộng và độ ổn định cao. Bộ sử dụng hệ thống đệm ly giải độc đáo, có thể ly giải nhanh nhiều loại mẫu thực vật và giải phóng DNA bộ gen. DNA bộ gen được giải phóng có thể được sử dụng trực tiếp làm khuôn mẫu mà không cần loại bỏ protein, RNA hoặc các chất chuyển hóa thứ cấp trong phản ứng PCR. Ngoài ra, bộ chỉ cần một lượng mẫu nhỏ, chỉ cần 1 mm lá cây là có thể sử dụng cho các thí nghiệm.
2×Plant Master Mix được cung cấp trong bộ dụng cụ này có khả năng tương thích khuếch đại mạnh và có thể sử dụng trực tiếp dịch phân hủy của mẫu làm khuôn mẫu để khuếch đại hiệu quả và đặc hiệu. Thuốc thử này là hỗn hợp phản ứng PCR cô đặc gấp 2 lần, chứa tất cả các thành phần được sử dụng để khuếch đại PCR ngoại trừ khuôn mẫu và mồi, giúp đơn giản hóa đáng kể quy trình vận hành và giảm khả năng nhiễm bẩn.
Bộ dụng cụ này có thể được sử dụng để xác định cây chuyển gen, phân tích kiểu gen thực vật, v.v.
Vận chuyển
Sản phẩm được vận chuyển kèm túi chườm đá.
Kho
1. Thuốc thử 10187-A [Đệm P1] có thể được bảo quản ở 4℃ trong 1 năm.
2. Thuốc thử 10187-B [Đệm P2], dùng để trung hòa dịch lysate, có lợi cho việc bảo quản mẫu trong thời gian dài hơn, có thể bảo quản ở nhiệt độ 4℃ trong 1 năm.
3. Thuốc thử 10187-C [2× Plant Master Mix] có thể được bảo quản ở nhiệt độ -20℃ trong 1 năm. Tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần.
Thận trọng
1. Khi làm thí nghiệm lá, nên sử dụng mô lá mới thu thập. Nếu là mô đông lạnh lâu ngày, cần bảo quản ở nhiệt độ -80°C. Nên tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần để tránh làm hỏng khuôn mẫu và ảnh hưởng đến hiệu quả PCR. Mô lá phù hợp với lá non. Nếu là lá trưởng thành, tránh sử dụng mô của gân chính của lá.
2. Nên khuếch đại đoạn có độ dài trong vòng 1 kb để có hiệu quả khuếch đại tốt nhất.
3. Khi lấy mẫu, sử dụng dụng cụ đục lỗ hoặc dao để lấy mẫu có kích thước phù hợp. Khi các mẫu khác nhau, cần phải vệ sinh dụng cụ đục lỗ hoặc dao mỗi lần trước khi xử lý mẫu.
4. Đối với mô lá, khuyến cáo lấy lá 1-10 mm, chiều dài lá quá nhỏ sẽ dẫn đến năng suất khuếch đại PCR thấp, quá lớn sẽ ức chế phản ứng PCR, sử dụng phương pháp bẻ nhiệt, nghiền bằng đầu pipet và nghiền bằng máy xay để xử lý lá cây. Sau khi xử lý, cần lắc và ly tâm. Đảm bảo lấy phần dịch nổi để thử nghiệm. Kết tủa sẽ ức chế nghiêm trọng phản ứng PCR.
5. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần khi thực hiện thí nghiệm.
6. Sản phẩm này CHỈ dùng cho mục đích nghiên cứu!
| Các vấn đề thường gặp | Nguyên nhân có thể | Giải pháp |
| Không có dải nào trong mẫu đối chứng dương tính và các mẫu cần thử nghiệm. | Hệ thống phản ứng PCR hoặc điều kiện phản ứng không phù hợp. | Sử dụng PCR gradient để khám phá các điều kiện phản ứng tối ưu cho PCR. |
| Việc bảo quản thuốc thử PCR không đúng cách sẽ làm chúng mất hoạt tính. | Hỗn hợp PCR 2× cần được bảo quản ở nhiệt độ -20℃, tránh đông lạnh và rã đông nhiều lần khi sử dụng. Nếu sử dụng thường xuyên, có thể bảo quản ở nhiệt độ 4°C trong thời gian ngắn. | |
| Các vấn đề thiết kế cơ bản. | Hãy thử thiết kế lại các đoạn mồi để kiểm tra. | |
| Mẫu đối chứng dương tính có dải quan tâm, còn mẫu cần thử nghiệm không có dải hoặc có dải yếu. | Tỷ lệ đệm ly giải và đệm trung hòa không phù hợp, hỗn hợp ly giải sẽ ảnh hưởng đến giá trị pH của hệ thống PCR. | Trong điều kiện bình thường, độ pH của hỗn hợp phân hủy trung hòa phải ở mức khoảng 7-8 (sản phẩm phân hủy và đệm P2 phải được trung hòa theo đúng tỷ lệ 5:1). |
| Hỗn hợp mẫu phân hủy đã được lưu trữ không đúng cách hoặc quá lâu, khiến bộ gen DNA bị phân hủy. | Hỗn hợp lysate có thể được bảo quản ở nhiệt độ 4°C trong 5 ngày, hãy thử sử dụng hỗn hợp lysate mới pha cho PCR. | |
| Số lượng mẫu được thêm vào không phù hợp. | Tối ưu hóa lượng mẫu được thêm vào trong phạm vi <5% của hệ thống phản ứng. | |
| Số chu kỳ PCR không đủ. | Tăng số chu kỳ PCR một cách thích hợp, tốt nhất là 35-40 chu kỳ. Do khuôn mẫu phức tạp, nhìn chung nên sử dụng thêm 5-10 chu kỳ phản ứng PCR so với sử dụng khuôn mẫu DNA tinh khiết. | |
| khuếch đại không đặc hiệu | Nhiệt độ gắn PCR quá thấp, số chu kỳ, nồng độ mồi hoặc nồng độ khuôn mẫu quá cao. | Tăng nhiệt độ gắn PCR và giảm số chu kỳ PCR, nồng độ mồi hoặc nồng độ khuôn mẫu. |
| Mồi PCR không khớp. | Thiết kế lại các đoạn mồi PCR. | |
| Nhiệt độ quá cao khi chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR hoặc thời gian đặt quá dài sau khi chuẩn bị. | Việc chuẩn bị hệ thống phản ứng PCR được thực hiện ở nhiệt độ thấp và phản ứng khuếch đại PCR được thực hiện càng sớm càng tốt sau khi quá trình chuẩn bị hoàn tất. | |
| Dải mục tiêu xuất hiện trong điều khiển âm tính | Nhiễm bẩn dụng cụ phẫu thuật hoặc thuốc thử. | Tất cả thuốc thử hoặc thiết bị trong thí nghiệm phải được hấp tiệt trùng.Hãy cẩn thận và nhẹ nhàng khi xử lý để tránh chuỗi mục tiêu bị hút vào súng mẫu hoặc tràn ra khỏi ống ly tâm. |
| Nhiễm chéo giữa các mẫu. | Mỗi dụng cụ lấy mẫu chỉ được sử dụng cho một mẫu; hoặc sau khi lấy một mẫu, nhúng lưỡi lấy mẫu vào dung dịch natri hypoclorit 2%, rửa sạch nhiều lần, sau đó lau khô phần còn lại bằng khăn giấy sạch. |
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.