Sự miêu tả
Bộ xét nghiệm PCR trực tiếp nâng cao Hieff® Blood là bộ xét nghiệm có thể khuếch đại trực tiếp các mẫu máu toàn phần mà không cần tinh chế DNA hoặc xử lý mẫu trước, tương thích với máu tươi, máu ướp lạnh (đông lạnh) và vết máu khô thương mại có chứa chất chống đông thông thường như EDTA, heparin, citrate, v.v. Bộ xét nghiệm này chứa sự kết hợp DNA polymerase được biến đổi gen có độ trung thực cao và khả năng kháng chất ức chế PCR, đệm PCR nâng cao Hieff® Blood 2× có hệ số kéo dài mạnh, hệ số tăng cường khuếch đại và hệ thống đệm được tối ưu hóa để khuếch đại hiệu quả 8 kb các đoạn gen trong điều kiện kéo dài nhanh và đặt thời gian kéo dài 3-5 giây/kb cho các đoạn dưới 2 kb, do đó rút ngắn đáng kể thời gian nhận dạng và xét nghiệm mẫu máu.
Thông số kỹ thuật
| Độ trung thực (so với Taq) | 1 × |
| Khởi động nóng | Đúng |
| Phần nhô ra | 3'-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase (Mã số: 10726) |
Thành phần
| KHÔNG. | Tên | 10188ES20 | 10188ES60 |
| 10188-A | 2× Hieff® Đệm PCR nâng cao máu | 500 μL | 2,5ml |
| 10188-B | Hieff® Hỗn hợp DNA Polymerase độ trung thực cao tiên tiến | 20 μL | 100 μL |
| 10188-C | Hỗn hợp mồi kiểm soát dương tính (mỗi loại 10 μM) | 100 μL | 200 μL |
| 10188-D | Đệm nạp DNA 10× | 1mL | 1mL |
Hướng dẫn
Hệ thống phản ứng PCR được đề xuất.
| Thành phần | Thể tích (μL) |
| ĐD2Ồ | đến 50 μL |
| 2× Hieff® Đệm PCR nâng cao máu | 25 μL |
| Mồi chuyển tiếp (10 μM) | 2 μL |
| Mồi ngược (10 μM) | 2 μL |
| Hieff® Hỗn hợp DNA Polymerase độ trung thực cao tiên tiến | 1 μL |
| Mẫu máu | X |
2. Nồng độ cuối cùng khuyến nghị là 0,4 μM cho mỗi mồi, nồng độ quá cao sẽ dẫn đến khuếch đại không đặc hiệu.
3. Nồng độ mẫu máu toàn phần tối ưu dao động từ 0,5% đến 20% và khuyến cáo sử dụng 10% làm điều kiện thử nghiệm ban đầu, tức là thêm 5 μL máu toàn phần làm mẫu vào hệ thống phản ứng 50 μL, chú ý tránh hút cục máu đông. Đối với vết máu khô được lưu trữ trên thẻ lọc Whatman®, có thể lấy khoảng 1 mm2 giấy tròn có vết máu và khuếch đại trực tiếp vào phản ứng PCR mà không cần xử lý trước.
Chương trình phản ứng
| Xe đạp bước chân | Nhiệt độ. | Thời gian | Chu kỳ |
| Biến tính ban đầu | 95℃ | 5 phút | 1 |
| Sự biến tính | 95℃ | 15 giây | 30-35 |
| Ủ | 60℃ | 15 giây | |
| Sự mở rộng | 72℃ | 3-10 giây/kb | |
| Cuối cùng sự mở rộng | 72℃ | 5 phút | 1 |
Nhiệt độ ủ là giá trị Tm chung hoặc thấp hơn giá trị Tm của mồi 1-2°C. Nếu sản phẩm khuếch đại ít đặc hiệu hơn, có thể thiết lập gradient nhiệt độ ủ để tìm điều kiện ủ tối ưu.
Thời gian kéo dài 10 giây/kb có thể khuếch đại hầu hết các đoạn mục tiêu dưới 8 kb, và 3-5 giây/kb có thể khuếch đại hầu hết các đoạn mục tiêu dưới 2 kb. Nếu hiệu suất khuếch đại thấp, thời gian có thể được kéo dài thích hợp đến 20-30 giây/kb và không được vượt quá 60 giây/kb.
Vận chuyển và lưu trữ
Sản phẩm nên được bảo quản ở nhiệt độ -15℃ ~ -25℃ vì 1 năm
Các con số
Ghi chú
1. Khuyến cáo nên sử dụng mẫu máu chiếm 10% tổng thể tích phản ứng, nghĩa là thêm 5 μL máu toàn phần vào hệ thống phản ứng 50 μL làm mẫu, chú ý tránh hít phải cục máu đông.
2. Thời gian kéo dài 10 giây/kb có thể khuếch đại hầu hết các đoạn mục tiêu dưới 8 KB, và 3-5 giây/kb có thể khuếch đại hầu hết các đoạn mục tiêu dưới 2 KB. Nếu hiệu suất khuếch đại thấp, thời gian có thể kéo dài đến 30 giây/kb.
3. Sau phản ứng PCR, nên ly tâm sản phẩm phản ứng ở tốc độ 4000 vòng/phút (1000×g) trong 1-3 phút để kết tủa các mảnh tế bào máu và lấy phần dịch trong để phân tích tiếp theo.
4. Sản phẩm này không thể được sử dụng trực tiếp để chẩn đoán y tế.
5. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần.
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.