Sự miêu tả
Sản phẩm này là một loại bacteriophage T7 RNA polymerase có nguồn gốc từ biểu hiện protein tái tổ hợp trong Escherichia coli. Nó xúc tác quá trình tổng hợp 5'→3' của RNA trên DNA mạch kép từ trình tự khởi động T7 của nó (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') và sử dụng NTP làm chất nền. DNA có đầu cụt tuyến tính mạch kép hoặc đầu nhô ra 5' có thể được sử dụng làm khuôn mẫu cho T7 RNA polymerase, do đó plasmid tuyến tính hóa và sản phẩm PCR có thể được sử dụng làm khuôn mẫu cho in vitro tổng hợp RNA.
Lưu ý: G* là cơ sở đầu tiên của bản phiên mã RNA.
Sản phẩm này được sản xuất theo quy định của GMP và được cung cấp dưới dạng lỏng.
Tính năng
- Tổng hợp các bản sao dài và bản sao ngắn, RNA có thể được sản xuất 100-200 μg với 1 μg khuôn mẫu DNA
- Năng suất cao hơn và dễ vận hành
- Hạ độc tố nội sinh
- Đã kiểm tra sự vắng mặt của endonuclease, exonuclease, RNase
Ứng dụng
- Chuẩn bị đầu dò RNA được đánh dấu phóng xạ
- Tạo RNA để nghiên cứu cấu trúc, quá trình xử lý và xúc tác của RNA
- Kiểm soát biểu hiện thông qua RNA anti-sense
- tổng hợp mRNA, sgRNA
Đặc điểm kỹ thuật
| Nguồn | Được thể hiện trong Vi khuẩn E. coli với gen RNA Polymerase T7 tái tổ hợp |
| Nhiệt độ tối ưu | 37℃ |
| Bộ đệm lưu trữ | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0,1% Triton X-100，50% (v/v) glycerin，pH7.9 tại 25℃ |
| Định nghĩa đơn vị | Lượng enzyme cần thiết để kết hợp 1 nmol [3H] GMP vào chất kết tủa không tan trong axit trong vòng 1 giờ ở 37°C và pH 8,0 được định nghĩa là 1 đơn vị. |
Chất lượng
| Các mục COA | Tiêu chuẩn |
| Hoạt động | 250-300U/μL |
| Chất đạm sự tập trung | ≥0,5mg/mL |
| Độ tinh khiết | ≥95% |
| Nội độc tố | <20 EU/mg |
| Protease còn lại | Tiêu cực |
| Exonuclease còn lại | Tiêu cực |
| Nickase còn lại | Tiêu cực |
| RNase còn lại | Tiêu cực |
| E. protein chủ của coli | <50ppm |
| Chủ thể E.coli ADN | <10fg/Đơn vị |
| Mycoplasma ADN | Tiêu cực |
Thành phần
| Số thành phần | Tên | 10625ES10 (10 KU) | 10625ES60 (100 KU) | 10625ES86 (2.500 KU) | 10625ES99 (100 MU) |
| 10625 | T7 RNA Polymerase đạt chuẩn GMP (250 U/μL) | 40 μL | 400 μL | 10ml | 400mL |
Vận chuyển và lưu trữ
Các sản phẩm đạt tiêu chuẩn GMP của T7 RNA Polymerase được vận chuyển bằng đá khô và có thể bảo quản ở nhiệt độ -15℃ ~ -25℃ trong một năm.
Các con số
Hình 1. RNA chuẩn được tổng hợp trong ống nghiệm bằng bộ dụng cụ tổng hợp RNA T7.
Phản ứng được ủ trong thiết bị PCR ở 37℃ trong 2 giờ, sau đó được tinh chế bằng hạt từ tính (Cat#12602). Kết quả sản lượng được phân tích bằng máy quang phổ NanoDrop như thể hiện trong Hình 1.
Hình 2. Minh họa phiên mã của RNA có độ dài khác nhau bằng bộ dụng cụ T7 tương ứng trong điện di đồ (Hình 2A), sơ đồ điện di mao quản (Hình 2B) và sắc ký đồ (Hình 2C)
Hình 3. Tổng hợp RNA có mũ trong ống nghiệm.
Phản ứng được ủ trong thiết bị PCR ở 37℃ trong 2 giờ, sau đó được tinh chế bằng hạt từ tính (Cat#12602). Kết quả sản lượng được thử nghiệm bằng máy quang phổ NanoDrop như thể hiện trong Hình 3A. Kết quả tính toàn vẹn được phân tích bằng phương pháp điện di mao quản như thể hiện trong Hình 3B.
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.