LZCap AU (3'Acm) là loại tương tự cap1. Sản phẩm được sử dụng để phiên mã với trình tự ban đầu là 5'AU3', và cấu trúc cap1 tự nhiên được tạo ra bằng cách đóng nắp phiên mã Cap1. So với Cap0 được tạo ra bằng phương pháp đóng nắp truyền thống, cấu trúc cap1 được tạo ra bởi CapAU (3'Acm) cho phép SaRNA có hoạt động và hiệu quả dịch mã cao hơn trong cơ thể sống.

Đã được cấp bằng sáng chế của Hoa Kỳ.

Thành phần

Chi tiết sản phẩm

LZCap^® Thiết kế mẫu DNA

LZCap^®AU(3'Acm) phù hợp với các trình tự khởi tạo bởi AG. Như thể hiện trong hình bên dưới, trình khởi tạo T7 (gạch chân) theo sau là trình tự AG có thể khởi tạo phiên mã hiệu quả.

Giao thức

1． Các thành phần cần thiết để rã đông cho thí nghiệm trên băng.

2． Tham khảo hệ thống phản ứng sau để cấu hình hệ thống phiên mã ở nhiệt độ phòng.

N1-Me-pUTP đã sửa đổi có thể được sử dụng thay cho UTP kiểu hoang dã. N1-Me-pUTP đã sửa đổi làm giảm khả năng sinh miễn dịch của mRNA. Henovcom cũng có thể cung cấp nucleotide N1-Me-pUTP đã được sửa đổi (Mã số: HN1002).

Ghi chú:

1)     LZCap^®AU(3'Acm) phù hợp với vectơ phiên mã vùng khởi động T7 có 5 trình tự khởi đầu là 'AU 3', điều này cần được xem xét khi xây dựng vectơ.

2)     Các thuốc thử, vật tư tiêu hao và hộp đựng được sử dụng trong thí nghiệm đều không bị nhiễm RNase.

3)     Người ta khuyến cáo nên sử dụng khuôn mẫu DNA dạng tuyến tính để phiên mã.

4)     Khi sử dụng các nucleotide biến đổi thay thế cho các nucleotide kiểu hoang dã, nồng độ cuối cùng của phản ứng không thay đổi.

5)     Nếu sản phẩm PCR được sử dụng làm khuôn mẫu DNA khởi đầu phiên mã, lượng khuôn mẫu DNA có thể giảm đi một nửa.

3． Trộn dung dịch phản ứng đã chuẩn bị, ly tâm trong thời gian ngắn và ủ ở 37°C trong 2-3 giờ. Nếu độ dài bản sao nhỏ hơn 100nt, tăng thời gian phản ứng lên 4-8 giờ.

Hồ sơ an toàn chung

Kho

Sản phẩm này có thể được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong hai năm.

Các biện pháp phòng ngừa

1. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc thiết bị bảo vệ cá nhân (PPE), chẳng hạn như áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần, khi sử dụng sản phẩm này.
2. Chỉ sử dụng cho mục đích nghiên cứu.
   

Câu hỏi thường gặp

1. LZCap được thiết kế như thế nào?

Enzym có khả năng nhận dạng tương đối "đặc hiệu" các chất nền. Do đó, khi thiết kế một cấu trúc mũ mới, một mặt, chúng ta cần những sửa đổi cấu trúc mới lạ cho mục đích cấp bằng sáng chế, nhưng mặt khác, chúng ta cố gắng duy trì sự tương đồng với các cấu trúc tự nhiên/đã biết càng nhiều càng tốt. Cấu trúc tự nhiên có một ribose 3' OH, có thể được sửa đổi (ví dụ, metyl hóa). Dựa trên cân nhắc này, chúng tôi đã chọn thêm một carbon ở vị trí 3' để có tính mới lạ về mặt sáng chế, tiếp theo là một NH để mô phỏng liên kết hydro của OH, và sau đó là một nhóm acetyl để giảm tính bazơ của NH và tăng cường khả năng liên kết hydro của nó. Hoạt động của LzCap tốt hơn methylatmũ tự nhiên ed, có thể là do liên kết hydro tăng lên. So với nhóm methyl và methoxy, nhóm acetyl amino cũng có thể làm tăng tương tác van der Waals giữa chất nền (cap) và yếu tố khởi đầu (enzyme).

2. Nhóm acetyl amino có ổn định không?

Nhóm acetyl amino đã đủ ổn định. Nó ổn định hơn nhiều so với vị trí 7-methyl hóa và liên kết phosphodiester, là những phần kém ổn định nhất của mũ.

Vui lòng liên hệ với chúng tôi để biết thêm chi tiết về cấp phép LZCap.