Bộ nhân bản một bước Hieff Clone™ Universal II là bộ nhân bản mới được nâng cấp.

Thế hệ thứ 2 được tối ưu hóa cẩn thận 2× Hieff Clone™ Universal II Enzyme Premix kết hợp enzyme tái tổ hợp và đệm cần thiết cho phản ứng tái tổ hợp với việc bổ sung chất tăng cường tái tổ hợp độc đáo để cải thiện đáng kể hiệu quả của quá trình nhân bản tái tổ hợp.

Bộ dụng cụ có thể được hướng đến việc nhân bản các sản phẩm PCR đến bất kỳ vị trí nào của bất kỳ vectơ nào, tương thích với các sản phẩm PCR chưa tinh chế, các sản phẩm PCR thu hồi trực tiếp, nồng độ thấp của các sản phẩm thu hồi từ cao su, sản phẩm này có thể lắp ráp lại hàm lượng GC cánh tay tương đồng là 30% -70% của đoạn nối. Vectơ đã được tuyến tính hóa hoàn toàn và các trình tự tương đồng của đầu vectơ tuyến tính hóa có kích thước 15-25 bp đã được đưa vào đầu 5 'của các đoạn mồi PCR dương tính và ngược của đoạn chèn, do đó đầu 5' và 3 'của các sản phẩm PCR của đoạn chèn có cùng trình tự chính xác tương ứng với hai đầu của vectơ tuyến tính hóa. Dưới tác động của enzyme tái tổ hợp, phản ứng tái tổ hợp của sản phẩm PCR và vectơ tuyến tính hóa có thể hoàn thành chỉ trong 5 phút ở 50℃. Tỷ lệ nhân bản dương tính có thể đạt hơn 95%.

Đặc trưng

Đơn giản: Nhân bản tối đa sáu đoạn DNA trong một phản ứng duy nhất.

Linh hoạt: Nguyên tắc thiết kế cho phép lắp ráp thành bất kỳ vector nào bạn chọn.

Hiệu quả: Hiệu quả cho việc nối một đến bảy đoạn.

Ứng dụng

Nhanh Nhân bản: Phương pháp này cho phép nhiều đoạn DNA chồng chéo được liên kết liền mạch trong phản ứng đẳng nhiệt một bước kéo dài 5–50 phút.

Nhân bản có định hướng; Đột biến định hướng vị trí.

Thông số kỹ thuật

Thành phần

Kho

Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong 1 năm.

Các con số

Fhình ảnh 1. 10 ng mảnh đơn đầu vào thấp được kết nối trong trạng thái không tiếp nhận hồi sức của hệ thống nhỏ 6μL. Kết quả cho thấy 10923ES có hiệu suất tốt hơn các sản phẩm cạnh tranh, với hiệu suất kết nối cao, nhiều khuẩn lạc hơn và tỷ lệ dương tính là 100%. AB: Đĩa clony. Tỷ lệ mol của chất mang (10 kb) so với đoạn chèn (1 kb) là 1:2. C: Bản đồ điện di được xác định bằng PCR đoạn chèn, M: Yeasen 10505ES.

Hình 2. Sáu đoạn (tổng chiều dài 7,6 kb) được nhân bản vào plasmid 11,6 kb. Kết quả cho thấy 10923ES có hiệu suất tốt hơn các sản phẩm cạnh tranh, với nhiều khuẩn lạc hơn và tỷ lệ dương tính là 100%. AB: Đĩa khuẩn lạc. Tỷ lệ mol của chất mang (11,6 kb) so với các mảnh chèn là 1:2. C: Phân tích điện di của mảnh chèn, M: Yeasen 10505ES. Đầu vào plasmid：200 ng/20 µL, 50°C, 50 phút.

Trích dẫn & Tài liệu tham khảo liên quan:

[1] Zhang H, Shao S, Zeng Y, et al. Sự tách pha có thể đảo ngược của HSF1 là cần thiết cho phản ứng phiên mã cấp tính trong quá trình sốc nhiệt. Tế Bào Nat. 2022;24(3):340-352. (IF:28.824)

[2] Xu Y, Yu Q, Wang P, et al. Một chất phân hủy c-Myc phân tử nhỏ có chọn lọc có khả năng làm giảm mạnh các khối u biểu hiện quá mức c-Myc gây chết người. Khoa học nâng cao (Weinh). 2022;9(8):e2104344. (NẾU:16.806)

[3] Guan B, Jiang YT, Lin DL, Lin WH, Xue HW. Axit phosphatidic ức chế quá trình tự thực thông qua ức chế cạnh tranh bằng cách liên kết với các protein GAPC (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase) và PGK (phosphoglycerate kinase) [được xuất bản trực tuyến trước khi in, ngày 15 tháng 3 năm 2022]. Tự thực. 2022;1-15. (NẾU:16.016)

[4] He X, Li Y, Chen Q, et al. O-GlcNAcylation và ổn định SIRT7 thúc đẩy sự tiến triển của ung thư tuyến tụy bằng cách ngăn chặn tương tác SIRT7-REGγ [được xuất bản trực tuyến trước khi in, ngày 14 tháng 4 năm 2022]. Sự khác biệt của tế bào chết. 2022;10.1038/s41418-022-00984-3.(NẾU:15.828)

[5] Zhou T, Zhu X, Ye Z, et al. Biến thể tăng cường nguy cơ lupus gây ra tình trạng rối loạn điều hòa IRF8 thông qua cơ chế phối hợp lncRNA và methyl hóa DNA. Cộng đồng quốc gia. 2022;13(1):1855. Xuất bản ngày 6 tháng 4 năm 2022. (NẾU: 14.919)

[6] Li T, Chen X, Qian Y, et al. Một thiết bị quang di truyền tổng hợp dựa trên BRET để biểu hiện gen chuyển mạch xung cho phép cân bằng glucose ở chuột. Cộng đồng quốc gia. 2021;12(1):615. Xuất bản ngày 27 tháng 1 năm 2021. (NẾU: 14.919)

[7] Wu P, Zhang T, Liu B, et al. Điều hòa cơ học của cấu hình Peptide-MHC lớp I quyết định nhận dạng kháng nguyên TCR. Tế bào Mol. 2019;73(5):1015-1027.e7. (NẾU:14.548)

[8] Xiong L, Liu S, Chen S, et al. Một loại hệ thống kháng vi-rút dựa trên phosphorothioation DNA mới trong vi khuẩn cổ. Cộng đồng quốc gia. 2019;10(1):1688. Xuất bản ngày 11 tháng 4 năm 2019. (IF:11.878)

[9] Jiang L, Wang Y, Xia A, et al. Một biến thể đa hình một nucleotide tự nhiên trong sulfite reductase ảnh hưởng đến quá trình đồng hóa lưu huỳnh ở ngô. Phytol mới. 2021;232(2):692-704. (NẾU:10.152)