Hifair^™ Bộ RT-qPCR một bước tiên tiến là bộ định lượng huỳnh quang dựa trên thuốc nhuộm SYBR Green I. Sử dụng các đoạn mồi đặc hiệu gen, phản ứng phiên mã ngược và qPCR được hoàn thành trong một ống, loại bỏ nhu cầu mở nắp và thao tác hút mẫu lặp đi lặp lại, cải thiện đáng kể hiệu quả xét nghiệm và giảm nguy cơ nhiễm bẩn. Đối với các mẫu RNA, bộ dụng cụ sử dụng Hifair chịu nhiệt^™ V Reverse Transcriptase cho tổng hợp cDNA hiệu quả và UNICON^™ HotStart Taq DNA Polymerase để khuếch đại định lượng. Trong hệ thống đệm được tối ưu hóa, độ nhạy của bộ dụng cụ có thể lên tới 0,1 pg đối với các mục tiêu biểu hiện cao và lên tới 1 pg đối với các mục tiêu biểu hiện vừa phải, và bộ dụng cụ này cũng phù hợp để khuếch đại và định lượng các mẫu DNA. Bộ dụng cụ này phù hợp để khuếch đại và định lượng các mẫu DNA. Nó cho phép phát hiện và định lượng nhạy các axit nucleic từ các mẫu thực vật và động vật, tế bào và vi sinh vật khác nhau.

Thông số kỹ thuật

Thành phần

Kho

Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ xa từ ánh sáng vì 1 năm.

Hướng dẫn

1. Sự phản ứng lại hệ thống cấu hình*****

* Các mô hình Low Rox và các mô hình không có hiệu chỉnh Rox được chuẩn bị trực tiếp theo hệ thống phản ứng trên. Khi sử dụng mô hình High Rox, thêm Hieff™ SP High Rox vào 2 x Hifair™ Advanced SG Buffer ở tỷ lệ 1:250 v/v, trộn đều và ly tâm. 2× Hifair^™ Bộ đệm SG tiên tiến với Hieff™ SP High Rox không ảnh hưởng đến việc sử dụng các mô hình hiệu chỉnh Low Rox và No Rox.

** Nồng độ mồi cuối cùng là 0,2 μmol/L, cũng có thể được điều chỉnh giữa 0,1 và 1 μmol/L cho phù hợp.

*** Thuốc thử cực kỳ nhạy, với Tổng RNA trong khoảng 1 pg-1 μg và thử nghiệm mẫu người cho thấy lượng đầu vào tối ưu là 1 pg-100 ng, kiểm soát giá trị Ct tổng thể trong khoảng 15-30 khi thích hợp.

**** Nên sử dụng 20 μL hoặc 50 μL để đảm bảo tính hợp lệ và khả năng tái tạo của quá trình khuếch đại gen mục tiêu.

***** Vui lòng chuẩn bị trong băng ghế siêu sạch và sử dụng đầu tip và ống phản ứng không có cặn nuclease; khuyến nghị sử dụng đầu tip có hộp lọc. Tránh nhiễm chéo và nhiễm khí dung.

2）Chương trình phản ứng

*Nhiệt độ phiên mã ngược có thể được lựa chọn trong khoảng 50-55°C theo nhu cầu thực nghiệm. Đối với mẫu DNA, quá trình phiên mã ngược có thể được bỏ qua.

** Trong những trường hợp đặc biệt, nhiệt độ ủ/kéo dài có thể được điều chỉnh theo giá trị Tm của mồi, nhiệt độ khuyến nghị là 60°C.

3）Mô hình áp dụng

Các mẫu thiết bị không yêu cầu hiệu chuẩn Rox:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 giây;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Khoa học ứng dụng: LightCycler 480, LightCycler2.0, Người đi vòng ánh sáng 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Các mô hình áp dụng Low Rox:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 và 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Máy xay sinh tố Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Các mô hình áp dụng High Rox*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Nhanh, StepOne, StepOne Plus.

* Đối với các mẫu High Rox, lưu ý rằng Hieff™ SP High Rox phải được thêm theo tỷ lệ 2 x Hifair^™ Đệm SG nâng cao trước khi sử dụng.

Ghi chú

1. Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu.
2. Vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần để đảm bảo an toàn.

Tài liệu:

Bảng dữ liệu an toàn

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-C-MSDS-HB230927.PDF

Hướng dẫn sử dụng