Sự miêu tả
Hieff™ T4 DNA Ligase đa năng là một biến thể của T4 DNA Ligase. Enzym này thích hợp để xúc tác phản ứng gắn kết giữa các phân tử kết dính hoặc đầu tù. Đây là sản phẩm enzyme đơn được thiết kế để kết nối các đoạn DNA và bộ điều hợp trong quá trình chuẩn bị thư viện trong giải trình tự thế hệ tiếp theo (NGS). Hieff® Tính linh hoạt của T4 DNA Ligase đã được xác nhận rộng rãi thông qua giải trình tự thông lượng cao và thể hiện chất lượng đặc biệt.
Tính năng
- Độ trung thực cao
- Chịu nhiệt
Tìm hiểu thêm về sự phát triển đa năng của T4 DNA ligase
Thông số kỹ thuật
| Nguồn | E.coli tái tổ hợp |
| Bộ đệm lưu trữ | 50 MM Tris-HC1,100 mM KC1,0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50%Glycerol, pH 7,5士0,2 ở 25℃ |
| Định nghĩa đơn vị | Trong hệ thống phản ứng gắn kết 20 μL, lượng enzyme cần thiết để xúc tác gắn kết hơn 50% các đoạn DNA, khi 6 μg λDNA-Hind III phản ứng ở 16°C trong 30 phút, được định nghĩa là 1 đơn vị hoạt động (U). |
Thành phần
| Thành phần | Tên | 12996ES60 60KU | 12996ES62 600KU |
| 12996-A | Hieff® T4 DNA Ligase đa năng (600 U/µL) | 100 μL | 1000 μL |
| 12996-B | Đệm 10×T4 DNA Ligase | 500 μL | 3×1500 μL |
Kho
Sản phẩm này nên được bảo quản ở nhiệt độ -25~-15℃ trong 2 năm.
Nhân vật
Vui lòng để lại tin nhắn để hỏi về dữ liệu so sánh hiệu suất giữa enzyme này và các ligase T4 DNA thông thường và chịu nhiệt hàng đầu khác.
Ghi chú
1. Vui lòng sử dụng áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần，vì sự an toàn của bạn.
2. Nếu có một lượng nhỏ kết tủa xuất hiện trong dung dịch đệm, thì đó là hiện tượng bình thường. Vui lòng đảo ngược và trộn đều dung dịch đệm trước khi sử dụng.
3. Sản phẩm này chỉ dùng cho mục đích nghiên cứu.
Giao thức
1. Các bộ dụng cụ chuẩn bị thư viện DNA chính thống hiện tại sử dụng phương pháp dựa trên liên kết thường không yêu cầu các bước tinh chế sau khi sửa chữa đầu và nối đuôi A. Các đoạn DNA được trực tiếp thực hiện liên kết bộ chuyển đổi mà không cần tinh chế. Bộ dụng cụ này tương thích với các phương pháp chính thống hệ thống sửa chữa đầu và hệ thống nối chữ A có sẵn trên thị trường để thắt ống nối liền mạch.
Tiến hành phản ứng sau trong ống ly tâm nhỏ trên đá, trộn nhẹ bằng cách hút hoặc lắc, ly tâm trong thời gian ngắn và làm bất hoạt ở nhiệt độ 20°C trong 15 phút.
Bảng 1. Hệ thống phản ứng cho việc nối bộ chuyển đổi
| Thành phần | Âm lượng（μL) | Nồng độ cuối cùng |
| DNA đuôi dA | 60 | 1× |
| Đệm 10×T4 DNA Ligase | 10 | 0,1 μM-0.5 μM |
| 50% PEG6000 | 12* | 1 ng-400 ng |
| Bộ chuyển đổi DNA | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Nước không có nuclease | hướng lên đến 100 | - |
【Ghi chú】*Dung dịch PEG6000 50% không được cung cấp trong bộ sản phẩm, bạn sẽ phải tự pha chế
**Vui lòng tham khảo Bảng 2 cho lượng bộ chuyển đổi.
***Lượng T4 DNA Ligase có thể được thêm vào tùy theo nhu cầu, từ 3-5 μL.
2. Nồng độ của bộ điều hợp ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu quả liên kết và sản lượng thư viện. Việc sử dụng quá nhiều bộ điều hợp có thể dẫn đến TRONG nhiều bộ điều hợp dimer hơn, trong khi mức sử dụng thấp có thể ảnh hưởng đến hiệu quả kết nối và sản xuất thư viện. Bảng 2 liệt kê lượng bộ điều hợp được khuyến nghị cho các lượng DNA đầu vào khác nhau.
Bảng 2. Lượng bộ điều hợp được khuyến nghị cho 100 pg-1 μg DNA đầu vào
| Đầu vào DNA | Sự tập trung |
| 0,1 ng | |
| 1 ng | 0,5 μM |
| 10 ng | 1 μM |
| 25 ng | 2 μM |
| 100ng~1000ng | 10 μM |
【Ghi chú】：Số lượng bộ điều hợp có thể điều chỉnh theo yêu cầu trong bảng trên.
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.